Agar Cled

Corynebacterium stratum pada agar cled. Sumber: Nathan Reading dari Halesowen, UK, CC oleh 2.0, Wikimedia Commons

Apa agar cled itu?

Dia Agar Cled (Cistine-Lactose-Electrolytes-Exhicient) adalah cara kultur padat diferensial, digunakan untuk diagnosis infeksi saluran kemih. Komposisi media kultur dirancang untuk pertumbuhan patogen urin yang baik dan sangat ideal untuk kuantifikasi unit bentuk usus besar (UFC).

Media kultur cled tidak selektif, karena mikroorganisme gram -negatif dan gram -positif dapat tumbuh di dalamnya. Tapi ini bukan masalah, karena sebagian besar infeksi urin disebabkan oleh jenis mikroorganisme tunggal.

Dalam kasus infeksi polimikroba, 2 atau 3 bakteri yang berbeda dapat dicapai, tetapi sangat jarang, dan sebagian besar waktu mereka adalah sampel yang terkontaminasi.

Di antara bakteri gram -negatif yang dapat tumbuh dalam media ini adalah basil yang termasuk dalam keluarga Enterobacteriaceae dan basil enterik lainnya, menjadi uroopatogen yang paling sering terisolasi dalam sampel urin berikut: berikut ini: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Morganella Morganii, Pseudomonas aeruginosa, diantara yang lain.

Juga, di antara bakteri gram -positif yang dapat tumbuh di media ini Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophytic, Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Chorynebacterium SP, Lactobacillus SP Dan mereka bahkan bisa menumbuhkan ragi, seperti kompleks Candida albicans.

Namun, karena komposisi kimia lingkungan, itu tidak memungkinkan pertumbuhan beberapa patogen genitourinari yang menuntut, seperti Neisseria Gonorrhoeae, Gardnerella Vaginalis, diantara yang lain.

Fondasi agar cled

Media kultur cled memiliki sumber ekstrak energi daging, kasein terhidrolisis dan gelatin hidrolyz terhidrolisis. Mereka memberikan nutrisi untuk pengembangan bakteri kecil yang menuntut.

Ini juga mengandung sistin, asam amino yang memungkinkan pertumbuhan coliform, dapat dibedakan dengan ukurannya yang kecil.

Dapat melayani Anda: faktor virulensi

Ini juga mengandung laktosa karbohidrat yang dapat difermentasi, sehingga media ini berbeda, mampu membedakan bakteri fermentasi laktosa yang tidak memfermentasi.

Fermentasi bakteri mengubah pH medium berdasarkan produksi asam, mengembangkan koloni kuning, sedangkan bakteri non -fermentasi tidak menghasilkan perubahan dalam medium, oleh karena itu, mereka mengambil pewarnaan agar asli, warna hijau.

Reaksi fermentasi terungkap berkat keberadaan indikator pH, yang dalam media ini berwarna biru bromotitimol.

Di sisi lain, konsentrasi rendah elektrolit medium menghambat pertumbuhan invasif khas genus Proteus, disebut efek berkerumun. Ini menghasilkan keuntungan sehubungan dengan media lain, karena memungkinkan penghitungan UFC, termasuk jika gender ada Proteus.

Namun, konsentrasi elektrolit yang rendah menghambat pertumbuhan beberapa spesies genus Shigella, Ini menjadi kerugian sehubungan dengan media lain.

Foundation of the Cled Agar (Bevis)

Ada varian atau modifikasi dari media ini, dibuat oleh Bevis, yang memasukkan komposisi asam fuchsin asli (Andrade). Tindakan yang sama bersama -sama dengan bromotitimol biru untuk membedakan bakteri fermentasi dari non -fermentasi.

Perbedaan antara lingkungan konvensional dan yang dimodifikasi adalah warna yang diadopsi koloni. Dalam kasus bakteri fermentasi laktosa, koloni memperoleh warna oranye kemerahan dengan halo merah muda atau merah, sedangkan non-fermentasi adalah jerawat abu-abu.

Aplikasi

Cled agar digunakan khusus Untuk sampel urin sampel. Penggunaan media ini sangat sering terjadi di laboratorium Eropa, sedangkan di Amerika kurang digunakan.

Dapat melayani Anda: Amensalisme: Karakteristik, contoh, perbedaan dengan makan malam

Pengumpulan sampel harus memenuhi parameter tertentu untuk mendapatkan hasil yang dapat diandalkan, termasuk:

Tidak menggunakan antibiotik sebelum mengambil sampel.

Lebih disukai mengambil urin jam pertama pagi itu, karena lebih terkonsentrasi, ketika tidak mungkin untuk mengambil sampel dengan metode invasif.

Cuci alat kelamin dengan baik sebelum mengambil sampel.

Buang jet buang air kecil pertama dan kemudian letakkan wadah.

Kumpulkan antara 25 hingga 30 ml urin dalam wadah steril berlabel baik.

Segera ambil laboratorium yang dikelilingi di atas es.

Itu harus diproses sebelum 2 jam dikeluarkan atau didinginkan pada suhu 4 ° C selama maksimal 24 jam.

Sampel urin

Sampel urin harus diencerkan 1:50.

Untuk pengenceran, colloqar 0,5 ml urin pasien dan encerkan dengan 24,5 mL larutan fisiologis steril. Ukur 0,1 mL urin yang diencerkan dan menabur dengan permukaan dengan drigalski spatula pada media cled.

Ini adalah metode yang ditunjukkan untuk menghitung koloni. Itulah sebabnya digunakan dalam sampel urin, karena hasilnya harus diekspresikan dalam UFC/mL.

Untuk kuantifikasi koloni yang diperoleh, lanjutkan sebagai berikut: Hitung koloni lempeng dan gandakan dengan 10 dan kemudian dengan 50. Ini adalah jumlah UFC/mL urin.

Penafsiran

Entitas di atas 100.000 UFC/ML -Indica Infeksi Uriner.

Temu di bawah 1000 UFC/ML- Tidak ada infeksi.

Antara 1000-10.000 UFC/ML -Dudoso, kemungkinan kontaminasi, sampel ulang.

PENGENAL

Gram harus dibuat untuk koloni yang ditanam di cled.

Dapat melayani Anda: katalase: karakteristik, struktur, fungsi, patologi

Misalnya, jika itu adalah bacillus gram -negatif, itu akan ditaburkan pada agar MacConkey, di mana fermentasi atau tidak laktosa dikuatkan dikorotasi. Selain itu, agar bergizi terpasang untuk melakukan uji oksidase.

Dalam hal Gram mengungkapkan kelapa positif gram, itu dapat dikenakan agar mannitol asin dan agar bergizi. Di akhir uji katalase dilakukan. Akhirnya, jika ragi diamati, itu akan ditaburkan pada agar Sabouraud.

Banyak laboratorium mengabaikan penggunaan medium cled dan lebih suka menggunakan darah, mackonkey dan agar bergizi untuk menabur sampel urin.

Persiapan

Dalam felola dengan satu liter air suling, larut 36,2 gr dari agar bubuk cled. Setelah 5 menit istirahat, panaskan agar yang disusun kembali, aduk terus sampai mendidih selama 1 menit.

Kemudian sterilisasi pada 121 ° C selama 15 menit dalam autoklaf. Waktu selesai, tarik dari autoclave dan biarkan dingin sampai suhu 45 ° C tercapai. Selanjutnya, disajikan antara 15-20 ml pada setiap petri steril.

Piring yang dilayani prosedur harus dilakukan di dalam lonceng aliran laminar atau di depan Bunsen yang lebih ringan, untuk menghindari kontaminasi.

Pelat yang disajikan diizinkan untuk memperkuat, memesan dalam bentuk terbalik dan disimpan dalam lemari es (2-8 ° C) sampai digunakan.

PH akhir dari media yang disiapkan harus pada 7,3 ± 0,2.

Referensi

1. Rekomendasi untuk diagnosis mikrobiologis infeksi urin. Anak laki -laki. Infectol. Pulih dari Scielo.org.
2. Setengah cled. Pulih dari Britanialab.com.