Kepala czapek, persiapan, penggunaan dan keterbatasan

Dia Agar Czapek (CZA) adalah media kultur padat selektif yang dirancang khusus untuk penanaman bakteri dan jamur saprofit. Itu diciptakan oleh ahli botani Friedrich Johann Franz Czapek, yang berasal dari Polandia, dan ahli kimia Amerika Arthur Wayland Dox; Itulah mengapa agar ini juga dikenal sebagai Czapek-Dox Half.

Media asli adalah cair, tetapi kemudian agar ditambahkan untuk melakukan media padat. Media CZAPEK terdiri dari natrium nitrat, bipotasik fosfat, magnesium sulfat, kalium klorida, ferrous sulfat, sukrosa, agar dan air suling.

Czapek a. Aspergillus parasiticus b. Aspergillus fumigatus Sumber: a. MedMyco [CC BY-SA 4.0 (https: // createveCommons.Org/lisensi/by-sa/4.0)]/ b. Foto: DR. David Midgley. Wikipedia.com

Agar Czapek adalah 7.3, tetapi ada varian yang ditambahkan asam laktat 10% yang pH 3,5. Media asam ini digunakan untuk penanaman mikroorganisme asidofilik.

Di sisi lain, beberapa rumah komersial memodifikasi komposisi agar CZAPEK dengan mengubah magnesium sulfat dan fosfat bipotasik oleh glyceophosphate; Modifikasi ini mencegah endapan magnesium fosfat yang diamati dengan formula konvensional. Demikian juga, ada varian lain yang ditambahkan ekstrak ragi.

Akhirnya, Czapek Agar direkomendasikan oleh American Public Health Association APHA untuk studi Actinomycetes SP, Aspergillus SP, Paecilomyces SP Dan Penicillium sp. Spesies ini ditandai dengan menjadi mikroorganisme lingkungan dan patogen oportunistik.

[TOC]

Dasar

Media ini mengandung sukrosa; Karbohidrat ini berfungsi sebagai sumber karbon, sedangkan natrium nitrat adalah sumber nitrogen, tetapi tidak seperti yang lain berarti nitrogen yang disediakan adalah tipe anorganik.

Untuk alasan ini media CZAPEK dianggap selektif, karena hanya dapat mengembangkan mikroorganisme yang mampu menggunakan senyawa anorganik sebagai satu -satunya sumber nitrogen.

Sebagai zat pengatur osmolaritas medium adalah bipotasic fosfat. Di sisi lain, magnesium sulfat, kalium klorida dan ferrous sulfat memberikan mineral penting untuk pertumbuhan mikroorganisme saprofit (kehidupan bebas). Dengan formula ini, endapan magnesium fosfat terbentuk.

Itu dapat melayani Anda: akun standar agar: fondasi, persiapan dan penggunaan

Akhirnya, agar agar adalah senyawa yang memberikan konsistensi padat terhadap lingkungan dan air adalah pelarut dari semua komponen.

Dengan formula agar Czapek yang dimodifikasi tidak ada pembentukan endapan dan meningkatkan pertumbuhan pertumbuhan beberapa jamur.

Keasaman ekstrem dari agar asam CZAPEK menjadikan ini cara yang lebih selektif, hanya memungkinkan pertumbuhan mikroorganisme asidofilik, yang mampu menggunakan nitrogen anorganik anorganik. Sementara, agar-agar Czapek-Levadura meningkatkan kinerja jamur tertentu.

Persiapan

Half Czapek-Dox

Beratnya 49 gr dari kultur dehidrasi dan larut dalam air suling. Oleskan panas untuk mendidih. Kocok campuran sesering mungkin sampai benar -benar larut.

-Agar Czapek

Distribusikan campuran yang dilarutkan dalam tabung dan autoklavasi pada 121 ° C selama 15 menit. Saat menghapus dari autoclave, homogenisasi sebelum tidur dan biarkan mengeras.

-Piring agar Czapek

Autoklavasi campuran dilarutkan pada 121 ° C selama 15 menit dan saat membiarkan dingin pada 50 ° C, menghomogenisasi dan menuangkan 20 mL ke dalam petri steril. Biarkan menguatkan, berinvestasi, dan simpan di lemari es sampai digunakan.

PH harus 7,3 ± 0,2. Warna media dehidrasi berwarna putih dan disiapkan adalah amber ringan, sedikit berawan karena adanya endapan flokulan.

Setengah czapek asam pH

Persiapkan seperti yang dijelaskan, tetapi menambahkan 10 ml asam steril steril ke 10% untuk setiap liter media yang disiapkan. Media CZAPEK yang dimodifikasi harus pada pH 3,5 ± 0,2.

Setengah czapek yang dimodifikasi

Beratnya 45,4 gr dari media dehidrasi dan larut dalam 1 liter air. Sisa persiapan sama dengan yang dijelaskan di atas. Warna media dehidrasi berwarna putih dan disiapkan berwarna keputihan. PH akhir medium adalah 6,8 ± 0,2.

Itu dapat melayani Anda: vimentin: karakteristik, struktur, fungsi dan penggunaan

Half Czapek-Levadura

Juga disebut czapek-ekstrak ragi (CYA). Berisi elemen -elemen dari Czapek Agar Plus Ekstrak Ragi Klasik.

Menggunakan

Media CZAPEK digunakan untuk mencari mikroorganisme saprofit dalam sampel tanah, sayuran, biji -bijian, udara, serangga, antara lain.

CZAPEK A agar asam digunakan untuk pertumbuhan mikroorganisme acidophilik, sedangkan agar Czapek yang dimodifikasi sangat berguna untuk pembentukan clamidospora pada spesies kompleks Candida albicans.

Akhirnya, agar Czapek -levadura sangat berguna untuk isolasi Aspergillus dan Penicillium.

Ditabur

-Agar Czapek

Untuk mencari actinomycetes di tanah, lanjutkan sebagai berikut: Sampel dengan air fenolisasi 30 menit diolah dan kemudian 1 mL suspensi dalam agar CZAPEK ditanam. Inkubasi pada 28 ° C selama 5 hingga 7 hari.

Untuk sampel sayuran, biji -bijian dan serangga mereka ditempatkan langsung di agar. Pengenceran juga dapat dilakukan dan menabur 0,1 ml pada permukaan agar.

-Agar Czapek yang dimodifikasi

Untuk yang ditaburkan, tangan lurus atau jarum digunakan, itu diserap dengan swab dan menginokulasi sendok membuat tusukan sampai menyentuh pangkal pelat. Inkubasi selama 24 jam pada suhu 28 ° C dan periksa dengan mikroskop di atas dan di bawah pelat untuk mengamati apakah clamidospora telah terbentuk.

Suhu dan waktu inkubasi

Suhu dan waktu inkubasi bervariasi tergantung pada jenis mikroorganisme yang dicari untuk mengisolasi. Biasanya pelat diinkubasi satu hingga dua minggu dalam kisaran suhu 20 hingga 25 ° C.

Namun, ada kondisi khusus untuk beberapa strain. Sebagai contoh, sebagian besar spesies dari genus Aspergillus memiliki pertumbuhan yang optimal pada 30 ° C; Namun KE. Fumigatus tumbuh pada suhu 50 ° C.

Adapun waktu inkubasi satu atau dua minggu adalah normal Candida albicans Itu dapat berkembang dalam 24 hingga 48 jam pada 25 ° C.

Dapat melayani Anda: lipogenesis: karakteristik, fungsi dan reaksi

Karakteristik beberapa koloni di media ini

-Penicillium atravenetum

Itu terjadi dalam 12 hari inkubasi pada 27 ° C. Koloninya kecil (25 mm).

Koloni terlihat velisting, dengan tepi putih yang ditentukan dan di tengahnya menyajikan nada biru kehijauan yang setuju menjadi abu -abu. Kebalikan dari koloni adalah oranye, ditempatkan di tengah warna yang sama dengan produksi pigmen.

-Aspergillus Niger

Itu berkembang dengan miselium putih hingga kuning dan spora hitam.

-Candida albicans

Koloni cahaya krim krim berkembang dengan jernih. Dalam bentuk Czapek Agar yang dimodifikasi.

-Aspergillus parasiticus

Miselium hijau gelap berkembang dalam 7 hari pada suhu 25 ° C.

Qa

Untuk mengevaluasi kualitas media kultur, strain kontrol bersertifikat dapat ditaburkan, seperti: Aspergillus Niger MKTA 16404, Candida albicans MKTA 10231.

Aspergillus Niger Mengembangkan miselium putih hingga kuning dan spora hitam dalam waktu sekitar 5 hari, sementara Candida albicans Ini akan memiliki pertumbuhan yang memuaskan dalam 24 jam inkubasi pada 25 ° C; Koloni berwarna krem.

Batasan

Beberapa penelitian telah mengungkapkan bahwa untuk pemulihan actinomycetes, agar dengan kinerja terbaik adalah agar paus dekstrosa, meninggalkan agar Czapek di tempat kedua, tetapi untuk pemulihan Aspergillus dan Penicillium, agar Czapek adalah salah satu yang memberikan pemulihan terbesar yang paling besar, Czapek adalah salah satu yang memberikan yang terbesar. kecepatan.

Referensi

1. Dávila M, dkk. Actinomycetes antagonis terhadap jamur fitopatogenik kepentingan pertanian. Putaran. Mex. sains. Pertanian 2013, 4 (8): 1187-1196. Tersedia di: Scielo.org.
2. Luna M, Lozada dan, gandum. Isolasi galur Aspergillus Niger, Ocratoxin A Produser, di Café Verde (Arabica Coffea) disimpan. Putaran. Mex. Mikrofon . 2010; 32: 63-68. Tersedia di.Scielo.org.
3. Kontributor Wikipedia. Czapek Medum. Wikipedia, ensiklopedia gratis. 13 Januari 2019, 20:30 UTC. Tersedia di: di.Wikipedia.org
4. Laboratorium Conda Pronadisa. Agar Czapek-Dox yang dimodifikasi. Tersedia di: Condalab.com
5. Media budidaya microkit. Agar Czapek-Dox. Godponible di: Media Culturive.com