Kentang dekstrosa, persiapan dan penggunaan

Dia Agar kentang dekstrosa Ini adalah media kultur nutrisi yang solid dan non -selektif. Di dalamnya, spesies bakteri dan jamur dapat tumbuh, tetapi penggunaannya diindikasikan terutama untuk isolasi jamur dan ragi filamen. Ini juga dikenal sebagai media PDA dengan ekspresi dalam agar dekstrosa kentang bahasa Inggris.

Ini sangat berguna untuk isolasi jamur fitopatogenik, yaitu, yang mempengaruhi sayuran. Untuk menabur sampel dari sayuran yang terinfeksi, media lain seperti Sabouraud atau malten dapat digunakan, namun untuk penggunaan rutin, agar paus dekstrosa lebih disukai dengan mendapatkan.

Aspergillus Niger dan Sinemas dalam Dextrose Pope Agar. Sumber: Alextrevelian 006 di Wikipedia Inggris [Domain Publik]/Joselrojas [CC BY-SA 4.0 (https: // createveCommons.Org/lisensi/by-sa/4.0)]

Ini juga digunakan untuk penghitungan koloni jamur dalam sampel kosmetik, produk farmasi dan beberapa makanan susu. Ini juga kondusif untuk menabur sampel pengikis kulit untuk mencari dermatofit, yang tumbuh sangat baik dalam media ini, mengembangkan pigmen karakteristiknya.

Paus dekstrosa medium adalah media yang sangat sederhana dan mudah untuk disiapkan di laboratorium. Itu berisi, seperti namanya, infus kentang, dekstrosa dan agar -agar. Selain itu, zat penghambat dapat ditambahkan untuk menghindari pertumbuhan bakteri dan meningkatkan selektivitas untuk spesies jamur.

[TOC]

Dasar

Dextrose Pope Agar adalah media kultur yang menyediakan elemen nutrisi yang diperlukan untuk pengembangan jamur dan ragi filamen.

Kombinasi infus kentang dengan glukosa menyediakan sumber energi yang sempurna sehingga ada pertumbuhan jamur yang memuaskan. Sedangkan agar adalah orang yang memberikan konsistensi terhadap lingkungan.

Media saja tidak menghambat pertumbuhan bakteri, oleh karena itu adalah media yang tidak bersuara. Untuk melakukannya secara selektif membutuhkan agregat zat penghambat seperti asam tartarat atau antibiotik.

Persiapan

-Agar papa dekstrosa buatan sendiri (non -komersial)

Piring petri

Itu disiapkan sebagai berikut:

Pertama -tama, kentang dicuci dengan sangat baik dengan melepas tanah yang mereka miliki. Mereka dipotong menjadi irisan halus dengan segalanya dan shell. 200 gr kentang ditimbang dan didihkan dalam satu liter air suling, selama setengah jam.

Waktu selesai filter atau saring seluruh persiapan melalui kain kasa.

Cairan yang diperoleh diselesaikan dengan air suling sampai mencapai satu liter. Infus ditambahkan 20 gr dari agar -agar dan 20 gr dari dekstrosa, bercampur dengan baik dan autoklava pada 121 ° C, tekanan 15 pon selama 15 menit.

Dapat melayani Anda: koevolusi

Biarkan dingin hingga 50 ° C dan sajikan di piring steril petri. Piring yang disiapkan disimpan di lemari es.

Wedges

Anda juga dapat menyiapkan irisan kentang dekstrosa.

Dalam hal ini, sebelum sterilisasi di autoklaf. Simpan di lemari es.

Media berada pada pH 5.6 ± 0.2, bagaimanapun, beberapa laboratorium menambahkan 10% asam tartarat untuk menurunkan pH menjadi 3,1 ± 0.1 dengan tujuan menghambat pertumbuhan bakteri.

Dalam hal yang sama ini, laboratorium lain lebih suka menambahkan antibiotik untuk melakukannya selektif untuk penanaman jamur dan menghindari perkembangan bakteri.

-Persiapan Komersial Agar Paus Dekstrosa

Berat 39 gr dari dehidrasi yang tersedia secara komersial dan larut dalam satu liter air suling. Tinggalkan selama 5 menit.

Campuran dipanaskan dengan mengaduk secara sering sampai total pembubarannya. Selanjutnya disterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 menit.

Anda dapat menyiapkan piring atau irisan. Lanjutkan seperti yang dijelaskan di atas.

PH 5,6 ± 0,2. Jika pH 3,1 diinginkan, 14 mL asam tartarat steraric harus ditambahkan ke 20% sebelum disajikan di pelat.

Warna medium yang tidak siap adalah krem ​​dan disiapkan adalah kuning jernih dengan penampilan yang sedikit berawan atau opalescent.

Aplikasi

Proses untuk menanam sampel tanaman dalam pot dekstrosa

-Untuk daun dengan bintik -bintik

Daun dipotong -potong.

Dalam kapal 50 cc dengan alkohol 50%, tempatkan potongan -potongan daun (potongan -potongan bernoda dan sehat), untuk mendisinfeksi permukaan dengan 20 hingga 30 detik. Lemparkan alkohol dan tambahkan natrium hipoklorit 20% selama 40 hingga 50 detik jika mereka adalah daun halus dan meningkatkan waktu hingga 80 detik jika kulitnya dan batang.

Lemparkan natrium hipoklorit dan ambil potongan yang didesinfeksi dengan penjepit steril dan letakkan di permukaan sedang (maksimal 10 buah). Tempatkan tanggal dan inkubasi dari 20 hingga 30 ° C.

-Untuk buah dan umbi

Jika buahnya berdaging, buka buah yang dipengaruhi oleh jamur dan ambil potongan -potongan dengan pisau bedah steril, baik yang sakit maupun bagian yang sehat dan letakkan di permukaan agar -agar agar.

Jika buahnya adalah jeruk, seperti lemon atau jeruk, bijinya harus dibuka dan ditabur.

Dapat melayani Anda: phosphatidylinositol: struktur, pelatihan, fungsi

Ketika permukaan buah terpengaruh dan sporing diamati, yang ideal adalah menggunakan metode parut di piring; Ini terdiri dari bermain porsor dengan spatula berbentuk "L" yang disterilkan dan didinginkan, dan kemudian ditaburkan di zigzag 2 hingga 3 kali pada agar.

-Untuk biji -bijian

Mereka mendisinfeksi sama seperti yang dijelaskan dalam daun dan kemudian ditempatkan pada agar.

-Untuk cabang dan batang

Raspecue korteks dilakukan dan kemudian bagian dari bagian yang sehat dan sakit diambil dan ditabur langsung di agar.

Plak yang ditanam diinkubasi dalam aerobiosis pada 20-30 ° C selama 72 jam.

Proses untuk menanam sisik kulit, rambut atau kuku pada agar paus dekstrosa

Sampel harus dilakukan dengan menggunakan lembaran pisau bedah No. 11, baik untuk memotong rambut, kulit atau skala kuku yang terpengaruh untuk mencari dermatofit. Sebelum mengambil sampel, area dengan alkohol 70% harus didesinfeksi.

-Sampel kulit

Dalam lesi penipuan tepi cedera harus dikikis, karena di sana lebih mungkin untuk menemukan jamur.

Pada lesi eksudatif sampel diambil dengan usap kering atau basah. Tabur segera di atas paus dekstrosa atau agar Sabouraud. Hindari alat transportasi.

Metode pengambilan sampel lainnya adalah melalui teknik Mariat dan ADA Campos's Carpet Square. Dalam hal ini, area yang terkena digosok 5 kali dengan sepotong wol steril untuk tanaman berikutnya.

Sampel dapat ditempatkan langsung di media kultur.

-Sampel rambut

Tergantung pada patologinya, bagian yang terpengaruh atau root start dapat dipotong. Tempatkan sampel di media kultur.

-Sampel kuku

Mereka dapat dikikis atau memotong bagian tertentu dari kuku yang terpengaruh. Akan tergantung pada jenis cedera.

Potong sampel menjadi bit 1 mm sebelum ditabur untuk meningkatkan probabilitas kontak jamur dengan media kultur.

Prosedur Identifikasi

Koloni yang diperoleh di piring diisolasi dalam tabung berisi.

Studi mikroskopis (pengamatan struktur dan formasinya), dapat dilakukan dengan mikrokultur atau pengamatan langsung ke mikroskop antara lembaran dan lamella.

Dapat melayani Anda: histidin: karakteristik, struktur, fungsi, makanan

Koloni menghitung

Media ini juga dapat digunakan untuk menentukan beban jamur dan ragi yang ada dalam sampel tanaman, makanan, kosmetik atau obat -obatan. Untuk tujuan ini, kentang kentang yang ditambah agar dengan antibiotik digunakan, seperti: (chloramphenicol, chlorotetracycline atau keduanya).

Tuang 1 ml sampel - lebih disukai diencerkan - di atas piring petri yang steril dan kosong, kemudian melelehkan pistol kentang dekstrosa dan biarkan dingin pada suhu 45 ° C. Tuang di atas piring petri dan putar sampai homogenisasi. Biarkan istirahat sampai.

Inkubasi dalam aerobiosis pada 20-25 ° C (cetakan) atau pada 30-32 ° C (ragi) selama 5 hingga 7 hari atau lebih, tergantung pada jenis jamur yang dicari dan jenis sampel. Dua pelat dapat digunakan untuk menginkubasi kedua rentang suhu.

Profesor koloni jamur dalam sampel makanan. Dekstrosa kentang agar yang dilengkapi dengan antibiotik. Sumber: Pxhere.com foto/777267

Pemeliharaan galur jamur

Agar paus dekstrosa dapat digunakan untuk mempertahankan strain jamur yang layak selama beberapa tahun.

Untuk ini, jamur dibudidayakan dalam irisan kentang dekstrosa dan begitu jamur ditanam, ditutupi dengan minyak mineral. Minyak harus disterilkan dalam autoclave selama 45 menit, dan memiliki perkiraan viskositas 300 hingga 330 Saybolt. Minyak harus melebihi 1 hingga 2 cm ujung bezel.

Qa

Dari setiap lot yang disiapkan, 1 atau 2 pelat harus diambil dan diinkubasi pada 25 ° C selama 48 jam atau 20 ° C selama 96 jam. Kontrol sterilitas yang baik adalah salah satu di mana pengembangan koloni tidak diamati.

Anda juga dapat menggunakan kontrol yang diketahui atau bersertifikat seperti:

Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763, Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus brasiliensis ATCC 16404, Trichophyton Mentagrophytes ATCC 9533. Dalam semua kasus, pertumbuhan yang baik diharapkan.

Referensi

1. Laboratorium Britania. Pot glikosado. 2015. Tersedia di: Britanialab.com
2. Laboratorium Neogen. Kentang dekstrosa. Tersedia di: Foodsafety.Neogen.com
3. Laboratorium Insumolab. Agar kentang dekstrosa. Tersedia di: insumolab.Cl
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.
5. Rumah rumah g. Mikologi Umum. 1994.  Edisi ke -2. Universitas Pusat Venezuela, Edisi Perpustakaan. Venezuela Caracas.
6. Aceituno m. Evaluasi kualitas mikrobiologis dalam eye shadow, jenis debu kompak dari laboratorium produksi nasional, menurut Pharmacoea USP 2005. Tesis untuk memilih judul ahli kimia farmasi. Universitas San Carlos dari Guatemala.
7. Cuétara m. Pemrosesan sampel permukaan. Ibero -Maerican Mycology Magazine. 2007; pp. 1-12