Isolasi mikroorganisme teknis dan kepentingan

Dia Isolasi mikroorganisme Ini menyiratkan serangkaian teknik yang digunakan untuk mengekstrak dan memisahkan spesies mikroba yang menarik dari habitat alami mereka menjadi habitat In vitro. Teknik -teknik ini adalah seperangkat banyak alat dasar dan penting untuk studi mikrobiologis.

Sebagian besar mikroorganisme yang diketahui dan yang telah ditentukan oleh sains, adalah mereka yang telah dapat diisolasi dan dipelihara dalam wadah yang mensimulasikan, sebagian, kondisi intrinsik tempat di mana mereka tinggal.

Gambar khas koloni mikroorganisme bakteri yang diisolasi dalam media padat di dalam kapsul petri (gambar nadya_il di www.Pixabay.com)

Mungkin salah satu pria pertama yang mempraktikkan isolasi mikroorganisme adalah Anton van Leeuwenhoek (1632-1723), yang mengumpulkan dan mengisolasi sampel mikroba dari sejumlah besar tempat dan ekosistem untuk mengamati mereka dengan hati-hati di bawah ratusan mikroskop yang ia rancang untuk meresap dengan hati-hati di bawah ratusan mikroskop yang dirancangnya dengan hati-hati dengan hati-hati di bawah ratusan mikroskop yang dirancangnya dengan hati-hati dengan hati-hati di bawah ratusan mikroskop yang dirancangnya dengan hati-hati dengan hati-hati dengan ratusan mikroskop dengan hati-hati dengan hati-hati dengan hati-hati dengan ratusan mikroskop dengan hati-hati dengan hati-hati dengan hati-hati dengan ratusan mikroskop dengan hati-hati dengan hati-hati.

However, it was not until the times of scientists Louis Pasteur and Robert Koch, during the course of the nineteenth century, which began to perform rigorous practices that served for the isolation of specific microorganisms, all in order to study them in detail in detail.

Tidak seperti Leeuwenhoek, para peneliti ini berfokus pada mengisolasi spesies yang ditentukan dari spesies mikroba lingkungan lainnya. Selain itu, ini tertarik untuk menjaga mereka tetap hidup selama mungkin di luar lingkungan alami mereka.

Saat ini, teknik yang tepat telah dikembangkan untuk isolasi dan pertumbuhan berbagai mikroorganisme yang diperoleh dari hampir semua lingkungan di biosfer.

[TOC]

Teknik Isolasi Mikroorganisme

Semua isolat mikroorganisme dimulai dengan pengumpulan sampel di alam di mana mikroorganisme yang menarik ditemukan. Tempat -tempat ini dapat terluka pada jaringan hewan atau sayuran, tanah atau substrat, genangan air, laut, permukaan seperti kulit, dll.

Sampel dibuat dengan menyentuh atau mendukung wadah yang memiliki media dengan persyaratan yang cocok untuk pertumbuhan mikroorganisme di permukaan yang diinginkannya. Dalam wadah ini Anda akan memperoleh apa yang dikenal sebagai "budidaya" mikroba.

Dapat melayani Anda: stentor

Secara umum, tanaman pertama yang diperoleh dari habitat alami tidak diragukan lagi merupakan "kultur campuran", yaitu, ini terdiri dari sejumlah besar spesies mikroba yang berbeda.

Namun, sebagian besar spesies mikroorganisme dapat diisolasi satu sama lain di laboratorium, berusaha untuk mendapatkan kultur mikroorganisme di mana hanya spesies yang menarik atau, dengan kata lain, mendapatkan "tanaman murni" tumbuh.

Intinya, proses yang dilakukan untuk mendapatkan "tanaman murni" adalah apa yang dikenal sebagai "isolasi mikroorganisme".

Ada banyak teknik untuk isolasi mikroorganisme, dan bahkan ada beberapa yang spesifik untuk jenis mikroorganisme tertentu pada khususnya. Dalam kasus lain, dimungkinkan untuk mendapatkan tanaman murni hanya mengumpulkan sampel lingkungan alam.

Di antara teknik isolasi yang paling banyak digunakan untuk memisahkan jenis minat yang ditemukan di media budaya campuran adalah:

Goresan atau garis

Mungkin ini adalah metode yang paling banyak digunakan untuk isolasi mikroorganisme. Teknik ini adalah untuk menyiapkan media padat steril dengan semua senyawa nutrisi yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroorganisme dalam wadah kaca, seperti kapsul petri.

Menggunakan instrumen halus, biasanya runcing, disentuh pada mikroorganisme yang diinginkan pelat yang diinginkan.

Ini dilakukan secara intensif bolak-balik melalui permukaan media padatan atau yang disepakati, seolah-olah itu adalah zig-zag. Biasanya dilakukan sampai kurang lebih sepertiga dari diameter agar -agar di piring tertutup.

Fusi dengan medium atau lapisan

Untuk metode ini, pengenceran lingkungan dilakukan di mana mikroba dikumpulkan ke titik di mana hanya beberapa ratus sel untuk setiap mililiter media di mana mereka diencerkan diencerkan.

Dapat melayani Anda: Aspergillus fumigatus

Dari pengenceran ini beberapa mililiter diambil dan dicampur dengan media yang akan ditambahkan dalam wadah sebelum memadat. Sebagai campuran antara media yang disepakati dan media cair di mana mikroorganisme direndam di tengah dan hanya terlihat sampai mereka berkembang biak dalam bentuk koloni.

Saat berkembang sebagai koloni, menjadi lebih mudah untuk memisahkan mereka dari sisa mikroorganisme dengan metode lain seperti awal, misalnya.

Pengenceran serial

Metode ini terdiri dalam melakukan pengenceran seri dari media di mana mikroorganisme ditemukan. Contohnya adalah pengenceran yang dibuat untuk memurnikan Lactococcus lactis salah satu Lactobacillus acidophilus, Bakteri yang bertanggung jawab atas produksi keju dan yogurt.

Sekitar 1 mililiter tabung yang mengandung susu asam atau yogurt yang sebelumnya difermentasi diambil dan mililiter ini diinokulasi dalam susu steril tanpa mikroorganisme. Selanjutnya sekitar mililiter susu tersebut diambil dan prosesnya diulangi.

Ini diulangi sekitar tiga atau empat kali berturut -turut, yang sangat mungkin diperoleh Lactococcus lactis salah satu Lactobacillus acidophilus dalam media terisolasi dari polutan yang dapat mewakili mikroba lain.

Fotografi terperinci tempat dan bahan -bahan khas untuk mikroorganisme yang terisolasi (gambar Sintija Valucka di www.Pixabay.com)

Prosedur pengayaan

Metodologi ini dicapai untuk tumbuh mikroorganisme dalam media kultur dengan kondisi yang merangsang atau memfasilitasi pertumbuhan spesies yang diminati dan, dalam banyak kasus, dalam kondisi yang menghambat pertumbuhan mikroorganisme pencemaran lainnya.

Bakteri genre Salmonella Mereka tumbuh di media budaya dengan selenito, karena mikroorganisme ini mengubah selenite menjadi selenium untuk dapat memetabolisme. Selenito di tengah membuatnya sulit untuk mengasimilasi nutrisi untuk mikroorganisme lain yang berbeda dari salmonellas.

Teknik tunggal atau eksklusif

Mungkin ini adalah teknik yang paling sulit dan kurang efektif untuk isolasi mikroba. Ini menyiratkan menempatkan setetes medium (sampel) di mana mikroorganisme ditempatkan di penutup steril, dan kemudian ditempatkan di pelat mikroskop.

Dapat melayani Anda: Auxotroph

Selanjutnya, saat diamati, sel tunggal diekstraksi dengan bantuan pipet mikro steril. Penurunan ditempatkan di penutup steril lain yang diinkubasi pada suhu yang sesuai untuk mikroorganisme. Akhirnya, diamati lagi di bawah mikroskop untuk menunjukkan pertumbuhan.

Jika, ketika sel -sel baru telah berkembang lagi dari sel individu yang diambil, ini ditambahkan dalam media kultur steril untuk mendapatkan tanaman murni yang terisolasi sepenuhnya.

Teknik yang dipersonalisasi

Ada mikroba berbeda yang tak ada habisnya di planet bumi yang tersebar oleh hampir semua ekosistem yang diketahui. Beberapa mikroorganisme dikenal sebagai ekstremofil dan membutuhkan kondisi eksklusif untuk perkembangan dan pertumbuhannya.

Kondisi ekstrem ini menguntungkan dan kurang beruntung untuk isolasi, karena, meskipun mereka hanya memungkinkan pertumbuhan mikroorganisme ini, mereka bisa sulit dibuat ulang In vitro.

Pentingnya

Isolasi mikroorganisme telah mewakili salah satu kemajuan terpenting untuk bidang sains dan kedokteran. Ini telah memungkinkan umat manusia untuk mempelajari dan mengembangkan perawatan yang efektif terhadap patogen mikroba yang berbeda.

Saat ini diketahui pasti bahwa mikroorganisme membentuk bagian penting dari semua ekosistem, sehingga mendapatkan isolasi beberapa di antaranya dengan kepentingan relatif bagi manusia memungkinkan para peneliti untuk mempelajarinya secara intens, untuk memahami secara mendalam fungsinya di setiap ekosistem.

Referensi

1. Dari Kruif, p. (seribu sembilan ratus sembilan puluh enam). Pemburu Mikroba. Houchton Mifflin Harcourt.
2. López, m. J., Nichols, n. N., Dien, b. S., Moreno, J., & Bothast, r. J. (2004). Isolasi Mikroorganisme untuk Detoksifikasi Biologis Lignocellulosic HydrolysateSate. Mikrobiologi dan Bioteknologi Terapan, 64(1), 125-131.
3. Spigno, g., Tramelli, l., Galli, r., Pagella, c., & De faveri, D. M. (2005). Biofiltrasi uap diklorometana: isolasi mikroorganisme.
4. Tresner, h. D., & Hayes, J. KE. (1970). Metodologi yang lebih baik untuk mengisolasi mikroorganisme tanah. Appl. Lingkungan. Mikrobiol., 19(1), 186-187.
5. Willey, J. M., Sherwood, l., & Wouretton, C. J. (2009). Prinsip Mikrobiologi Prescott. Boston (MA): Pendidikan Tinggi McGraw-Hill.