Lactosado Broth

Kaldu laktat laktat. Sumber: Foto diambil oleh penulis MSC. Marielsa Gil

Apa itu kaldu lactosado?

Dia Lactosado Broth Ini adalah kultur cair, bukan selektif, terutama digunakan sebagai sarana pra-pengayaan dalam isolasi strain dari Salmonella, Dari analisis mikrobiologis yang dibuat hingga makanan olahan, produk susu atau air. Ini direkomendasikan oleh Komisi Internasional tentang Spesifikasi Mikrobiologis untuk Makanan (ICMPF).

Media ini mengandung gelatin enzimatik, daging dan ekstrak laktosa, zat yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteri. Selain itu, laktosa adalah karbohidrat yang dapat difermentasi, oleh karena itu, beberapa coliform dapat mengungkapnya dengan produksi gas.

Oleh karena itu, kaldu Lactosado direkomendasikan oleh American Public Health Association (APHA) untuk studi dugaan bakteri total dan coliform tinja. Ini digambarkan sebagai alternatif yang sangat baik untuk menggantikan kaldu triptose lauril sulfat dalam teknik standar jumlah yang paling mungkin (NMP), yang digunakan untuk analisis mikrobiologis sampel makanan, susu dan perairan permukaan, di bawah tanah, rekreasi, rumah tangga domestik dan industrial.

Dasar

Untuk analisis mikrobiologis beberapa sampel, berlalunya pra-pengayaan sangat penting untuk memulihkan mikroorganisme spesifik yang mungkin dalam jumlah yang sangat rendah atau dalam kondisi tidak menguntungkan yang melanggar atau meminimalkan kelayakannya. 

Begitulah kasus makanan kering dan olahan, mungkin terkontaminasi Salmonellas sp. Dalam kasus ini, jika ada bakteri, mereka telah menderita penyalahgunaan fisik dan kimia selama proses produksi produk.

In such a way that microorganisms are exposed to adverse factors such as dehydration, exposure to inhibitory or toxic products, and the overlap generated by the presence of other bacteria in greater quantity, among others.

Dalam hal ini, kaldu Lactosado memiliki efek perbaikan dari struktur mikroorganisme yang rusak, menyebabkannya pulih dan bereproduksi, sedemikian rupa sehingga dapat dideteksi.

Demikian juga, kaldu Lactosado memiliki kemampuan untuk mengencerkan zat penghambat yang dapat mempengaruhi viabilitasnya, memungkinkan pengembangannya. Selain itu, komposisi nutrisi kaldu laktik adalah strategis untuk mendukung pertumbuhan Salmonella sp di atas mikroorganisme lainnya.

Dapat melayani Anda: paleobiologi: sejarah, spesialisasi, penemuan

Untuk identifikasi akhir, itu harus sub-budaya menuju budaya definitif lainnya.

Di sisi lain, komposisi media juga memungkinkan untuk mendeteksi mikroorganisme fermentasi laktosa yang menghasilkan gas.

Persiapan

Untuk menyiapkan satu liter kaldu laktosa, 13 gram media dehidrasi harus ditimbang dan dilarutkan dalam 1.000 ml air suling.

Untuk membantu pembubaran media dalam air, Anda dapat sedikit memanaskan larutan, tetapi tidak terlalu banyak.

Setelah homogen, solusinya disiapkan sebagai berikut: Jika kaldu akan digunakan untuk pencarian coliform, guncangan dengan tabung reaksi disiapkan, yang diperkenalkan tabung fermentasi Durham ke bawah.

Tabung Durham adalah detail yang sangat penting, karena akan memungkinkan pembentukan gas, data bernilai tinggi dalam pencarian coliform.

Menyiapkan tabung, 10 ml kaldu lactosado dikeluarkan di dalamnya, jumlah yang harus cukup untuk menutupi seluruh tabung Durham.

Jika kaldu Lactosado akan digunakan sebagai kaldu pra-enrique, tidak perlu menempatkan tabung fermentasi Durham. Dalam hal ini, diperlukan lebih banyak medium (225 mL), yang akan disajikan dalam guci 500 mL, mulut lebar dan dengan penutup benang tahan termal.

Selanjutnya, tabung atau botol dibawa ke autoclave pada 121 ° C selama 15 menit.

Media harus pada pH akhir 6.9 ± 0.2 hingga 25 ° C.

Kaldu disimpan di lemari es sampai digunakan. Sebelum digunakan, mereka harus marah pada suhu kamar.

Di sisi lain, kaldu Lactosado juga dapat disiapkan pada konsentrasi ganda.

Dapat melayani Anda: herpetologi: sejarah, koleksi, fungsi herpetologi

Beberapa laboratorium menambahkan Brome. Dalam hal ini, kaldu mengambil warna ungu dan jika ada perubahan fermentasi menjadi kuning.

Aplikasi

Dalam laboratorium mikrobiologi, kaldu Lactosado banyak digunakan karena merupakan media yang relatif ekonomi yang menawarkan hasil yang andal dan cepat (24-48 jam).

Ini dapat digunakan untuk analisis coliform total dan tinja dalam air dan makanan, atau sebagai kaldu pra-enrique untuk Salmonella.

Pra-pengayaan

Pra-pengayaan adalah langkah sebelum pengayaan sampel, yang sangat meningkatkan pemulihan bakteri gender Salmonella Dalam makanan olahan.

Untuk melakukan ini, sampel makanan padat (25 gram) atau cairan (25 mL) ditaburkan dalam 225 ml kaldu lactosado, diinkubasi selama 24 hingga 48 jam. Selanjutnya, itu akan menjadi sub-budaya dalam medium yang diperkaya sebagai kaldu selenito cistina atau kaldu tetrationato. Kemudian pergi ke media selektif XLD dan SS.

Analisis Total dan Coliform Fecal

Ini adalah media yang sangat baik sebagai indikator kontaminasi tinja.

Oleh karena itu, kaldu Lactosado sangat ideal untuk fase dugaan studi coliform dengan metode angka yang paling mungkin.

Untuk sampel di mana sejumlah besar coliform diduga, jumlah yang lebih rendah (1 mL) akan diinokulasi, sedangkan untuk sampel di mana lebih sedikit coliform yang diduga, volume pengambilan sampel lebih banyak diinokulasi (10 mL).

Untuk analisis, 10 dibuat^-1, 10^-2, 10^-3, membentuk baterai pipa 3-5 untuk setiap konsentrasi yang digunakan.

Dari setiap pengenceran, volume yang sama ditaburkan untuk kaldu Lactosado.

Tabung diinkubasi selama 24 jam. Kaldu yang negatif diinkubasi selama 24 jam lebih.

Itu bisa melayani Anda: fauna dan flora laut Peru

Interpretasi hasil dilakukan dengan pengamatan dua karakteristik: yang pertama adalah ada atau tidak adanya kekeruhan, dan karena media ini tidak mengandung indikator pH, tidak akan ada perubahan warna.

Yang kedua adalah produksi gas. Gas mudah dibuktikan dalam tabung Durham, dengan penampilan satu atau beberapa gelembung udara di dalamnya.

Itu dianggap positif jika kedua karakteristik diamati, yaitu kekeruhan dengan produksi gas. Tabung positif harus ditolak di media konfirmasi (2% Bright Green Broth dan EC Broth).

Kontrol kualitas sedang

• Dalam persiapan media, penting untuk tidak lupa menempatkan tabung Durham jika tujuan yang sama adalah studi coliforms.
• Jangan terlalu panas medium sebelum sterilisasi.
• Mendistribusikan dalam tabung reaksi sebelum sterilisasi, tidak pernah setelahnya.
• Jangan gunakan jika media telah disiapkan lebih dari 3 bulan.
• Jangan gunakan jika ada perubahan karakteristik media yang biasa diamati.
• Saat menyiapkan batch kaldu Lactosado, Anda harus membuktikan kualitas dari strain menabur yang sama yang dikenal sebagai Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii Dan Klebsiella pneumoniae. Mereka tumbuh sangat baik, dengan produksi gas (kontrol positif).
• Itu juga bisa termasuk Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium salah satu Enterococcus faecalis, Mereka tumbuh dengan baik, tetapi tanpa produksi gas (kontrol negatif).
• Harus tertunda bahwa warna asli dari media dehidrasi adalah krem ​​dan dari media yang sangat jernih dan transparan yang disiapkan kuning. Jika perubahan warna atau penampilan diamati, mungkin ada kerusakan yang sama.

Referensi

1. Acevedo r., Severiche, c., Castillo, m. Biologi dan mikrobiologi lingkungan. Universitas Cartagena, Kolombia.
2. Laboratorium Conda Pronadisa. Konsentrasi ganda kaldu laktosa (European Pharm).