Selenito kaldu apa itu, fondasi, persiapan, penggunaan

Dia Kaldu selenito Ini adalah media kultur cair selektif. Itu dirancang oleh Leifson untuk pengayaan sampel di mana keberadaan bakteri enteropatogenik dari genus Salmonella dicurigai.

Media ini memenuhi tuntutan Asosiasi Kesehatan Masyarakat Amerika (APHA), dan karenanya diterima untuk penyelidikan kehadiran Salmonella dalam sampel tinja, urin, makanan cair atau padat, air, antara lain.

Kaldu selenito. Sumber: Foto diambil oleh penulis MSC. Marielsa Gil

Komposisi kimia yang mendukung pemulihan mikroorganisme ini dan pada gilirannya menghambat pertumbuhan orang lain. Ini terutama beracun bagi sebagian besar bakteri yang termasuk dalam keluarga enterobacteriae. Namun, ini juga memungkinkan pemulihan strain shigella dan tidak menghambat pertumbuhan pseudomonas dan proteus.

Ini terdiri dari anhidrat natrium hidrogen selen, natrium fosfat anhidrat, peptonas dan laktosa. Ada juga varian yang ditambahkan Cistina, maka namanya kaldu selenito-cistina.

Saat ini, penggunaan kaldu selenito-cistine lebih disukai, karena persentase yang lebih tinggi dari pemulihan Salmonella yang setara dengan yang diamati dengan cara selektif lainnya dengan tujuan yang sama diperoleh, seperti kaldu natrium tetrasionalat.

Dasar

Pepton yang terkandung dalam kaldu berfungsi sebagai nutrisi untuk perkembangan mikroorganisme yang baik. Strain Salmonella Gunakan Peptones sebagai Sumber Nitrogen, Vitamin dan Asam Amino.

Laktosa dapat difermentasi karbohidrat, sedangkan natrium selenit adalah zat inhibitor yang memperlambat pertumbuhan bakteri positif gram dan sebagian besar bakteri yang ada di flora usus, terutama keluarga enterobacteriae. Natrium fosfat adalah penyerap kejut yang menstabilkan pH medium.

Dapat melayani Anda: Chemiosteate: Karakteristik, Sejarah dan Penggunaan

Dalam kasus varian kaldu selenito yang mengandung L-cistine, senyawa tambahan ini adalah zat pereduksi yang meminimalkan toksisitas selenit, meningkatkan pemulihan salmonella.

Persiapan

-Kaldu selenito

Jika Anda memiliki komponen campuran, Anda dapat menimbang:

4 gr natrium hidrogen anhidrat.

10 gr natrium fosfat anhidrat.

5 gr dari peptones.

4 gr dari laktosa.

Larutkan senyawa dalam 1 liter air suling steril. Itu bisa dipanaskan sedikit untuk larut secara keseluruhan.

Beberapa laboratorium mengekspos media selama 10 menit dalam uap fluente untuk mensterilkannya, karena autoclave tidak boleh digunakan. Jika media disterilkan, dapat disimpan dalam lemari es sampai digunakan.

Ini juga dapat disiapkan tanpa mensterilkan dan menyajikan 10 hingga 15 mL untuk tabung reaksi steril.

Dalam hal ini Anda harus membiarkan berdiri dan menggunakannya segera. Karena mediumnya tidak steril, tidak dapat disimpan dalam lemari es untuk digunakan nanti.

-Persiapan Media Komersial

Jika media komersial tersedia, 23 gr dari media dehidrasi dan dilarutkan dalam satu liter air suling steril. Panaskan sebentar untuk menyelesaikan pembubaran. Jangan mensterilkan secara otomatis. Sajikan secara aseptik 10 atau 15 mL dalam tabung reaksi steril.

PH akhir medium harus 7,0 ± 0,2.

Perlu dicatat bahwa warna media dehidrasi adalah krem ​​dan persiapannya jelas dan terang.

Varian kaldu selenito-cistine

Ini mengandung senyawa kaldu selenite yang sama, tetapi 10 mg cystina ditambahkan. Sisa prosedur persis sama seperti yang dijelaskan di atas.

Dapat melayani Anda: kelompok pargapilikal

Aplikasi

Media ini khusus untuk digunakan dalam studi epidemiologis, dalam kasus di mana penyakit ini tidak dalam tahap akutnya, pasien tanpa gejala atau pembawa yang sehat.

Isolasi gender Salmonella biasanya sulit, karena mereka biasanya mencemari sampel dalam waktu singkat. Singkatnya.

Di sisi lain, bahan baku yang dengannya makanan olahan sering disiapkan terkena panas, proses dehidrasi, penggunaan desinfektan, radiasi dan pengawet, antara lain.

Oleh karena itu, salmonellas yang ada dalam bahan baku dianiaya dengan pengajuan produk ke proses industri yang disebutkan di atas. Demikian juga, dalam kasus sampel klinis seperti tinja, strain mungkin lemah jika mereka berasal dari pasien yang telah diobati dengan antibiotik.

Oleh karena itu, sampel apa pun diduga ada adanya Salmonella harus pra -penawaran dalam kaldu Lactosado, dan kemudian diperkaya dalam kaldu selenito untuk mengoptimalkan pemulihannya di media selektif, seperti agar SS, agar Xilosa, lisin de -ssikolat (XLD) , Hoktoen enterik (he) dan apar hijau -brillante, antara lain.

Ditabur

Untuk sampel bangku, ambil 1 gr dari sampel dan tunda dalam tabung dengan 10 hingga 15 mL kaldu selenito. Jika fesesnya cair, ambil 1 ml dan tunda dalam kaldu. Untuk penyeka dubur, unduh bahan swab di kaldu.

Dalam sampel makanan padat, ambil 1 gr dan tunda dalam kaldu selenito.

Dalam makanan cair campuran di bagian yang sama dengan kaldu selenite konsentrasi ganda.

Dapat melayani Anda: Halucigenia

Untuk sampel urin, Anda harus menyentrifus, membuang supernatan, mengambil semua sedimen dan menangguhkannya di kaldu selenito.

Kaldu pada suhu 37 ° C diinkubasi selama 24 jam inkubasi. Pertumbuhan bakteri dibuktikan dengan kekeruhan. Tabung tambahan per sampel juga dapat dimasukkan untuk menginkubasi 42 ° C. Selanjutnya, menabur media solid selektif dari kaldu selenito.

Qa

Untuk kontrol sterilitas, 37 ° C diinkubasi selama 24 jam kaldu selenito dari masing -masing lot tanpa diinokulasi. Diharapkan bahwa tidak ada kekeruhan, tidak ada perubahan warna sedang.

Untuk mengontrol fungsi medium yang tepat, strain yang diketahui dapat digunakan, seperti:

Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 dan Proteus mirabilis ATCC 43071.

Hasil yang diharapkan adalah:

• Untuk tiga strain bakteri pertama, pertumbuhan harus memuaskan.
• Untuk Escherichia coli Penghambatan parsial.
• Untuk pertumbuhan moderat proteus.

Batasan

Kaldu setengah -jahitan beracun bagi kulit manusia, oleh karena itu kontak langsung harus dihindari.

Referensi

1. Laboratorium Britania. Kaldu selenito. Tersedia di: Britanialab.com
2. Laboratorium Neogen. Kaldu selenito. Tersedia di: Foodsafety.Neogen.com