Persiapan Media Budaya

Persiapan media budaya adalah metodologi untuk menumbuhkan mikroorganisme, untuk mempelajarinya

Apa persiapan media budaya?

Itu Persiapan Media Budaya Ini adalah metodologi rutin yang digunakan di laboratorium untuk pertumbuhan mikroorganisme yang diinginkan. Media kultur adalah persiapan padat, cair atau semi-padat yang dimiliki semua nutrisi yang diperlukan untuk pengembangan populasi mikroba.

Secara umum, sarana untuk menumbuhkan mikroorganisme kaya akan protein dan asam amino dan biasanya mengandung beberapa komponen yang mendukung pertumbuhan organisme yang ingin Anda pelajari, seperti vitamin, darah, serum, antara lain.

Tidak ada sarana budaya umum atau universal, karena komposisinya bervariasi tergantung pada kebutuhan mikroorganisme yang menarik. Beberapa bakteri dapat dikembangkan dalam media kultur apa pun, tetapi yang lain memiliki persyaratan khusus.

Terdiri dari apa?

Mikroorganisme, seperti jamur dan bakteri, tidak dapat dipelajari secara individual karena ukuran mikroskopisnya. Oleh karena itu, mereka harus dibudidayakan di media buatan yang memungkinkan peningkatan populasi yang signifikan.

Misalnya, jika kami ingin mempelajari bakteri, kami harus memberi mereka kondisi yang sesuai sehingga mereka dapat berkembang biak dan membentuk koloni (yang dapat diamati dengan mata telanjang).

Persiapan media budaya sangat bervariasi tergantung pada jenis mikroorganisme yang ingin Anda tanam. Sebelum mempersiapkannya, perlu mengetahui kebutuhan nutrisi dasar organisme kerja.

Komponen paling umum yang digunakan dalam media tanaman akan dijelaskan di bawah ini untuk memiliki gagasan umum tentang persiapannya:

Agar

Ini digunakan dalam tanaman sebagai agen pemberiusan dan menambahkan kapan media padat atau semi -solid dicari. Agen pemadatan pertama yang digunakan dalam persiapan media adalah gelatin, tetapi pada tahun 1883 agar itu diperkenalkan ke dunia bakteriologi oleh w. Hesse.

Agar tipe bakteriologis memiliki komponen utama sebuah polisakarida dari konsekuensi kompleks, diekstraksi dari ganggang. Senyawa ini digunakan sebagai pengental makanan umum, seperti es krim dan selai.

Ini adalah elemen yang sangat berharga dalam mikrobiologi karena beberapa alasan. Terutama, karena mikroorganisme tidak dapat menurunkannya, mencairkan pada suhu 100 ° C dan tetap dalam keadaan cair sampai mencapai 45 ° C atau kurang.

Jika Anda ingin menyiapkan media padat, konsentrasi agar harus sekitar 1,5%, sedangkan semi -solid harus disiapkan dari 0,3 hingga 0,5%.

Cairan

Budidaya organisme patogen membutuhkan cairan tubuh sehingga mereka dapat berkembang seperti yang mereka lakukan di lingkungan alami mereka.

Dapat melayani Anda: kelompok prostetik

Untuk alasan ini, darah lengkap atau defibrasi ditambahkan. Cairan diekstraksi dari hewan yang sehat dan, setelah disterilkan, ditambahkan dalam media kultur.

Ekstrak

Mereka diperoleh dari bagian hewan yang berbeda (seperti daging atau hati) atau sayuran (biji) dan diproses untuk mendapatkan konsentrat padat dalam bentuk pasta atau debu.

Yang paling umum adalah ekstrak ragi, malt dan daging.

Peptonas

Senyawa organik ini diperoleh dengan enzimatik atau kimia jaringan hewan atau tumbuhan. Tujuannya adalah untuk menambahkan kandungan yang kaya dalam asam amino, yang merupakan unit mendasar protein.

Penyerap guncangan

"Buffer", atau sistem penyerap goncangan, menghindari perubahan pH mendadak dan membantu mempertahankan kisaran optimal yang mentoleransi organisme.

Sebagian besar organisme dapat mengembangkan pH 7 dengan benar, meskipun beberapa bakteri lebih suka media alkali. Namun, ada bakteri yang menahan variasi pH antara nilai 6 dan 9.

Pada spesies pH -sensitif, kerusakan tidak dihasilkan oleh jumlah berlebihan hidrogen atau ion hidroksil, tetapi oleh peningkatan asam atau basa lemah yang dapat menembus sel.

Demikian juga, indikator pH ditambahkan untuk dapat memantau dan menghindari penyimpangan yang disebabkan oleh fermentasi atau proses lainnya.

Sasaran

Tujuan utama saat mempersiapkan media kultur adalah untuk menambahkan semua komponen yang diperlukan untuk memungkinkan keberhasilan pengembangan organisme yang ingin diisolasi. Kombinasi komponen dan nutrisi yang lebih efektif untuk mencapai cara yang diinginkan harus diidentifikasi.

Baik persiapan dan penyimpanan menengah sangat penting untuk memastikan pertumbuhan yang berhasil, karena langkah -langkah ini tergantung pada komposisi lingkungan dan ketersediaan nutrisi.

Harus diperhitungkan bahwa budidaya mikroorganisme adalah tugas yang dipengaruhi oleh beberapa faktor yang eksternal terhadap lingkungan kultur, seperti intensitas cahaya yang diterima, suhu dan tingkat keasaman atau alkalinitas medium.

Oleh karena itu, masing -masing variabel ini harus diperhitungkan dan dipantau secara ketat.

Jenis media

Berdasarkan komposisinya

Berdasarkan komposisinya ada tiga jenis tanaman utama: cara alami atau empiris, semi-sintetis dan sintetis atau kimia.

Lingkungan alami

Di media alami komposisi yang tepat tidak diketahui. Ini termasuk bahan -bahan seperti susu, darah encer, jus tanaman, ekstrak dan infus daging dan pepton.

Untuk alasan ekonomi, komponen biaya rendah biasanya ditambahkan, seperti ekstrak kedelai, serum, molase, dll.

Dapat melayani Anda: Dukungan: Karakteristik, fungsi, dan contoh

Media semi-sintetis

Itu disebut semi-sintetis jika komposisi yang sama diketahui sebagian. Media apa pun yang mengandung agar adalah media semi-sintetis.

Di antara mereka, kami memiliki kentang dekstrosa, agar Czapek-Dox, oatmeal, pegangan pepton daging, di antara contoh-contoh lainnya.

Media yang ditentukan sintetis atau kimia

Dalam hal ini, komposisi media - karena jumlah karbon, nitrogen, sulfur, fosfor dan faktor pertumbuhan lainnya, benar -benar diketahui - benar -benar diketahui.

Ini sangat berguna jika Anda ingin mendapatkan hasil yang dapat direproduksi untuk peneliti lain.

Untuk "mikroorganisme yang disebut SO dengan persyaratan pertumbuhan khusus" Anda perlu menambahkan komponen yang diperlukan. Contoh jenis ini Lactobacillus.

Berdasarkan jenis mikroorganisme

Dengan cara yang sama, ada klasifikasi lain untuk media budaya berdasarkan jenis mikroorganisme yang dapat tumbuh di dalamnya.

Mengikuti prinsip ini kami memiliki berikut: cara umum, pengayaan, selektif dan diferensial. Masing -masing dijelaskan di bawah ini:

Cara umum

Ini mengakui pengembangan berbagai macam mikroorganisme. Jika ada organisme yang membutuhkan kondisi khusus untuk pertumbuhannya, ia tidak akan dapat berkembang dengan sukses dalam jenis tanaman ini.

Media pengayaan

Pengayaan berarti mendukung pertumbuhan jenis mikroorganisme tertentu, tetapi tidak ada zat yang ditambahkan untuk mencegah jenis mikroba lainnya tumbuh di dalamnya.

Cara selektif

Mereka mencari pertumbuhan spesifik mikroorganisme, menyebut jamur, bakteri, protozoa, antara lain. Untuk melakukan ini, mereka menghambat pengembangan orang lain.

Untuk mencapai tujuan ini, senyawa kimia fana dapat ditambahkan untuk sekelompok mikroorganisme yang luas dan tidak berbahaya bagi tubuh yang diminati, atau menambahkan sumber energi yang hanya dapat diasimilasi dengan mikroba yang dicari.

Media selektif digunakan saat sampel medis diambil untuk menumbuhkan beberapa mikroorganisme patogen. Di sini perlu untuk mendukung pertumbuhan patogen dan menghambat perkembangan flora mikroba normal dari pasien.

Agar bismuth sulphite, misalnya, tidak memungkinkan pertumbuhan bakteri positif gram dan sejumlah besar bakteri yang ditemukan di rongga gastrointestinal.

Oleh karena itu, ini digunakan untuk menumbuhkan bakteri gram -negatif yang menyebabkan demam tifoid, Salmonella typhi, Dalam sampel tinja.

Cara diferensial

Jenis ini menggunakan beberapa karakteristik diagnostik organisme yang diminati (kekhasan dalam metabolisme, misalnya) untuk dapat mengidentifikasi mereka terhadap spesies lain yang tumbuh di media yang sama.

Ini dapat melayani Anda: Transfase: Apa itu, fungsi, nomenklatur, subkelas

Baik media diferensial dan cara selektif sangat berguna di bidang mikrobiologi klinis dan kesehatan masyarakat, karena disiplin ilmu ini perlu mendeteksi keberadaan mikroorganisme spesifik yang terkait dengan patologi atau kondisi kebersihan yang buruk.

Anda dapat menambahkan zat indikator dalam tanaman yang memberikan fitur khas untuk koloni yang dicari. Misalnya, ke medium agar-eosin-rul metilen (embreviated emb) dan agar-mackonkey ditambahkan laktosa dan indikator pH.

Dengan demikian, ketika sebuah koloni berkembang di media ini dengan kemampuan untuk memfermentasi laktosa dan menghasilkan aldehida, mereka dapat diamati dalam warna khusus.

Langkah -langkah untuk Persiapan Media Budaya

Saat ini budidaya dapat dibeli dengan cara yang diliofilisasi. Oleh karena itu, persiapan difasilitasi dan hanya produk yang tersisa.

Konten harus berat (dengan mempertimbangkan jumlah akhir yang ingin Anda persiapkan) dan dilarutkan dalam air suling mengikuti semua indikasi produk.

Isi media cair harus dibagi menjadi wadah yang diinginkan (pelat petri, tabung, dll.) Untuk sterilisasi berikutnya.

Untuk mendistribusikan media padat, perlu melelehkannya menggunakan microwave atau mengirimkan material ke penangas air. PH medium harus disesuaikan.

Biasanya agar digunakan dalam tabung reaksi atau di piring petri. Jika agar -agar koket dalam posisi miring, dengan sudut yang sesuai untuk tepi terminal akhir menjadi diagonal, itu dikenal sebagai seruling atau tabung pico miring.

Saat agar -agar koket dalam posisi yang benar -benar vertikal, itu diberi nama "dalam".

Setelah mensterilkan media - menggunakan autoclave - mereka membiarkannya dingin. Ini harus dimanipulasi dalam lingkungan yang bebas dari mikroorganisme, yang paling umum adalah bekerja dengan pengapian yang lebih ringan yang memastikan lingkungan aseptik di sekitarnya.

Referensi

1. Celis, J. DAN. (2006). Biologi Sel: Buku Pegangan Laboratorium (Vol. 2). Elsevier.
2. FineGold, s. M., Bailey, w. R., Baron, e. J., Fineglod, s. M., & Scott, dan. G. (1991). Bailey Scott: Diagnosis mikrobiologis. Pan -American Medical.
3. Olivas, e. (2004). Mikrobiologi dan Manual Praktik Parasitologi II dan Parasitologi. Universitas otonom Ciudad Juarez.
4. Schlegel, h. G., & Zaborosch, c. (1993). Mikrobiologi Umum. Cambridge University Press.
5. Tortora, g. J., Funke, b. R., & Case, c. L. (2007). Pengantar Mikrobiologi. Ed. Pan -American Medical.