Yayasan Reaksi Xantoproteic, Prosedur, Penggunaan

Itu Reaksi xantoproteic Ini adalah prosedur kimia yang digunakan untuk menentukan ada atau tidak adanya asam amino aromatik, seperti tirosin dan triptofan, yang mungkin bebas atau merupakan protein yang larut, peptida atau polipeptida.

Ini juga telah digunakan untuk mendeteksi zat beracun pada tingkat darah yang mengandung kelompok beancenic dalam strukturnya. Tes ini juga dikenal sebagai reaksi becher xantoproteic.

Sumber reaksi xantoproteik positif: diambil dari video: https: // youtu.BE/GZGMBW5W4WO

Reaksi xantoproteic menggunakan asam nitrat pekat, panas dan alkali yang menetralkan. Jika, saat menetralkan reaksi, larutan larutan kuning ke oranye dianggap positif. Warna yang diamati disebabkan oleh pembentukan senyawa nitrogen yang berasal dari nitrifikasi kelompok benzenik.

Jika Anda perlu mengukur jumlah total protein, perlu menggunakan metode penentuan protein lainnya, seperti Biuret.

Reaksi xantoproteic terutama digunakan ketika zat sedang dianalisis yang tidak diketahui oleh komposisi kimianya. Secara umum, reaksi ini adalah bagian dari serangkaian tes yang akan membantu menentukan komposisi kimia zat atau ekstrak tertentu. Itulah sebabnya, ini banyak digunakan oleh para peneliti.

Di sisi lain, reaksi xantoproteic Becher digunakan untuk mendeteksi zat fenolik dan indolik dalam darah, dimungkinkan untuk memprediksi penampilan nefropati, sebelum parameter lainnya meningkat.

[TOC]

Dasar

Reaksi pada dasarnya mendeteksi keberadaan kelompok benzenik, baik dalam asam amino, seperti pada protein dan peptida. Asam nitrat bekerja pada cincin bencenic asam amino yang memilikinya, membentuk nitrokomposisi fenolik.

Reaksi membutuhkan panas untuk dilakukan, biasanya endapan terbentuk yang awan medium, menjadikannya susu. Endapan bisa putih atau kuning. Akhirnya, itu membutuhkan langkah alkalisasi yang menonjolkan warna. Untuk ini, basis 40% atau amonia natrium hidroksida digunakan.

Reaksi akan ditafsirkan sebagai positif jika warna kuning yang kuat diamati selama pemanasan gelap atau proses oranye dengan alkali reaksi. Asam amino yang terdeteksi terutama tirosin dan triptofan.

Reaksi xantoproteic. Sumber: http: // esteroisomeras.Blogspot.com/2013/06/Karakterisasi Protein.Html

Dalam kasus fenilalanin, meskipun itu adalah asam amino aromatik, inti benzena asam amino ini sulit untuk dinyalakan dalam reaksi sederhana, oleh karena itu, akan memancarkan atau reaksi positif negatif atau lemah atau lemah.

Dapat melayani Anda: polaritas (kimia): apa itu, definisi, contoh

Secara umum, uji xantoproteic dapat dilengkapi dengan uji hopkins-cole, yang berfungsi untuk mengidentifikasi triptofan secara khusus. Jika tes xantoproteic positif dan bahwa hopkins-cole negatif, keberadaan triptofan dibuang dalam larutan itu, yang mengarah ke kehadiran tirosin terutama. Demikian juga, itu juga dapat dilengkapi dengan reaksi Millon untuk deteksi tirosin, antara lain.

Reaksi ini juga dapat digunakan pada sampel darah, plasma atau serum yang tidak berubah untuk diagnosis uremia atau insufisiensi ginjal. Dalam hal ini, yang dicari adalah deteksi zat beracun (fenolik dan indolik) yang dihasilkan dari busuk usus.

Zat -zat ini memiliki kelompok benzenik dan oleh karena itu, memberikan reaksi xantoproteic positif, meskipun zat reaksioner bukanlah asam amino, atau protein.

Prosedur

- Reaksi xantoproteic untuk deteksi asam amino dengan gugus aromatik

Tempatkan 1 mL sampel masalah dalam tabung reaksi yang bersih dan kering.

-Tambahkan 0,5 mL asam nitrat pekat.

-Inkubasi campuran di kamar mandi 70 ° C selama 2 menit. Sebelumnya persiapkan mandi Maria pada suhu yang disebutkan di atas.

-Saat Anda mengambil tabung dari bak mandi Maria, dimungkinkan untuk mengamati bahwa solusinya telah menjadi susu dan telah mengambil beberapa warna putih kekuningan.

-Solusinya didinginkan dengan menjatuhkan air dingin di dasar tabung.

-Persiapan dituduh secara perlahan (drop demi drop) larutan natrium hidroksida 40% sampai ada guncangan warna.

-Jika tesnya positif, cincin oranye gelap akan terbentuk di antarmuka cair.

-Jika reaksinya negatif tidak akan ada pembentukan warna.

- Reaksi xantoproteic untuk mendeteksi zat fenolik dan indolis dalam darah

-Dispens 5 cc asam trikloroasetat pada 20% lebih dari 5 cc darah vena, plasma atau serum, yang terakhir menjadi yang paling ditunjukkan. Aduk rata dan filter.

Dapat melayani Anda: asam nitrat (hno3)

-2 cc dari penyaringan diambil dan dicampur dengan 0,5 cc asam nitrat. Kemudian dipanaskan untuk mendidih, karena tabung ini ditempatkan langsung pada nyala api yang lebih ringan selama 30 detik. Pendingin dengan air dan tambahkan 1,5 natrium klorida pada 33%.

Itu ditafsirkan sebagai berikut:

-Hasil negatif: warna kekuningan.

-Hasil Positif (+) Lemon Yellow.

-(++) emas kuning.

-(+++) kuning gelap menjadi coklat

Ini juga dapat diartikan menggunakan skala kolorimetri referensial Auenrieth, dibentuk oleh berbagai konsentrasi kalium bikromato kalium. Ini disiapkan dalam pengenceran 10 dalam 10 dari larutan ibu 0,03874%. Setiap tabung mewakili persentase.

Skala interpretasi

Ada dua skala interpretasi yang disebut kuno dan modern. Nilai normal adalah:

Meja Lama: Antara 75 dan 85%

Tabel Modern: Antara 15 dan 25%

Jika warna tabung masalah berada di tengah dua pola tabung rata -rata dibuat antara kedua langkah.

Larutan pola kalium dikromat disiapkan sebagai berikut: 7 diukur.9 ml kalium dikromat pada 10 N dan rata hingga 100 mL dalam bola aggorado. Untuk pengenceran itu diikuti seperti yang ditunjukkan pada tabel kolorimetri Autenrieth.

Tabel autenrieth kolorimetri. Sumber: Vásquez A. Reaksi xantoproteic. Majalah Klinis Spanyol. 1949; 35 (5): 326-327. Tersedia di: Elsevier

Menggunakan

Penggunaan reaksi xantoproteic adalah bagian dari serangkaian tes biokimia yang membantu mengetahui komposisi kimia zat yang tidak diketahui. Tes ini berkontribusi pada analisis kimia deteksi protein yang mengandung kelompok benzen dalam strukturnya.

Reaksi ini banyak digunakan oleh para peneliti dalam berbagai studi zat.

Dalam hal ini, Vásquez-Jorge dan kolaborator menggunakan ini dan reaksi lain untuk menyelidiki kandungan protein cairan yang diekstraksi dari ostion bakau (Crassostrea Rhizophorae).

Demikian juga, Rojas dan Collaborators (2009), menggunakan serangkaian tes, di antaranya adalah reaksi xantoproteic, untuk menganalisis glycomacropéptides dalam endapan Lactosueros de Ricotta.

Di sisi lain, reaksi xantoproteic Becher dimodifikasi oleh Volhard untuk digunakan untuk tujuan lain. Dalam hal ini, untuk mendeteksi zat fenolik dan indolis yang dapat dinaikkan jauh lebih awal (minggu atau bulan) bahwa kadar urea dan nitrogen residual dalam darah meningkat.

Itu dapat melayani Anda: Cerio: Struktur, Properti, Memperoleh, Penggunaan

Limbah beracun ini terbentuk dari busuk makanan usus.

Zat -zat ini menumpuk dalam darah ketika mereka tidak dihilangkan dengan benar, oleh karena itu, tes xantoproteic positif dapat memprediksi pembentukan gagal ginjal yang cepat itu sendiri atau keadaan uremia.

Menurut intensitas warna, Anda dapat menentukan seberapa canggihnya. Dalam hal ini tes ini kuantitatif.

Pada orang sehat, tes ini memberikan sedikit warna kuning, sesuai dengan tingkat normal tryptophan dan tirosin yang bisa dalam darah.

Sementara itu pada pasien ginjal reaksi xantoproteic memberikan sangat positif karena adanya zat berikut: fenol, indol, paracresol, asam oksi aromatik, antara lain.

Tindakan pencegahan

Tes ini harus dilakukan oleh para profesional terlatih. Semua standar biosafety harus dipertimbangkan, karena reagen yang digunakan adalah asam dan basa korosif.

Jika, secara tidak sengaja, beberapa tetes asam nitrat pada kulit atau kuku jatuh, mereka akan menjadi kuning, karena kedua struktur mengandung protein. Selain itu, pada kulit dan mukusas itu menyebabkan luka bakar yang serius.

Jika kontak dengan kulit terjadi, protokol yang harus diikuti harus segera mencuci area dengan sabun dan air selama sekitar 20 menit.

Jika Anda memercikkan mata, Anda harus mencuci dengan banyak air segar, mencoba agar mata tetap terbuka.

Referensi

1. "Reaksi Xantoproteica" Wikipedia, ensiklopedia gratis. 2 Sep 2019, 17:49 UTC. 21 Okt 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge dan, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge dan. Karakterisasi fisikokimia dan kandungan protein ekstrak cairan ostion bakau (Crassostrea Rhizophorae). Kimia Kuba, 2014; 26 (1): 66-74. Tersedia di Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Isolasi dan kinerja GMP oleh presipitasi Lactosuero dengan asam trikloroasetat. Ilmuwan. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Tersedia di: ve.Scielo.
4. Vásquez a. Reaksi xantoproteic. Majalah Klinis Spanyol. 1949; 35 (5): 326-327. Tersedia di: Elsevier
5. Gálvez i, gárate atau. Reaksi Becher and Andrewes dalam bedah kemih. Layanan Urologi Rumah Sakit Spanyol. Majalah Urologi Argentina 395-404