Baird Parker Agar Apa itu, fondasi, persiapan, penggunaan

Dia Baird Parker Agar atau telur kuning telur adalah media kultur yang solid, selektif dan diferensial. Itu dibuat pada tahun 1962 untuk deteksi dan jumlah koagulase positif staphylococci (Staphylococcus aureus).

Ini terdiri dari kasein pankreas yang dihidrolisis, ekstrak daging, ekstrak ragi, lithium klorida, glisin, natrium piruvat, kalium telurit, pegangan dan emulsi kuning telur.

Koloni khas Staphylococcus aureus di Baird Parker Aging. Sumber: Daizy John [CC oleh 4.0 (https: // createveCommons.Org/lisensi/oleh/4.0)]

Baird Parker Agar didasarkan pada kapasitas S. Aureus untuk mengurangi telurito dan menghasilkan lesitinase. Kedua properti menghasilkan koloni dengan karakteristik spesifik untuk spesies ini. Oleh karena itu, ia memberikan efektivitas besar dalam mendeteksi mikroorganisme ini.

Koloni khas S. Aureus Mereka berwarna abu -abu hitam atau gelap, dengan tepi yang tidak berwarna dan lingkaran lingkaran yang mengelilingi mereka, berdiferensiasi dari sisa mikroorganisme. Patogen ini dapat ditemukan dalam sampel klinis, perairan, kosmetik dan makanan mentah atau dimasak.

Diagnosis atau deteksi adalah yang paling penting, karena variasi patologi yang dihasilkannya, seperti keracunan makanan, sindrom kulit yang berlepit, sindrom syok toksik, abses, meningitis, septikemia, endokarditis, antara lain.

Dasar

Kekuatan gizi

Kasein Pankreas Dihidrolisis, Ekstrak Daging dan Ekstrak Ragi adalah sumber nutrisi, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pengembangan umum mikroba, sedangkan piruvat dan glisin adalah senyawa yang mendukung pertumbuhan spesifik dari Staphylococcus aureus.

Selektif

Agar Baird Parker selektif karena mengandung zat yang menghambat pertumbuhan flora yang menyertainya, sambil mendukung pengembangan S. Aureus. Senyawa penghambatan adalah lithium klorida dan tellurit kalium.

Diferensial

Media ini memungkinkan membedakan S. Aureus dari sisa koagulase negatif Staphylococci. S. Aureus Ini memiliki kemampuan untuk mengurangi telurit menjadi teluro logam hitam, membentuk koloni hitam atau abu -abu gelap.

Demikian juga, kuning telur menyediakan substrat untuk menunjukkan keberadaan enzim lektinase dan lipasa. S. Aureus Ini adalah lesitinase positif dan oleh karena itu halo yang jelas akan diamati di sekitar koloni, menunjukkan bahwa lesitin dihidrolisis.

Dapat melayani Anda: napas gill: bagaimana itu dilakukan dan contoh

Dalam pengertian ini, penampilan dalam usus besar hitam atau hitam atau abu -abu ini S. Aureus. 

Jika zona presipitasi terbentuk, itu menunjukkan bahwa ada aktivitas lipase. Beberapa strain S. Aureus Mereka positif dan lipase negatif lainnya.

Jika S. Aureus Jadilah lipase positif. Area buram akan diamati di sekitar koloni hitam atau abu -abu gelap, dan kemudian halo yang jelas untuk aksi lecithinase.

Koloni bakteri selain S. Aureus Mampu tumbuh di media ini mereka akan mengembangkan koloni yang tidak berwarna atau coklat, tanpa halo di sekitar.

Anda juga dapat mengamati koloni hitam atipikal dengan atau tanpa tepi yang tidak berwarna, tetapi tanpa halo ringan. Koloni -koloni ini tidak boleh diperhitungkan, mereka tidak sesuai dengan S. Aureus.

Persiapan

Emulsi kuning telur

Telur ayam keren diambil, berkeliaran dengan baik dan ditempatkan 2 hingga 3 jam dalam 70% alkohol. Kemudian, telur terbuka secara aseptik dan hati -hati memisahkan terang kuning telur. Selanjutnya, 50 mL kuning telur diambil dan dicampur dengan 50 mL larutan fisiologis steril.

1% P/V Potasium Tello

Beberapa rumah komersial menjual 1% puetassium teluro siap digunakan. Itu ditambahkan ke medium sebelum cara memadat.

Untuk menyiapkan solusi ini di laboratorium, 1.0 GR Kalium Tellurite dan larut dalam bagian air. Selanjutnya jumlah air selesai sampai mencapai 100 mL. Solusinya harus disterilkan dengan metode penyaringan.

Persiapan media kultur

Berat 60 gr dari media dehidrasi dan larut dalam 940 ml air suling. Biarkan campuran istirahat selama sekitar 10 hingga 10 menit.

Itu dapat melayani Anda: hubungan antarspesifik: jenis dan contoh

Oleskan Panas Mengaduk Lingkungan Sering untuk Meningkatkan Proses Pembubaran. Biarkan mendidih sebentar. Sterilice in Autoclave pada 121 ° C selama 15 menit.

Diamkan sampai mencapai suhu 45 ° C dan tambahkan 50 mL emulsi kuning telur dan 10 mL telurit 1%. Aduk rata dan sajikan antara 15 hingga 20 mL pada piring steril petri.

Biarkan SoolDify, pesan di plateer terbalik dan simpan di lemari es sampai digunakan.

PH akhir dari media yang disiapkan harus 6,8 ± 0,2.

Sebelum menabur sampel, Anda harus menunggu piring untuk mengambil suhu lingkungan. Menabur plak karena string atau permukaan yang ditanam dengan drigalski spatula.

Warna media dehidrasi dipanggang dan warna media yang disiapkan adalah kuning muda.

Menggunakan

Sampel klinis

Sampel klinis secara langsung ditaburkan dengan mengeluarkan bagian material di salah satu ujung piring, dan dari sana mereka menonjol karena kelelahan. Inkubasi selama 24 hingga 48 jam pada 35-37 ° C.

Sampel makanan

Beratnya 10 gr dari sampel makanan dan homogenisasi dalam 90 mL air peptonada 0,1%, dari sana mereka menyiapkan pengenceran jika perlu. Inokulasi plak dalam rangkap tiga dengan 0,3 mL larutan yang disiapkan, dan menabur dengan permukaan dengan drigalski spatula. Itu incuba selama 24 hingga 48 jam pada 35-37 ° C.

Metodologi ini memungkinkan Anda untuk menghitung koloni khas yang diperoleh dan sangat ideal saat keberadaannya S. Aureus di atas 10 UFC per gr/ml sampel.

Jika dicurigai jumlahnya S. Aureus Itu kecil atau ada banyak flora yang menyertainya, disarankan. Ini akan mendukung pertumbuhan S. Aureus dan menghambat pengembangan flora yang menyertainya. Tabung Tuft akan ditaburkan di Baird Parker Agar.

Dapat melayani Anda: bagaimana organisme hidup dari lingkungan kita dibedakan?

Sampel air

Dalam sistem penyaringan vakum dan disterilkan, 100 ml air yang diteliti disaring, dan kemudian 0,4 mikron membran mikropori dihilangkan dengan penjepit steril dan ditempatkan pada pelat parker Baird Parker. Itu incuba selama 24 hingga 48 jam pada 35-37 ° C. Teknik ini memungkinkan koloni khas untuk mengandalkan S. Aureus.

Qa

Untuk mengevaluasi kualitas agar Baird Parker, strain yang diketahui dapat digunakan, seperti Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Dalam kasus strain S. Aureus ATCC diketahui mengurangi telurit, dan lipase positif dan lesitinase. Oleh karena itu harus ada perkembangan yang memuaskan dan menumbuhkan koloni cembung dengan pusat hitam dan tepi yang tidak berwarna, dengan halo buram dan halo lain yang lebih jelas.

Untuk bagiannya S. Epidermidis Perkembangan yang buruk diperkirakan di media ini, dengan koloni abu -abu mengoceh menjadi hitam, tanpa halo yang jelas.

Untuk DAN. coli Dan P. Mirabilis Itu diharapkan terhambat sepenuhnya atau sebagian. Dalam hal menanam koloni coklat tanpa zona buram, atau halo bening.

Rekomendasi

-Media tidak boleh dipanaskan setelah menambahkan telurito dan kuning telur.

-Persiapan emulsi kuning telur dan agregatnya di tengah adalah langkah kontaminasi yang sangat rentan. Perawatan harus dibuat.

-Jika ada koloni khas S. Aureus Itu harus dikuatkan dengan mengendarai tes koagulase ke strain tersebut.

-Jika ada hasil yang diragukan dengan koagulase, tes konfirmasi lainnya harus dipasang.

-Berhati -hatilah agar tidak membingungkan kehadiran koloni khas S. Aureus Dengan koloni hitam atipikal.

Referensi

1. Laboratorium BD. Baird Parker Agar. Tersedia di: BD.com
2. Laboratorium Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Tersedia di: http: // f-soria.Itu/informasikan