BHI Agar Apa itu, fondasi, persiapan, penggunaan

Dia BHI Agar o infus jantung otak. Ini adalah media kultur padat yang bergizi. Dalam bahasa Spanyol kami menyebutnya sebagai Infusion Cerebro Heart Agar. Ini adalah media kultur non -selektif, yang berarti bahwa semua jenis gram bakteri positif dan gram negatif dapat dikembangkan, serta beberapa jamur ragi dan filamen.

Ini terdiri dari infus otak dan jantung sapi muda, hewan -peptik -peptik hidrolyz.

Perlu dicatat bahwa BHI Agar adalah salah satu media kultur yang paling sering di laboratorium bakteriologi. Ini dapat digunakan tanpa suplemen sebagai primer, subyektif koloni yang diperoleh di media selektif lainnya atau untuk pemeliharaan strain di laboratorium.

Di sisi lain, ini adalah cara yang ideal untuk digunakan sebagai dasar dalam persiapan media yang diperkaya, seperti agar darah dan agar cokelat. Kedua cita -cita untuk mengisolasi mikroorganisme yang menuntut dari sudut pandang nutrisi. Namun, harus diperhitungkan bahwa karena mengandung glukosa, tidak cocok untuk mengamati pola hemolisis.

Demikian juga, agar BHI dapat digunakan untuk persiapan sarana khusus untuk isolasi mikroorganisme patogen dari pertumbuhan yang sulit di media umum, termasuk: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae dan Histoplasma capsulatum.

Dengan aditif antibiotik, agar BHI menjadi media selektif untuk isolasi jamur.

Dasar

Ini adalah media kultur bergizi untuk mengisolasi mikroorganisme yang cukup menuntut, mampu meningkatkan pengayaannya dengan penambahan darah dan suplemen bergizi lainnya.

Ini adalah media kultur non -selektif, oleh karena itu memungkinkan pertumbuhan bakteri paling positif dan gram negatif, serta beberapa jamur. Namun, itu bisa menjadi selektif dengan penambahan antibiotik.

Media ini mengandung infus otak dan jantung daging sapi, jaringan hewan terhidrolisis dan jaringan kasin pankreas yang dihidrolisis; Semua senyawa ini bertindak sebagai sumber vitamin, asam amino, nitrogen dan karbon.

Dapat melayani Anda: flora dan fauna entre ríos: spesies representatif

Glukosa adalah karbohidrat yang menyediakan energi untuk mikroorganisme begitu mereka telah difermentasi. Sedangkan, natrium klorida dan disodium fosfat mempertahankan keseimbangan osmotik dan memberikan pH dekat netralitas. Akhirnya, agar memberikan konsistensi yang kuat terhadap lingkungan.

Persiapan

Beratnya 52 gram media dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Ambil campuran ke sumber panas sampai mendidih, sering agitasi selama proses pembubaran.

Anda dapat menyiapkan wedges atau bhi agar -agar tanpa aditif.

Wedges

Untuk persiapan baji, sajikan persiapan sampai mereka mengisi setengah dari setiap tabung, tutup dan sterilisasi dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 menit, saat tidur di atas pangkalan sampai mereka mengeras. Selanjutnya simpan di lemari es sampai digunakan.

Bhi wedges untuk bacteroteca. Sumber: Foto diambil oleh penulis MSC. Marielsa Gil.

Piring

Campuran terlarut adalah autoclava pada 121 ° C selama 15 menit, ketika meninggalkannya dibiarkan dingin hingga 50 ° C dan disajikan 20 mL medium dalam piring steril petri. Mereka diizinkan untuk memperkuat, diinvestasikan dan disimpan di lemari es sampai mereka menggunakan. Biarkan pelat mengambil suhu sekitar sebelum menabur.

PH medium harus 7,4 ± 0,2.

Media yang tidak siap adalah krem ​​dan disiapkan adalah Amber ringan.

Agar darah

Setelah mensterilkan media, dinginkan hingga suhu perkiraan 45 hingga 50 ° C, pada saat itu tambahkan darah (50 mL), campur dengan lembut untuk menghomogenisasi dan sajikan 20 mL pada setiap pelat petri. Jika gelembung terbentuk di atas piring, nyala api yang lebih ringan pada gelembung untuk menghilangkannya harus dilewatkan dengan cepat.

Demikian juga, media khusus dapat disiapkan dengan menambahkan aditif yang sesuai saat campuran mencapai suhu 45 hingga 50 ° C.

Dapat melayani Anda: kemampuan fisik

Mediumnya merah ceri.

Aplikasi

Gunakan tanpa suplemen

Agar BHI tanpa aditif berguna sebagai budidaya utama dan menabur strain murni mikroorganisme sedikit atau cukup menuntut untuk identifikasi selanjutnya.

Karena ini adalah media warna yang terang, sangat ideal untuk pengamatan pigmen dan juga dengan tidak mengandung zat interferensial, beberapa tes biokimia, seperti oksidase dan katalase, atau memasang tes biokimia lainnya dari koloni dari agar ini.

Demikian juga, agar BHI luas.

Pelat atau irisan yang ditanam oleh permukaan dengan strain bakteri diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 hingga 48 jam. Sementara, dalam jamur suhu dan waktu inkubasi akan tergantung pada jenis jamur yang dicari.

Sebagai agar dasar untuk persiapan media lain

Dengan basis ini Anda dapat menyiapkan media yang diperkaya dan selektif.

Diperkaya

Fungsi utamanya adalah untuk berfungsi sebagai dasar dalam persiapan darah rutin -guna di laboratorium mikrobiologi. Terutama, basis BHI kondusif untuk isolasi strain Streptococcus sp. Namun, ia tidak nyaman karena tidak memadai untuk pengamatan pola hemolisis dengan mengandung glukosa.

Ini juga digunakan dalam persiapan kelinci atau darah kuda Haemophilus sp. Untuk hasil yang lebih baik Anda dapat menambahkan suplemen pengayaan (Isavalex).

Jika sampel berasal dari saluran pernapasan ke agar, bacitracine dapat ditambahkan untuk menghambat flora yang menyertainya dan meningkatkan kemungkinan pemulihan strain strain dari Haemophilus sp.

Di sisi lain, Anda dapat menyiapkan darah (domba atau manusia) dengan Cistina Tellurito untuk diisolasi Corynebacterium difterie. Demikian juga, ini berguna untuk menyiapkan darah kelinci, dengan agregat cistine dan glukosa untuk isolasi Francisella tularensis.

Penaburan pelat agar darah dilakukan dengan kelelahan dan diinkubasi pada 35-37 ° C selama 24-48 jam di mikroaerofilia (5-10% dari CO₂).

Dapat melayani Anda: pohon filogenetik: jenis dan karakteristiknya, contohnya

Selektif

Media ini dengan agregat antibiotik dapat menggantikan agar Sabouraud untuk isolasi jamur.

Agar BHI yang dikombinasikan dengan kloramfenikol - gentamisin atau penisilin -, streptomisin dan darah kuda sangat ideal untuk isolasi Histoplasma capsulatum.

Tergantung pada mikroorganisme yang dicari untuk mengisolasi inkubasi pada 35-37 ° C atau pada suhu kamar dalam aerobiosis. Terkadang inkubasi di kedua rentang suhu diperlukan, menggunakan 2 pelat untuk ini.

Beberapa jamur suka Trichophyton Mentagrophytes Mereka harus diinkubasi pada suhu kamar hingga 7 hari.

Qa

Dari setiap lot yang disiapkan, disarankan untuk menginkubasi 1 pelat atau baji pada 37 ° C selama 24 jam dan memverifikasi bahwa tidak ada pertumbuhan; Terutama penting saat menyiapkan darah, karena itu adalah media yang mudah terkontamin.

Di sisi lain, kualitas medium dapat dievaluasi mengevaluasi strain pola yang diketahui atau disertifikasi dan mengamati pengembangannya.

Dalam hal ini, untuk mengevaluasi BHI Agar tanpa aditif yang dapat Anda gunakan strain Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C diinkubasi dalam aerobiosis selama 24 hingga 48 jam. Dalam semua kasus, pertumbuhan yang memuaskan diharapkan.

Untuk mengevaluasi pelat agar darah, Anda dapat menabur strain  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 atau Trichophyton Mentagrophyes ATCC 9533.

Strain bakteri diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam mikroaerofilia selama 24 jam, sedangkan jamur diinkubasi pada suhu kamar di ruang lembab hingga 7 hari. Dalam semua kasus pertumbuhan yang memuaskan diharapkan.

Referensi

1. Laboratorium Britania. Agar Infus Jantung Otak Agar. Tersedia di: Britanialab.com.
2. Laboratorium BD. Agar Infus Jantung Otak (BHI). Tersedia di: BD.com.