Biggy agar, persiapan dan penggunaan
- 4508
- 1340
- Domingo Gutkowski
Dia Biggy Agar Ini adalah media budaya yang solid, selektif, dan diferensial. Itu dirancang untuk mengisolasi dan membantu identifikasi spesies utama Candida. Namanya Biggy berasal dari akronim dalam Bismuth Bismuth Glucose Glycine Yeas.
Formula asli dibuat oleh Nickerson, jadi media ini juga dikenal sebagai Nickerson Agar. Saat ini terdiri dari ekstrak ragi, glisin, dekstrosa, amonium sitrat, bismuth sitrat, natrium sulfit dan agar.
Representasi grafis dari Biggy Agar. Sumber: Flickr.comBiggy Agar diformulasikan untuk diferensiasi spesies kompleks C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei dan c. Kefyr, Tetapi spesies lain seperti Candida glabrata, c. Parapsilosis, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum Candidum dan Saccharomyces cerevisiae.
Namun, ia memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang baik, ketika membandingkannya dengan media lain dengan fungsi yang sama, ini berada di tempat kedua, diatasi oleh Chromagar. Untuk alasan ini banyak laboratorium lebih suka yang terakhir, meskipun jauh lebih mahal.
Seharusnya jelas bahwa penggunaan agar Biggy, serta cara serupa lainnya, membantu identifikasi dugaan yang cepat, tetapi tidak pernah konfirmasi. Oleh karena itu, metode identifikasi tambahan harus tersedia; Misalnya, sistem identifikasi Vitek 32 dan API 20.
[TOC]
Dasar
Biggy Agar dianggap sebagai media selektif sebagian untuk isolasi ragi, terutama genus Candida, meskipun genre lain dapat tumbuh.
Ini juga merupakan media diferensial karena tergantung pada spesies yang terlibat, karakteristik yang berbeda akan diamati dalam aspek, warna, bentuk dan ukuran. Ini dianggap sebagai media kromogenik, untuk pengembangan beragam warna di koloni.
Dapat melayani Anda: metionin: karakteristik, fungsi, makanan, manfaatWarna yang disajikan oleh koloni ragi adalah karena adanya bismuth sulphite dalam agar. Nickerson menyadari bahwa ragi genus candid. Ini berasal koloni antara cahaya ke hitam.
Agar ini mengandung ekstrak ragi dan dekstrosa, yang menyediakan sumber nutrisi dasar dan energi untuk pengembangan ragi. Glycine adalah merangsang pertumbuhan ragi, sambil menghambat perkembangan bakteri tertentu.
Dalam hal yang sama, amonium dan bismuth sitrat, serta natrium sulfit bertindak sebagai penghambat pertumbuhan bakteri. Agar adalah agen yang memberikan konsistensi yang kuat terhadap lingkungan.
Persiapan
Beratnya 45 gr dari kultur dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Kocok dan panaskan campuran, biarkan mendidih selama 1 menit hingga larutan lengkap. Media kultur ini tidak disterilkan dalam autoklaf.
Saat mendinginkan sekitar 45 ° C di Maria tuangkan 20 ml pada piring steril petri.
Warna medium dehidrasi berwarna kekuningan dan abu -abu disiapkan adalah gel putih kekuningan, di mana endapan flokulan sedikit dapat diamati.
PH harus 6,8 ± 0,2.
Media yang disiapkan harus disimpan dalam lemari es (4 ° C) dan melindungi dari cahaya. Seperti cara yang tidak memiliki klava diri harus digunakan sesegera mungkin. Penggunaannya direkomendasikan sebelum bertemu 3 hari sejak persiapannya.
Dapat melayani Anda: biomaterialMenggunakan
Pelat diinkubasi pada suhu kamar (25 ° C) pada 24, 48 dan 72 jam, waktu inkubasi dapat diperpanjang hingga 5 hari.
Setiap spesies Candida mengembangkan karakteristik tertentu yang membuatnya membedakan satu sama lain. Produsen medium menggambarkan karakteristik berikut untuk setiap spesies:
-Kompleks Candida Albicans: Itu berkembang dalam agar ini sebagai koloni halus, bulat, coklat atau hitam, dengan sedikit tepi miselia. Dengan ketentuan bahwa warna gelap tidak menyebar ke lingkungan.
-Candida Tropicalis: Koloni cerah, kecil, gelap, dengan tepi miselia hitam dan terang. Warna gelap menyebar ke lingkungan, karakteristik yang khas dari spesies ini, setelah diinkubasi selama 72 jam.
-Candida Krusei Kembangkan koloni yang kasar dan datar, dengan tepi antara coklat ke Negruzco.
-Candida Parakrusei: Koloni berukuran sedang, sebagian besar waktu dengan penampilan kasar, datar. Warnanya dapat bervariasi antara kopi kemerahan gelap yang cerah hingga kopi kemerahan terang. Tepi koloni memiliki miselium kekuningan yang luas.
-Candida Stellelatoid: Mengembangkan koloni sedang, datar, coklat tua, hampir hitam. Perkembangan miselia sangat langka.
Sebuah studi oleh Yücesoy dan Marol pada tahun 2003, menunjukkan bahwa media Chromagar menghadirkan sensitivitas dan spesifisitas yang lebih baik untuk diferensiasi dan identifikasi spesies Candida yang berbeda dari agar Biggy Agar.
Qa
Untuk kontrol sterilitas, pelat diinkubasi tanpa diinokulasi pada 25 ° C, dalam kegelapan selama 24 hingga 48 jam, diharapkan tidak ada pertumbuhan apa pun atau perubahan warna.
Itu dapat melayani Anda: indera sentuhan: bagian, cara kerjanya dan fungsinyaStrain ATCC yang direkomendasikan untuk melakukan kontrol kualitas sedang adalah:
Kompleks Candida albicans ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. Dalam semuanya, pertumbuhan diharapkan seperti dijelaskan di atas.
Anda juga dapat menggunakan strain berikut:
Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. Di dua pertama total penghambatan diharapkan, tetapi dalam kasus menumbuhkan sebagian koloni akan menjadi warna krem.
Dalam kasus S. Aureus Itu diharapkan benar -benar terhambat, tetapi jika mereka tumbuh sebagian, koloni mereka berkulit putih.
Batasan
Beberapa bakteri mampu berkembang di media ini dan bahkan bisa menjadi gelap, mensimulasikan tetangga Candida.
Tabel: Karakteristik koloni beberapa ragi di Biggy setuju sesuai dengan pekerjaan Yücesoy M dan Marol S.
Sumber: Yücesoy M, Marol S. Kinerja Chromagar Candida dan Biggy Agar untuk Identifikasi Spesies Yeas. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7Referensi
- Yücesoy M, Marol S. Kinerja Chromagar Candida dan Biggy Agar untuk Identifikasi Spesies Yeas. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7.
- MCD Lab. File Teknis Penuaan Biggy. Tersedia di: McDlab.bersih/
- Lab Neogen. Biggy Agar. Tersedia di: Foodsafety.Neogen.com
- Laboratorium Conda Pronadisa. Biggy Agar. Tersedia di: Condalab.com
- Laboratorium BD. BD Biggy Agar (Bismuth Glucose Glycine Yag Agar). 2011. Tersedia di: BD.com