Emb

E noda lungerangular. Coli pada agar emb. Sumber: Eunice Laurent, CC BY-SA 4.0, Wikimedia Commons

Apa agar emb?

Dia Emb Ini adalah media kultur padat selektif dan diferensial yang digunakan untuk isolasi basil gram -negatif, terutama dari keluarga Enterobacteriacee, dan basil gram -negatif lainnya yang tidak menuntut. Ini juga dikenal dengan akronim EAM, yang berarti eosina-azul dari metilen.

Media ini diciptakan oleh Holt-Harris dan Teague pada tahun 1916. Ini mengandung pepton, laktosa, sukrosa, dipotassium fosfat, agar, eosin, biru metilen dan air. Ini sangat mirip dengan agar MacConkey, terutama jika agar embok dari levine digunakan, yang tidak mengandung sukrosa.

Faktanya, setiap laboratorium memutuskan jika bekerja dengan satu atau yang lain, karena mereka memenuhi fungsi yang sama, meskipun secara biokimia berbeda.

Bahkan menghadirkan ketidaknyamanan yang sama dengan agar MacCkonkey klasik dalam produksi Swarming untuk gender Proteus. Oleh karena itu, untuk menghindari fenomena ini, konsentrasi agar dapat ditingkatkan hingga 5%.

Dasar

Selektif

Agar EMP secara halus selektif karena mengandung pewarnaan anilinic (eosin dan metilen biru), yang bertindak sebagai inhibitor, mencegah pertumbuhan sebagian besar bakteri gram -positif dan beberapa bakteri yang menuntut menuntut basil yang menuntut menuntut basili yang menuntut menuntut basile yang menuntut menuntut menuntut basile.

Namun, agar ini memiliki ketidaknyamanan bahwa beberapa bakteri gram -positif dapat menahan keberadaan zat penghambat dan tumbuh sebagai tanda -tanda warna yang kecil, seperti Enterococcus faecalis dan beberapa Staphylococcus.

Ragi tertentu juga dapat tumbuh, seperti Kompleks Candida albicans, yang akan memberikan koloni merah muda yang sangat kecil. Clamidospores bahkan dapat berkembang dari ragi ini jika sampel ditaburkan berdasarkan kedalaman.

Diferensial

Di sisi lain, agar emb juga merupakan media diferensial, karena pewarna -pewarna ini bersama -sama (eosin dan metilen biru) memiliki sifat membentuk endapan dalam pH asam, oleh karena itu, mereka berfungsi sebagai indikator produksi yang sama.

Dapat melayani Anda: alometri

Oleh karena itu, bakteri fermentasi atau sukrosa yang lemah menghasilkan warna ungu dalam 24 hingga 48 jam. Misalnya, genre Klebsiella, Enterobacter Dan Serratia.

Bakteri yang sangat memfermentasi laktosa, seperti Escherichia coli, atau sukrosa, seperti Enterocolithic Yersinia salah satu Proteus Penneri, Mereka membentuk endapan hitam kehijauan, memberikan penampilan kecerahan logam, karakteristik pada spesies ini.

Perlu dicatat bahwa jika media embin digunakan (tanpa sukrosa), Enterocolithic Yersinia Dan Proteus Penneri Mereka akan menghasilkan koloni transparan.

Bakteri yang tidak memfermentasi laktosa atau sukrosa dipelihara dengan adanya peptonas, yang menyediakan asam amino dan nitrogen yang diperlukan untuk perkembangan bakteri, dan menghasilkan koloni transparan. Misalnya, genre Salmonella Dan Shigella, diantara yang lain.

Penting juga untuk menekankan gender itu Acinetobacter Itu dapat menghadirkan koloni lavender biru, bahkan jika itu bukan fermeter laktosa, atau sukrosa, tetapi mereka memiliki sifat memperbaiki metilen biru di dinding selnya. Ini juga dapat terjadi dengan bakteri oksidatif lainnya.

Persiapan

Media dehidrasi asli adalah krem ​​ringan. Untuk menyiapkan media kultur ini, 36 gram media dehidrasi harus ditimbang dan ditangguhkan dalam perbaikan yang berisi satu liter air suling.

Setelah meninggalkan campuran 5 menit saat istirahat, bawa fixola ke sumber panas, campur dengan cara yang kuat dan konstan sampai mendidih dan larut sepenuhnya.

Selanjutnya, media kultur yang sudah terlarut harus disterilkan menggunakan autoclave pada 121 ° C selama 15 menit.

Waktu selesai, itu dihapus dari autoclave dan diizinkan berdiri sebentar. Maka masih panas (45-50 ° C) antara 15 hingga 20 mL agar pada setiap pelat steril petri. Media harus berupa lakmus biru.

Dapat melayani Anda: amilase: karakteristik, klasifikasi, struktur, fungsi

Setelah disajikan, piring dibiarkan sedikit terbuka sampai agar sedikit dingin. Kemudian mereka ditutup dan dibiarkan memadat sepenuhnya. Selanjutnya, mereka dipesan dalam trombosit terbalik dan disimpan dalam lemari es (8 ° C) sampai digunakan.

Prosedur ini sebaiknya dilakukan dalam lonceng aliran laminar atau di depan Bunsen yang lebih ringan untuk mencegah kontaminasi.

Penting untuk diingat bahwa setiap rumah komersial akan menunjukkan jumlah yang harus ditimbang untuk mempersiapkan media budaya.

PH akhir medium harus 7.2 ± 0.2

Aplikasi

• Media ini digunakan untuk menabur urin dan tinja atau jenis sampel klinis apa pun, terutama jika keberadaan basil gram -negatif yang tidak menuntut diduga, seperti basil milik keluarga Enterobacteriaceae, yang tumbuh dengan sangat baik di media ini.
• Bakteri enteropatogenik genre Shigella Dan Salmonella Mereka dibedakan oleh koloni mereka yang tidak berwarna atau sedikit kuning.
• Bacilli non -fermentasi lainnya tumbuh, seperti Aeromonas, Pseudomonas, Acinetobacter, diantara yang lain.
• Juga, media ini sangat berguna dalam analisis mikrobiologis makanan dan air, karena sangat ideal untuk fase konfirmasi lengkap dari penentuan coliform, yaitu, untuk menguatkan keberadaan DAN. coli Dari kaldu EC keruh, dari teknik angka yang paling mungkin (NMP).

Qa

Untuk memverifikasi bahwa media kultur yang baru disiapkan bekerja dengan baik, kontrol dapat ditabur untuk mengamati karakteristik koloni dan memverifikasi bahwa mereka memberikan seperti yang diharapkan.

Untuk melakukan ini, Anda dapat menggunakan strain ATCC atau strain yang diidentifikasi dengan baik DAN. coli, Enterobacter aerogenes, Klebsiella sp, Salmonella typhimurium, Shigella Flexneri, Pseudomonas aeruginosa dan beberapa bakteri positif gram, seperti S. Aureus.

Diharapkan itu DAN. coli menghasilkan koloni hitam kebiruan yang dikembangkan dengan baik dengan kilau logam hijau. Ketika Enterobacter aerogenes Dan Klebsiella sp Mereka harus memberikan koloni lendir yang berkembang dengan baik Bluish Black.

Itu bisa melayani Anda: kolom winograsky

Untuk bagian ini, Salmonella Typhimurium Dan Shigella Flexneri Mereka harus mengembangkan koloni besar dan tidak berwarna atau dengan warna kuning muda.

Akhirnya, genre Pseudomonas aeruginosa Itu tumbuh sebagai koloni tidak berwarna dengan ukuran tidak teratur, sedangkan bakteri gram -positif harus benar -benar dihambat atau tumbuh dengan koloni yang sangat kecil.

Pertimbangan akhir

Terkadang, sterilisasi menyebabkan metilen biru berkurang, mengamati media oranye. Agar metilen biru ke oksida dan memulihkan warna ungu, itu harus dicampur dengan lembut sampai warnanya pulih.

Juga, setelah disterilkan, pewarna dapat mengendap, jadi harus dicampur dengan baik sebelum menyajikan piring petri.

Referensi

1. Agar Eosina dan Methylene Blue. Pulih dari calab.com.
2. Levine e.M.B. (Dengan Eosina dan Methylene Blue). Pulih dari Britanialab.com.