Tripticaseína soy broth apa itu, fondasi, persiapan, penggunaan

Dia Tripticaseína Soy Broth Ini adalah media kultur cair, sangat bergizi dan tidak selektif. Karena keserbagunaannya yang luar biasa, itu adalah salah satu media kultur cair yang paling umum digunakan di laboratorium mikrobiologi.

Itu juga dikenal dengan nama kedelai kedelai triptik Tryptic saya Kaldu atau CST). Penggunaannya sangat bervariasi karena komposisinya. Ini terdiri dari tripteine, pepton kedelai, natrium klorida, dipotassium dan glukosa fosfat.

Soy Soy Tripticaseína ditaburkan dengan strain Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 di mana produksi pigmen diamati. Sumber: Foto diambil oleh penulis MSC. Marielsa Gil.

Ini mampu mereproduksi bakteri patogen yang penting secara klinis, termasuk yang menuntut dari sudut pandang nutrisi dan bakteri anaerobik. Beberapa jamur oportunistik dan polutan juga dapat berkembang di media ini.

Karena kekuatan nutrisi yang tinggi, ia memiliki sensitivitas yang tinggi untuk mendeteksi kontaminasi mikroba, karena alasan ini dipilih oleh layanan inspeksi kesehatan hewan dan tanaman USDA untuk analisis mikrobiologis vaksin.

Demikian juga, kaldu kedelai Tripticaseína memenuhi tuntutan berbagai farmakopo (EP Eropa, JP Jepang dan USP Amerika Utara) untuk studi mikrobiologis produk di tingkat industri, seperti kosmetik dan makanan.

Di sisi lain, perlu disebutkan bahwa meskipun ada banyak penggunaan, media ini relatif ekonomis, sehingga terjangkau untuk sebagian besar laboratorium mikrobiologi. Selain itu, sangat mudah untuk disiapkan.

Dasar

Tripteine, pepton dan glukosa memberikan sifat nutrisi yang penting untuk menjadikannya media yang ideal untuk pengembangan mikroba yang cepat.

Dapat melayani Anda: taksonomi linnean makhluk hidup

Sekitar 6 hingga 8 jam inkubasi Anda sudah dapat menghargai pertumbuhan dalam kebanyakan mikroorganisme. Namun, ada strain pertumbuhan yang lambat yang bisa bertumbuh.

Sodium klorida dan fosfat dipotasik masing -masing sebagai osmotik dan kesetimbangan regulator pH. Kehadiran pertumbuhan dibuktikan dengan penampilan kekeruhan di tengah; Jika tidak ada pertumbuhan, media tetap tembus cahaya.

Karena warnanya yang terang dimungkinkan untuk mengamati produksi pigmen, seperti yang ditunjukkan pada gambar yang terletak di awal artikel, yang sesuai dengan pigmen yang dihasilkan oleh Pseudomonas aeruginosa. 

Persiapan

-Tripticaseína Soy Broth

Untuk menyiapkan kaldu kedelai triptych, 30 gr dari media komersial yang mengalami dehidrasi harus ditimbang dalam keseimbangan digital. Kemudian larut dalam satu liter air suling yang terkandung dalam fixola.

Campuran dibiarkan istirahat selama 5 menit dan kemudian mengambil sumber panas untuk membantu pembubaran sedang. Itu harus sering diaduk saat mendidih per 1 menit.

Setelah dibubarkan itu didistribusikan dalam tabung dengan ukuran yang sesuai sesuai kebutuhan. Anda dapat menggunakan tabung dengan tutup kapas atau tapas Baquelita. Selanjutnya, tabung disterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 menit.

PH medium harus 7,3 ± 0,2

Harus diperhitungkan bahwa warna kultur dehidrasi jernih dan harus disimpan antara 10 hingga 35 ° C, di tempat yang kering. Sedangkan kaldu yang disiapkan adalah kuning ringan dan harus disimpan dalam lemari es (2 hingga 8 ° C).

-Varian kaldu kedelai tripticaseína

Kaldu kedelai tripticasein yang dimodifikasi dapat disiapkan dengan menambahkan garam empedu dan novobiocin untuk melakukannya selektif untuk isolasi DAN. coli. Pilihan lain untuk tujuan yang sama adalah menyiapkan kaldu kedelai kedelai yang dilengkapi dengan vankomisin, cephixime dan telurito (2,5 μg/ml).

Dapat melayani Anda: 25 contoh reproduksi aseksual

Di sisi lain, lebih banyak glukosa (0,25%) dapat ditambahkan ke kaldu kedelai tripticaseína ketika tujuannya adalah untuk merangsang pembentukan biofilm.

Menggunakan

Itu cukup bergizi untuk memungkinkan pertumbuhan bakteri yang menuntut atau menjengkelkan seperti Streptococcus pneumoniae, Streptococcus SP dan Brucella SP, Tidak perlu menambah darah atau serum.

Demikian juga, beberapa jamur dapat berkembang dalam kaldu ini, seperti Kompleks Candida albicans, Aspergillus sp Dan Histoplasma capsulatum.

Selain itu, media ini dalam kondisi anaerob sangat ideal untuk memulihkan bakteri yang termasuk dalam gender Clostridium, serta bakteri anaerob yang tidak disporulasi dengan kepentingan klinis.

Jika 6,5% natrium klorida ditambahkan, itu dapat digunakan untuk pertumbuhan enterococcus dan streptococcus grup D lainnya.

Pada tingkat penelitian ini sangat berguna dalam berbagai protokol, terutama dalam studi biofilm atau biofilm yang membentuk bakteri. Ini juga digunakan untuk menyiapkan suspensi bakteri Mac Farland 0,5% yang diperlukan untuk melakukan antibiogram dengan metode Kirby dan Bauer.

Dalam hal ini, 3 hingga 5 koloni dengan penampilan serupa diambil dan diemulsi dalam 4-5 mL kedelai SOA triptisinin. Kemudian diinkubasi selama 2 hingga 6 jam pada suhu 35-37 ° C dan selanjutnya sesuai dengan konsentrasi yang diinginkan menggunakan larutan saline steril. TRIPTICASEIN SOY Bangun tidak boleh digunakan dari 18 hingga 24 jam inkubasi.

Ditabur

Sampel dapat ditaburkan secara langsung atau koloni murni yang diambil dari cara selektif dapat dikenakan. Inokulum harus kecil agar tidak mengudap medium sebelum inkubasi.

Biasanya diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam aerobiosis selama 24 jam, tetapi kondisi ini dapat bervariasi tergantung pada mikroorganisme yang dicari. Ini juga dapat diinkubasi dalam kondisi anaerobiosis pada suhu 37 ° C selama beberapa hari jika perlu. Misalnya, dalam menuntut mikroorganisme atau pertumbuhan yang lambat, itu dapat diinkubasi hingga 7 hari.

Dapat melayani Anda: dextrose kentang agar: fondasi, persiapan dan penggunaan

Dalam analisis mikrobiologis zat farmasi - seperti vaksin - protokol lebih ketat. Dalam kasus ini kaldu tanpa pertumbuhan tidak dikesampingkan sampai memenuhi 14 hari inkubasi berkelanjutan.

Qa

Dari setiap lot yang disiapkan, 1 atau 2 tabung harus diinkubasi untuk menunjukkan kemandulannya. Harus tetap tanpa perubahan.

Anda juga dapat menabur strain yang diketahui untuk mengevaluasi perilaku Anda. Di antara strain yang dapat digunakan adalah:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 atau 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Dalam semua kasus pertumbuhan harus memuaskan di bawah kondisi atmosfer dan suhu yang memadai untuk setiap mikroorganisme.

Batasan

-Fermentasi glukosa menyebabkan keturunan pH sedang oleh produksi asam. Ini bisa tidak menguntungkan untuk kelangsungan hidup beberapa mikroorganisme yang sensitif terhadap keasaman.

-Tidak dianjurkan untuk pemeliharaan strain, karena selain keasaman, bakteri setelah beberapa hari nutrisi buang dengan akumulasi akibat zat beracun yang membuat lingkungan yang tidak ramah.

-Anda harus bekerja merawat semua protokol sterilitas, karena kaldu mudah terkontamin.

-Setelah menyiapkan kaldu kedelai tripticasein, itu tidak boleh dicoba untuk mentransfer kaldu untuk tabung steril lainnya, karena jenis manuver ini sangat rentan terhadap kontaminasi.

Referensi

1. Laboratorium Britania. Kaldu kedelai Tripteine. Tersedia di: Britanialab.com
2. Laboratorium MCD. Tripticaseína Soy Broth. Tersedia di: sistem elektronik.com
3. Laboratorium Neogen.  Kaldu kedelai triptych. Tersedia di: Foodsafety.Neogen.com