Setengah stuart foundation, persiapan dan penggunaan

Dia Setengah Stuart Ini adalah agar semi -solid atau kaldu tanpa nutrisi, digunakan untuk pengangkutan sampel biologis. Tujuannya adalah untuk menjaga ketegangan yang ada dalam sampel tetap dapat terjadi untuk waktu tertentu, tetapi tanpa meningkatkan populasi mikroba.

Itu dibuat oleh Moffet, Young dan Stuart pada tahun 1948 dan kemudian dimodifikasi oleh Toshach dan Patsula. Ini terdiri dari natrium glyceophosphate, natrium tioglycoate, kalsium klorida dan agar-agar. Yang terakhir hadir dalam medium semi -solid dan tidak ada dalam cairan. Beberapa laboratorium menambahkan metilen biru.

Budaya dengan Transportasi Stuart. Sumber: Oleh: CDC/DR. Gilda Jones, kesopanan: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat

Mereka biasanya digunakan ketika tidak mungkin menabur sampel segera. Dalam hal ini, sampel ditempatkan dalam alat transportasi, sementara ditransfer ke laboratorium yang akan memproses tanaman.

Dengan cara ini dijamin bahwa mikroorganisme yang ada tetap hidup sampai mereka diinokulasi dalam media budaya yang sesuai.

Awalnya, penggunaannya ditakdirkan untuk mengangkut sampel uretra atau vagina di mana keberadaannya Neisseria Gonorrhoeae. Selanjutnya, mereka menyadari bahwa kegunaannya bisa lebih luas.

Media Stuart ternyata sangat efisien dalam pelestarian mikroorganisme yang labil dan mengganggu seperti Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium difteriae, Bordetella pertusis, diantara yang lain. Selain mikroorganisme non -annoying lainnya seperti Enterobacteria.

Media Stuart pada dasarnya menghindari pengeringan sampel, mempertahankan keseimbangan osmotik dan mempertahankan mikroorganisme ke pH yang ideal. Di sisi lain, secara strategis media ini tidak mengandung nutrisi, ini mencegah mikroorganisme mengalikan.

Di pasar ada pertunjukan khusus untuk mengangkut sampel yang berisi alat transportasi ini atau lainnya, yang disebut Culturette. Mereka juga dapat dipersiapkan di laboratorium.

[TOC]

Dasar

Akhir dari alat transportasi Stuart adalah menjaga sampel yang paling dekat dengan keadaan aslinya, sampai diproses.

Sodium glyceophosphate dan kalsium klorida adalah sistem buffer yang bertindak dengan mempertahankan pH dan osmolaritas.

Sedangkan, natrium tioglisat bertindak sebagai zat pereduksi dan dalam kasus mengandung ini memberikan konsistensi semi -solid, untuk menunda oksigenasi lingkungan. Akhirnya methylene blue adalah indikator oksidasi, yaitu, mendeteksi keberadaan oksigen.

Dapat melayani Anda: glycosaminoglicanos: karakteristik dan fungsi

Media semi-padat dengan indikator redoks sangat ideal untuk pengangkutan sampel di mana keberadaan bakteri anaerob diduga.

Karakteristik alat transportasi

Media Stuart, seperti alat transportasi apa pun, memenuhi karakteristik tertentu, termasuk:

-Pertahankan yang dapat dilakukan strain mikroba yang ada tanpa mengalikan.

-Itu tidak mengandung nutrisi; Senyawanya ditujukan untuk menjaga sampel terhidrasi, dalam kondisi pH dan osmolaritas yang memadai.

-Menghambat Autolyzed dari beberapa mikroorganisme yang halus, seperti pneumococcus.

-Penggunaannya bersifat sementara, tidak boleh terlalu banyak diperpanjang.

Persiapan

Setengah semi-solid Stuart dengan indikator redoks

Persiapan buatan sendiri

Bahan-bahan

Sodium glyceophosphate 10 gr

Sodium Tioglycoate 1.0 gr

Kalsium klorida 0.1 gr

Methylene Blue 0.002 gr

Agar -agar 3 gr

Air suling 1 l

Campur komponen dan panaskan hingga larutan total. Tuang dalam tabung atau escoBillones khusus. Mereka diperkenalkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada 121 ºC selama 15 menit. Biarkan tabung mendingin secara vertikal (dalam bentuk taco). Kamar pada suhu kamar.

Persiapan dengan media komersial

Berat 14,1 gr dari medium dalam 1 liter air suling. Panaskan sering agitasi sampai pembubaran totalnya, Anda bisa membiarkannya mendidih. Sisa prosedur seperti yang sudah dijelaskan.

Media dehidrasi adalah krem ​​dan disiapkan harus biru di permukaannya. Ini karena adanya metilen biru.

PH media harus disesuaikan menjadi 7,4 ± 0,2

Stuart cair setengah dimodifikasi (persiapan buatan sendiri)

Bahan-bahan

Sodium glyceophosphate 10 gr

Natrium tioglycoate 1 gr

Kalsium klorida dihidrasi 0,1 gr

1000 ml air suling

Itu membawa bahan yang sama dengan semi-padat, tetapi tidak membawa agar atau metilen biru. Dalam hal ini, komponen tanpa pemanasan dicampur dan 0,5 mL didistribusikan dalam tabung 16 x 125 mm dengan tutup benang.

Itu mensterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 10 menit. Untuk mengambil sampel -sam.

Dapat melayani Anda: Biologi Matematika: Sejarah, Objek Studi, Aplikasi

Tabung disimpan pada suhu kamar.

Aplikasi

Secara komersial ada perangkat khusus untuk mengangkut sampel yang disebut Culturette; Perangkat ini adalah tabung yang memanjang dan tipis yang membawa swab ke dalam dan pada akhirnya ada segmen yang berisi medium stuart setengah -solid atau cair.

Perangkat terbuka dan dengan swab mengambil sampel. Kemudian dimasukkan kembali ke dalam tabung sampai ujung swab dimasukkan ke dalam medium transportasi semi-padat; Beberapa membawa spons poliuretan yang diresapi dengan medium stuart cair, yang dengannya sampel dipertahankan saat tetap basah.

Dalam hal keberadaan mikroorganisme yang halus diduga, pembesaran kapas dengan batubara dalam sampel harus digunakan.

Sampel yang dapat diambil dengan usap atau sapu dan ditransfer dalam media ini adalah eksudat faring, penyeka dubur dan berbagai sekresi, termasuk: vagina, uretral, luka, okular, otic dan abses.

Selama transfer sampel dalam alat transportasi ke laboratorium, pengajuan lingkungan ke kondisi lingkungan yang ekstrem (sangat dingin atau sangat panas) harus dihindari (sangat dingin atau sangat panas). Perubahan tekanan atmosfer yang tiba -tiba juga harus dihindari.

Waktu di mana media dapat menjaga mikroorganisme tetap dapat tergantung pada ketegangan yang dimaksud. Misalnya, untuk mikroorganisme genus Neisserias dan Haemophilus dapat dipertahankan layak hingga 24 jam, tetapi strain seperti Salmonella atau Shigella dapat bertahan beberapa hari dan sampai berminggu -minggu.

Jika diperkirakan bahwa pemrosesan sampel mungkin memakan waktu lebih dari 4 hari, lebih baik membekukan sampel pada -70 ° C.

Identifikasi sampel dalam alat transportasi

Media transportasi yang disiapkan atau budaya komersial harus memiliki label di mana data berikut akan ditempatkan:

Nama dan nama keluarga pasien: Hindari pengambilan sampel kebingungan.

Nomor identifikasi: Lebih mudah untuk membawa pesanan di tempat kerja.

Sumber sampel: Membantu ahli bakteriologi untuk memilih media kultur yang tepat.

Dapat melayani Anda: pewarnaan kapsul: fondasi dan teknik

Merawat dokter: Terkadang perlu untuk konsultasi yang mungkin terjadi.

Tanggal dan Waktu Sampel: Itu diperlukan untuk penerimaan atau penolakan sampel sesuai dengan waktu yang berlalu antara sampel dan penerimaan di laboratorium.

Informasi lain yang akan sangat berguna untuk Lampiran adalah:

Diagnosis dugaan: Panduan dalam Penambahan Media Budaya Khusus Menurut Kecurigaan Diagnostik.

Perawatan antibiotik: Berguna untuk melekat pada antibiogram.

Semua informasi ini sangat penting untuk menjamin pemrosesan sampel yang baik.

Qa

Untuk mengevaluasi operasi media Stuart, Anda dapat menginokulasi strain yang diketahui dan dipelihara pada 25 ° C, seperti: Bordetella pertusis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria Gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Dalam semua kasus diharapkan untuk memulihkan mikroorganisme yang dimaksud, diawetkan selama 24 jam.

Di sisi lain, strain lain seperti: Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan Escherichia coli ATCC 11775.

Dalam semua kasus, pemulihan yang berlimpah diharapkan hingga 96 jam.

Batasan

Beberapa penelitian memastikan bahwa glyceophosphate hadir dalam medium stuart dapat dimetabolisme oleh beberapa coliforms, di antara bakteri gram negatif lainnya dan karenanya berlipat ganda dalam medium ini.

Risiko ini meningkat semakin banyak pemrosesan sampel ditunda. Demikian juga, pameran media Stuart pada suhu tinggi selama transfernya mempengaruhi khusus ini.

Referensi

1. “Tengah transportasi (mikrobiologi)." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 13 Apr 2018, 10:36 UTC. 1 Apr 2019. Tersedia di: ini.Wikipedia.org
2. Laboratorium Microkit: Media Budaya. Media Transportasi Stuart. Tersedia di: Tersedia di: Media Budaya.com
3. Lablisan. Stuart Transport Medium. Tersedia di: Lablinsan.Cl
4. MDM ilmiah. Keuntungan memiliki transportasi mikrobiologis yang berarti. Tersedia di: mdmcientify.com
5. Laboratorium Metrix. Stuart. 2017. Tersedia di: Metrixlab.MX
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.