Karakteristik Safranin, Penggunaan, Teknik, Toksisitas

Itu Safranine Ini adalah pewarna milioid, dinamai karena memiliki struktur kimianya dari 2 cincin benzena dan 2 cincin quinoid, yang terakhir adalah yang memberikan warna merah.

Ini juga disebut safranin atau dimetil merah dasar dalam bentuk ringkasannya, karena nama ilmiahnya adalah 3,7-Diamino-2,8-dimethyl-5- phenyl-phenyl-phenyll_{dua puluh}H₁₉N₄ Cl.

Struktur kimia safranin yang menunjukkan cincin benzena dan quinoid/ larutan safranin berair. Sumber: Neurotoger [domain publik] Diedit oleh MSC. Marielsa Gil/Lhchem [CC BY-SA 3.0 (https: // createveCommons.Org/lisensi/by-sa/3.0)]

Ada varian yang disebut trimethyle-safranine tetapi tidak ada perbedaan yang signifikan antara kedua zat.

Safranin adalah pewarna monokromatik dan, sesuai dengan karakteristik formula kimia, itu adalah zat muatan positif. Oleh karena itu, ia memiliki afinitas dengan struktur yang dimuat secara negatif. Struktur ini akan diwarnai merah.

Properti ini memberikan penerapan dalam banyak teknik histologis untuk mewarnai berbagai struktur seluler, baik dari organisme eukariotik dan prokariotik.

Safranine digunakan sebagai pewarna kontras dalam teknik penggunaan rutin penting dan terkenal dalam bakteriologi. Teknik-teknik ini adalah: pewarnaan gram-hucker, pewarnaan Schaeffer Fulton untuk spora atau pewarnaan kapsul bakteri, antara lain.

[TOC]

Karakteristik

Warna kunyit (rempah -rempah diperoleh dari stigma bunga Crocus sativ) adalah inspirasi untuk menempatkan nama pewarna ini. Dari istilah kunyit datang nama safranine. Itu karena kesamaan besar antara warna kunyit dan warna yang disediakan pewarna ini.

Safranin dicapai sebagai kristal atau bubuk, kedua presentasi larut dalam air. Pewarna safranin tidak berbau. Noda Struktur Merah. Struktur yang menarik pewarna safranin disebut safranofil.

Secara struktural, safranin kompleks, ia memiliki dua cincin benzena di ujung dan di tengah dua cincin quinoid berada di mana kation n berada⁺. Pusat struktur adalah sistem yang bertanggung jawab untuk memberikan warna. Dengan karakteristik ini pewarna ini diklasifikasikan dalam Kategori II.

Menggunakan

Safranin digunakan untuk mewarnai berbagai struktur. Terutama menyoroti sel -sel Kulchitsky yang ada di saluran pencernaan, juga disebut sel enterocromofines.

Itu mampu mewarnai mikroorganisme milik keluarga Rickettsiaceae. Demikian juga, ini digunakan dalam berbagai teknik, seperti metode Koster, yang dimodifikasi yang digunakan untuk pewarnaan bakteri gender Brucella.

Di sisi lain, safranin digunakan dalam teknik pewarnaan spora Schaeffer Fulton dan dalam pewarnaan gram-hucker. Dalam kedua teknik, safranin berfungsi sebagai pewarna kontras.

Dapat melayani Anda: India

Pada awalnya spora mengambil warna hijau Malachite dan sisa struktur berwarna merah oleh safranin. Di yang kedua, bakteri gram negatif kehilangan warna kaca ungu di langkah perubahan warna, oleh karena itu safranin adalah orang yang menodai bakteri negatif gram merah.

Selain itu, safranin digunakan dalam bakteriologi untuk menyiapkan agar Brucella dengan pengenceran safranin 1: 5000. Media ini berfungsi untuk membedakan spesies Brucella Suis dari spesies lainnya. Brucella melitensis Dan Brucella abortus tumbuh di media ini tapi B. suis Itu dihambat.

Di bidang agroindustri, safranin telah digunakan pada 2,25% dan diencerkan 1:10 untuk mewarnai sampel batang dari tanaman tebu.

Tanaman ini umumnya dipengaruhi oleh bakteri Leifsonia xyli Subs. Xyli, yang merusak xilema tanaman. Batang yang diwarnai dievaluasi untuk menentukan fungsi kapal xylem.

Teknik di bidang bakteriologi

Pewarnaan Castañeda untuk roda rIckettsias

Brea darah atau jaringan ditempatkan dalam larutan buffer (redaman fosfat pH 7,6). Dibiarkan kering secara spontan dan kemudian ditutupi dengan metilen biru selama 3 menit dan dikontrak dengan safranin. Rickettsias berwarna biru, kontras dengan latar belakang merah.

Pewarnaan Koster yang dimodifikasi untuk Brucella

Coretan dilakukan dan flamea di lebih ringan untuk fiksasi. Selanjutnya, ditutupi dengan campuran 2 bagian safranin berair jenuh dengan 3 bagian larutan KOH 1 mol/L, selama 1 menit. Pencucian dengan air suling dilakukan dan 1% fenado methylene blue.

Jika sampel mengandung bakteri gender Brucella Ini akan diamati oranye dengan latar belakang biru.

Pewarnaan kapsul bakteri

Campuran suspensi bakteri dengan tinta Cina dilakukan dan safranin ditambahkan. Halo kemerahan akan diamati di mikroskop di sekitar setiap kapsul bakteri dengan latar belakang hitam.

Dapat melayani Anda: zat murni

Pewarnaan spora Schaeffer Fulton

Diperpanjang dengan suspensi bakteri dilakukan. Maka dipanaskan. Ini ditutupi dengan 5%Malachite Green, sering diminum sampai emisi uap. Prosesnya diulang selama 6-10 menit. Akhirnya, dicuci dengan air dan disewa dengan safranin 0,5% selama 30 detik. Basil berwarna merah dan spora hijau.

Pewarnaan Gram-Hucker

Extended dengan suspensi bakteri dilakukan dan diperbaiki untuk memanaskan. Lamina dengan kaca ungu ditutupi. Kemudian Lugol ditempatkan sebagai larutan mordan per 1 menit. Selanjutnya, itu berubah warna dengan alkohol aseton dan akhirnya disewa dengan safranin selama 30 detik.

Bakteri positif gram dicelup biru violet dan bakteri negatif gram merah.

Beberapa laboratorium berhenti menggunakan teknik gram-hucker untuk mengadopsi teknik gram-kopeloff yang dimodifikasi. Di yang terakhir, safranin digantikan oleh fuchsin dasar. Ini karena safranin menodai spesies genera yang lemah Legionella, Campylobacter Dan Brucella.

Teknik di area histologi

Pewarnaan sel Kulchitsky (enterocromofines)

Potongan jaringan saluran pencernaan dengan perak klorida dicelup. Kemudian berubah warna dengan natrium tiosulfat dan akhirnya disewa dengan safranin.

Sel Kulchitsky dibedakan karena mereka disajikan dengan butiran coklat kehitaman.

Pewarnaan untuk deteksi osteoartritis

Safranin karena memiliki beban positif, kelompok karboks dan sulfat glikosaminoglikan mengikat dengan sangat baik. Ini adalah bagian dari proteoglikan yang merupakan tulang rawan artikular. Dalam hal ini, saat mewarnai dengan safranin atau, dapat diidentifikasi apakah ada hilangnya tulang rawan atau tidak.

Kehilangan jaringan tulang rawan dapat diukur melalui skala Mankin atau juga disebut skala osteoartritis.

Teknik ini kemudian dijelaskan: Potongan histologis direndam dalam nampan dengan larutan hematoksilin besi Weigert, kemudian dilewati alkohol asam dan dicuci dengan air.

Lanjutkan proses pewarnaan dengan merendam lembaran dengan hijau cepat, mencuci dengan asam asetat dan sekarang merendam dalam safranin atau. Untuk menyelesaikan prosesnya, dehidrasi menggunakan alkohol pada konsentrasi yang berbeda dalam urutan menaik. Langkah terakhir membutuhkan xileno atau xilol untuk sampel untuk mengklarifikasi.

Dapat melayani Anda: metaloid

Lembar dikondisikan dengan Balsem Kanada atau serupa untuk diamati di mikroskop. 

Dengan teknik ini, inti dicelup hitam, tulang hijau dan tulang rawan di mana proteoglikan merah ditemukan.

Tincion untuk identifikasi makroalga

Pérez et al pada tahun 2003 mengusulkan teknik sederhana dan ekonomis untuk mewarnai makroalga. Sampel disiapkan dalam pemotongan histologis dengan parafin. Pemotongan diatur dengan 1% gliserin, membiarkan diri mereka benar -benar kering. Kemudian ditempatkan dalam xylol untuk menghilangkan parafin.

Potongannya direhidrasi, membuatnya melewati serangkaian baki yang mengandung etanol dalam berbagai tingkat konsentrasi (urutan menurun), selama 2 menit di masing -masing.

Selanjutnya, diwarnai selama 5 menit dengan campuran 3: 1 safranin 1% dengan 1% toluidine blue, keduanya disiapkan dengan etanol 50%. Campuran ditambahkan tiga tetes asam pikrat yang bertindak sebagai mordan.

Kemudian menjadi dehidrasi lagi melalui baki alkohol, tetapi kali ini naik. Akhirnya, itu diklarifikasi dengan xilol dan sampel disiapkan dengan canada balsem untuk diamati.

Toksisitas

Untungnya, Safranine adalah pewarna yang tidak mewakili bahaya bagi mereka yang memanipulasinya. Ini adalah pewarna yang tidak berbahaya, itu bukan karsinogenik dan juga tidak mudah terbakar.

Dalam kontak langsung dengan kulit atau selaput lendir dapat menyebabkan sedikit kemerahan area, tanpa komplikasi besar. Untuk ini disarankan untuk mencuci area yang terkena dengan banyak air.

Referensi

1. Garcia h. Pewarna safranin atau. Teknik kesehatan, 2012; 1 (2): 83-85. Tersedia di: Medigrafi.com
2. Gil m. Pewarnaan Gram: Fondasi, Bahan, Teknik dan Penggunaan. 2019. Tersedia di: Lofede.com
3. Gil m. Pewarnaan spora: fondasi, teknik dan penggunaan. 2019. Tersedia di: Lofede.com
4. Safranine." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 7 Mar 2017, 10:39 UTC. Lalu 2019, 20:49 adalah.Wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Teknik warna yang berguna dalam interpretasi anatomi Graciliasis tenuifron Dan Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Bot Act. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Tersedia di: Scielo.org.
6. Gereja Aleika, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Rasio fungsionalitas pembuluh xilem dan keberadaan Leifsonia xyli Subp. Xyli. Putaran. Perlindungan sayuran. 2007; 22 (1): 65-65. Tersedia di: Scielo.Sld