Tincion of Capsula Foundation and Technices

Itu Pewarnaan kapsul Ini adalah teknik pewarnaan diferensial yang memiliki sifat menyoroti struktur polisakarida yang mengelilingi bakteri dan ragi tertentu yang disebut kapsul. Ini digunakan di laboratorium klinis untuk membantu diagnosis patologi tertentu yang disebabkan oleh mikroorganisme terbalik.

Ini juga digunakan dalam mengajar laboratorium untuk demonstrasi struktur morfologis ini kepada siswa karier sains kesehatan, seperti: kedokteran, bioanalisis, keperawatan, atau sitoteknologi, antara lain.

Klebsiella pneumoniae smear diwarnai dengan pewarnaan kapsul. Metode tinta India dengan safranin. Sumber: A.A.В [domain publik]

Ada beberapa teknik sederhana untuk menunjukkan keberadaan kapsul dalam mikroorganisme yang memilikinya, ini adalah: pewarnaan negatif, pewarnaan Anthony dan varian yang menggabungkan dua sebelumnya.

Pewarnaan negatif terutama digunakan dalam sampel CSF ketika keberadaan ragi diduga Cryptococcus neoformans. Ragi ini sering menjadi penyebab meningitis.

Teknik ini menggunakan nigrosine atau tinta Cina dan didasarkan pada menciptakan kontras antara bagian bawah persiapan dan kapsul mikroorganisme yang tidak dapat ditembus. Latar belakangnya dicat gelap dan kapsulnya tidak berwarna. Dengan cara ini struktur ini disorot.

Adapun teknik Anthony, dapat dikatakan bahwa sebagian besar digunakan dalam pengajaran laboratorium untuk menunjukkan struktur polisakarida pada bakteri seperti Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae Dan Neisseria meningitidis.

Penggunaan teknik ini untuk tujuan diagnostik sangat jarang, karena ada tes rutin lain yang memungkinkan mikroorganisme ini diidentifikasi.

[TOC]

Dasar

Kapsul adalah struktur yang kuat dari sifat polisakarida. Ini melindungi mikroorganisme fagositosis, dan karenanya merupakan struktur yang sulit untuk menembus.

Itulah sebabnya capsules starions didasarkan pada kontras. Pewarna menodai bagian bawah persiapan sementara kapsulnya tidak berwarna.

Oleh karena itu, dengan teknik -teknik ini kapsul mudah dikenali. Jika mikroorganisme tidak memiliki kapsul, itu tidak akan dibedakan dengan jenis warna ini, karena semuanya akan dicelup dari warna yang sama.

Itu dapat melayani Anda: struktur homolog dan analog (dengan contoh)

Semua teknik yang digunakan untuk mewarnai kapsul memiliki fondasi yang sama meskipun mereka menggunakan warna dan prosedur yang berbeda.

Teknik Parke pewarnaan kapsul

-Pewarnaan Anthony

Pewarnaan Anthony menggunakan kaca violet sebagai pewarna. Ini akan mewarnai tubuh bakteri dan latar belakang warna ungu.

Di sisi lain, 20% tembaga sulfat digunakan. Ini berfungsi sebagai solusi pencucian, yaitu, menghilangkan kelebihan gelas ungu persiapan, menyebabkan kapsul mengklarifikasi tetapi tanpa tubuh bakteri atau latar belakang kehilangan warnanya.

Bahan

- Susu pendek.

- Lamina portabel.

- Kaca Violet 1%.

- 20% tembaga sulfat.

- Mikroskop optik.

- Minyak imersi.

Prosedur

Teknik ini terdiri dari:

1. Kembangkan mikroorganisme dalam susu linesat selama 36 jam.
2. Tempatkan setetes panen di ujung lembaran pemegang objek dan di samping menempatkan setetes kaca ungu, aduk dan ambil dengan ujung slide lain.
3. Di luar ruangan dan tidak memperbaiki panas.
4. Cuci dengan 20%larutan tembaga sulfat, keluarkan di luar ruangan.
5. Amati mikroskop dengan tujuan perendaman. Cari ke arah ekstrem yang diperluas.

Penting untuk tidak menggunakan panas atau memperbaiki, atau mengering, karena ini merusak kapsul. Atau mencuci air.

Penafsiran

Susu yang pendek adalah media kultur yang sangat baik karena memberikan nutrisi yang diperlukan untuk mikroorganisme untuk mengembangkan kapsul yang menonjol.

Di sisi lain, susu lak akan membentuk latar belakang yang tebal dan kompak yang akan dicelupkan dengan ungu bersama dengan tubuh bakteri, tetapi kapsul yang mengelilingi mikroorganisme tidak berwarna. Oleh karena itu, halo yang jelas diamati di sekitar tubuh bakteri.

Dapat melayani Anda: faktor yang mempengaruhi aktivitas enzimatik Representasi grafis pada pengamatan mikroskopis dari noda Klebsiella pneumoniae diwarnai dengan pewarnaan Anthony. Sumber: Dibuat oleh Penulis MSC. Marielsa Gil.

Keuntungan

Ini adalah teknik sederhana untuk dilakukan. Itu tidak memerlukan fiksasi.

Demikian juga, harus dicatat bahwa media kultur lain dapat digunakan, tetapi media dengan susu lebih disukai karena memiliki keuntungan yang memberikan kapsul yang lebih menonjol.

Kerugian

Ini adalah teknik yang sedikit lebih melelahkan daripada pewarnaan negatif, dan untuk visualisasi itu membutuhkan menunggu persiapan kering.

-Pewarnaan negatif

Bahan

- Lembar slide.

- Media kultur dengan mikroorganisme.

- Tinta Cina atau nigrosin.

- Mikroskop optik.

- Saline fisiologis.

Prosedur

Tempatkan setetes salin fisiologis di penutup dan larutkan sebagian kecil dari tanaman mikroba. Penting bahwa persiapannya tidak terlalu tebal. Kemudian letakkan setetes tinta Cina atau nigrosin dan campur.

Kemudian lembar penutup ditempatkan pada persiapan tanpa melebihi cairan. Diamati pada mikroskop yang berfokus pertama pada target 10x dan kemudian diteruskan ke 40x.

Teknik ini juga dapat digunakan pada sampel CSF secara langsung. Yaitu, alih -alih menempatkan setetes kultur mikroba, setetes ditempatkan.

Keuntungan

Ini adalah metode yang sederhana untuk melakukan dan pada saat yang sama ekonomi. Itu tidak memerlukan fiksasi, atau pengeringan persiapan.

Kerugian

Ini memiliki kelemahan yang harus diamati pada mikroskop sebelum persiapan mengering, karena jika ini terjadi mikroorganisme akan berkontraksi, yang akan membuat visualisasi sulit.

Di sisi lain, positif palsu dapat terjadi jika analis tidak berpengalaman, karena leukosit biasanya membingungkan ragi.

Pengamatan ragi dengan kapsul dengan teknik Cina atau nigrosin harus dianggap sebagai diagnosis dugaan Cryptococcus neoformans Sampai ditunjukkan dengan budidaya.

Ini karena ada ragi lain yang bisa menjadi penyebab meningitis dan tidak hanya Cryptococcus neoformans, seperti genus Candida dan rhodotorula, serta spesies cryptococcus lainnya.

Dapat melayani Anda: koenzim asetil

Penafsiran

Jika ada mikroorganisme kapsulasi, latar belakang gelap akan diamati, dengan tubuh transparan mengambang dalam cairan, menyoroti keberadaan kapsul.

Cryptococcus Capsule Neoformans dicelup dengan tinta Cina. Sumber: Kredit Foto: Penyedia Konten: CDC/DR. Leanor Haley [domain publik]

-Teknik Tinta India

Teknik ini juga dapat dilakukan dengan nigrosine. Ini adalah kombinasi dari teknik yang sebelumnya dijelaskan. Teknik ini menggunakan kristal violet dan tinta India atau nigrosin.

Tubuh bakteri mengambil warna ungu dari kaca ungu karena dimuat secara negatif, sedangkan warna nigrosin bagian bawah noda. Jika bakteri memiliki kapsul, itu akan dilihat sebagai lingkaran cahaya transparan di sekitar mikroorganisme.

Kristal violet dapat diganti dengan warna -warna ini: safranin, fuchsin dasar atau metilen biru.

Bahan

- Kaca ungu.

- Nigrosine atau tinta India.

- Lembar slide.

- Mikroskop.

Prosedur

- Kembangkan mikroorganisme dalam media budaya.

- Tempatkan setetes panen di ujung selling dan di sebelah setetes tinta India atau nigrosin, aduk dan ambil dengan ujung slide lain.

- Udara kering dan tidak memperbaiki api.

- Tutup dengan larutan kaca ungu per 1 menit, cuci dengan air suling tetapi sangat halus (jet lunak), keluar di luar ruangan.

- Amati mikroskop dengan tujuan perendaman. Cari ke arah ekstrem yang diperluas.

Penafsiran

Tubuh bakteri violet dan latar belakang gelap akan diamati. Kapsul, jika ada, tidak akan berwarna di sekitar bakteri.

Referensi

1. Covadonga A, Silóniz M, Serrano S. Teknik Mikrobiologi Dasar. Pengamatan bakteri. Kurangi (Biologi). Seri mikrobiologi. 2010; 3 (5): 15-38. D
2. López-Jácome L, Hernández-Durán M, Colín-Castro C, Ortega-Peña S, Cerón-González G, Franco-Cendejas R. Pewarnaan dasar di laboratorium mikrobiologi. Mediagrafik.org. 2014; 3 (1): 10-18. Tersedia di: Medigrafi.com
3. Gil m. Pewarnaan negatif: fondasi, teknik, kelebihan dan kekurangan. Hidup.com.
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Pan -American Editorial S.KE
5. Tankeshwar a. Stain kapsul: prinsip, prosedur dan hasil. 2019. Panduan Mikrobiologi Medis. Tersedia dalam: Microbeonline.com