Pewarnaan sederhana

Apa itu pewarnaan sederhana?

Itu Pewarnaan sederhana Ini adalah prosedur pewarnaan yang cepat dan sederhana di mana pewarna tunggal digunakan, jadi disebut sederhana. Ini terutama digunakan untuk menentukan morfologi dan organisasi sel yang ada dalam sampel.

Secara alami, sel -sel tidak memiliki warna, jadi perlu membuatnya terlihat dalam beberapa cara ketika mereka diamati dalam mikroskop.

Penting untuk menyoroti bahwa pewarna yang digunakan dalam pewarnaan sederhana harus mendasar dengan beban positif (kationik), sehingga mereka dapat secara spontan bergabung dengan sitoplasma dinding dan sel.

Struktur sel ini bermuatan negatif. Oleh karena itu, pewarna, bermuatan positif, tertarik pada sel dan bergabung dengan mereka secara spontan. Dengan demikian, semua sel yang ada dalam sampel dengan cepat berwarna.

Warna mewarnai dalam pewarnaan sederhana

Ada beberapa pewarna dasar yang dapat digunakan di laboratorium mikrobiologi. Yang paling banyak digunakan adalah:

• Methylene Blue.
• Crystal Violet.
• Malachite Green.
• Fuchsin dasar.

Semua pewarna ini bekerja dengan baik pada bakteri karena mereka memiliki ion warna (kromofor) dengan beban positif (kationik).

Waktu pewarnaan untuk sebagian besar pewarna relatif singkat. Secara umum, mereka berkisar dari 30 detik hingga 2 menit, tergantung pada afinitas pewarna.

Penting untuk diingat bahwa sebelum mewarnai sampel dengan pewarnaan sederhana, itu harus diperpanjang dan dipasang pada lembaran kaca (geser). Sampel yang diperluas dan tetap disebut smear.

Prosedur

Langkah 1

Tempatkan slide di rak pewarnaan dan oleskan pewarna yang diinginkan. Tinggalkan tindakan waktu yang sesuai.

Biasanya, pewarnaan sederhana membutuhkan beberapa detik atau beberapa menit, tergantung pada warna mewarnai.

Pengamatan

Pada langkah ini penting untuk tidak melebihi waktu yang disarankan untuk pewarna yang digunakan, karena kristal dapat dibentuk dalam lembaran, menghasilkan apa yang dikenal sebagai "artefak", yang mendistorsi morfologi sel.

Langkah 2

Cuci dengan hati -hati noda slide dengan air suling dari botol, atau dengan air keran yang mengalir perlahan, sampai limpasan menjadi transparan. Secara umum, ini membutuhkan 5 hingga 10 detik.

Pengamatan

Jangan oleskan arus air secara langsung pada bau, untuk mencegah kekuatan kerusakan yang sama.

Jika tidak ada air suling, air keran dapat digunakan tanpa masalah, karena tidak akan mempengaruhi hasil pewarnaan.

Langkah 3

Keringkan slide dengan handuk kertas penyerap di satu sisi dan tanpa menggosok. Pastikan bagian bawah slide bersih.

Langkah 4

Amati noda yang diwarnai di mikroskop. Mulailah dengan tujuan terjauh untuk menemukan area yang ingin Anda amati secara lebih rinci. Ubah target untuk lebih dekat dan lebih ke sampel.

Pengamatan

Untuk penggunaan tujuan dengan peningkatan terbesar (biasanya 100x) oli perendaman harus digunakan, karena ini membantu cahaya untuk menembus lebih baik dan gambar terlihat lebih jernih. Tidak perlu menggunakan penutup.

Langkah 5

Akhirnya, buang semua sampel dalam wadah yang sesuai yang sebagaimana mestinya sebagai "risiko biologis".

Aplikasi

• Pengamatan morfologi sel.
• Pengamatan sampel di laboratorium kimia, untuk menentukan keberadaan bakteri, virus, dll.
• Identifikasi agen menular dan mendiagnosis dengan benar.
• Sebagai alat yang sangat diperlukan dalam mikrobiologi.
• Untuk mengetahui apakah bakteri memiliki kapsul atau tidak, dan tahu jenis apa.

Referensi

1. Aplikasi Mikrobiologis: Manual Laboratorium dalam Mikrobiologi Umum. Perusahaan McGraw-Hill.
2. Harisha, s. Pengantar Bioteknologi Praktis. Firewall Media.