Agar cokelat

Bakteri Yersinia Pestis pada Plak Agar Cokelat. Sumber: Departemen Kesehatan dan Layanan Kemanusiaan, Wikimedia Commons

Apa itu agar cokelat?

Dia Agar cokelat Ini adalah sarana budaya yang solid, diperkaya, tidak selektif dan tidak berbeda. Ini digunakan terutama untuk isolasi menuntut mikroorganisme dari sudut pandang nutrisi, meskipun semua jenis bakteri dapat tumbuh di dalamnya.

Itulah sebabnya utilitasnya meningkat terutama dalam sampel sampel yang biasanya steril, seperti CSF dan cairan sendi. Meskipun juga termasuk dalam media yang dipilih untuk menanam sampel polimikroba, tetapi dalam kasus ini perlu untuk menambahkan antibiotik yang menghambat flora bersamaan.

Media ini memiliki warna coklat yang sangat mirip dengan cokelat, karenanya namanya. Persiapannya sangat mirip dengan agar -agar darah, hanya dalam hal ini darah harus dipanaskan sehingga sel darah merah pecah.

Persiapannya, seperti agar darah, sangat halus, karena mudah terkontaminasi. Oleh karena itu, banyak laboratorium lebih suka memperoleh media ini yang sudah disiapkan oleh rumah komersial yang menjamin kualitasnya.

Dasar

Ini terdiri dari nutrisi -alas agar yang lebih kaya dan darah yang dipanaskan. Hemolisis sel darah merah memberikan faktor medium X (hemina) dan faktor V (NAD), diperlukan untuk pertumbuhan beberapa mikroorganisme, seperti jenis kelamin Haemophilus. Ini juga sangat berguna untuk diisolasi Neisserias sp.

Seperti agar darah, media yang berbeda dapat digunakan sebagai agen dasar, tergantung pada kebutuhannya. Di antara media yang digunakan adalah infus jantung cerebro dan kedelai naksir, meskipun yang paling direkomendasikan adalah agar Columbia, Müeller Hinton, GC Agar dan Thayer Martin Agar.

Dapat melayani Anda: difusi sederhana: proses dan contoh

Beberapa varian agar cokelat termasuk suplemen yang diperkaya, tersedia secara komersial, disebut isovalex atau polyvitex.

Suplemen ini mengandung vitamin B₁₂, L-glutamin, adenin, asam guanin hidroklorida, asam p-aminobenzoat, nikotinamide adenine dinucleotide (NAD), tiamin pirofosfat, ferrik nitrat, tiamin hidrokorida, sistein hidroklorida, L-Cistine dan glukosa, sistein hydrochloride, L-CISTINE dan Glucose.

Penting untuk menyoroti bahwa agar cokelat lebih diperkaya daripada agar darah, tetapi tidak memungkinkan pola hemolisis.

Aplikasi

• Agar cokelat dengan agar Columbia: Mengandung kasein dan jantung pankreas, peptik daging yang dicerna, natrium klorida, agar, ekstrak ragi dan pati jagung. Selain itu, kaya akan vitamin, mineral dan asam amino esensial. Basis ini dengan darah yang dipanaskan sangat ideal untuk mengisolasi bakteri genre Neisseria. Di sisi lain, jika suplemen ditambahkan ke Brucella, Mikroorganisme yang disebutkan di atas dapat diisolasi. Hasilnya ditingkatkan menggunakan darah kuda.
• Agar cokelat dengan agar dasar GC (untuk gonococci): Mengandung pepton, pati jagung, buffer monobasic dan dibasic, natrium klorida dan agar dan agar. Sebagian besar presentasi output cokelat yang disiapkan secara komersial dilengkapi dengan basis ini dan tidak mengandung darah yang dipanaskan, tetapi campuran sintetis hemina dan suplemen kimia faktor pertumbuhan, vitamin, mineral, asam amino, faktor V dan glukosa.
• Agar cokelat disiapkan dengan müeller hinton agar: Ini digunakan untuk melakukan uji kerentanan antimikroba yang menuntut mikroorganisme, seperti Streptococcus pneumoniae, Menggunakan 5% dari darah ram yang dipanaskan. Itu juga berfungsi untuk isolasi utama Neisseries Dan Haemophilus, tetapi dalam kasus khusus isolasi Haemophilus Penggunaan darah kuda lebih disukai, karena kaya akan faktor X dan V. Di sisi lain, jika sampel yang akan ditanam berasal dari area non -steril, penambahan antibiotik direkomendasikan untuk menghambat flora normal daerah tersebut. Contoh: Untuk sampel pernapasan di mana keberadaan bakteri gender dicurigai Haemophilus Bacitracin digunakan untuk menghambat pertumbuhan Staphylococcus, Micrococcus, Streptococcus Dan Neisseries Saprofit. 
• Agar cokelat dengan agar Martin Thayer: Itu istimewa untuk diisolasi Neisseria Gonorrhoeae. Itu harus mengandung antibiotik untuk menghambat flora yang menyertainya. Darah domba digunakan.

Itu dapat melayani Anda: flora dan fauna zacatecas: spesies yang lebih representatif

Persiapan

Indikasi untuk persiapan agar dasar yang akan digunakan harus dilihat. Secara umum, mereka menggambarkan seberapa besar Anda harus menimbang untuk menyiapkan satu liter media budaya. Di laboratorium Anda dapat menyiapkan jumlah yang diperlukan, yang bisa lebih atau kurang dari satu liter.

Perhitungan

Aturan tiga dibuat untuk menghitung berapa berat Anda untuk mempersiapkan volume yang diinginkan. Contoh:

Jika untuk 1 liter perlu menimbang 40 gr dan laboratorium membutuhkan 800 ml, dikatakan:

1000 ml -40 gr

800 ml - x

Rumusnya akan sebagai berikut:

X = 32 gr (kuantitas meskipun 800 ml).

Menimbang dan larut

Jumlah yang diperlukan ditimbang dan ditempatkan di felola dengan air.

Panaskan di atas api sedang dan dicampur dengan lembut dengan gerakan putar sampai media dehidrasi benar -benar larut, membiarkannya mendidih selama 1 menit.

Mensterilkan

Fixola dimasukkan ke dalam autoklaf untuk mensterilkan medium pada 121 ° C selama 20 menit.

Agregat darah

Saat meninggalkan autoklaf, dibiarkan berdiri sampai suhu medium kira -kira antara 56 dan 70 ° C untuk menempatkan darah dan bercampur sampai medium berubah warna coklat.

Jika suplemen akan ditambahkan, inilah saatnya untuk melakukannya. Selanjutnya, campur dan sajikan 20 ml untuk setiap pelat petri steril.

Seluruh prosedur harus dilakukan dalam lonceng aliran laminar atau di sekitar Bunsen Lighter. Diamkan sampai mereka mengeras dan simpan dengan cara terbalik di lemari es.

Cara lain untuk menyiapkan agar cokelat tanpa menggunakan darah

Media dasar disiapkan seperti dijelaskan di atas, hemoglobin dehidrasi yang diperoleh secara komersial dan disterilkan dalam autoklaf dilarutkan dalam autoklaf.

Dapat melayani Anda: hemoolinfa

Kedua solusi dibiarkan dingin pada suhu 50 ° C, suplemen bergabung dan ditambahkan. Campur dalam kondisi aseptik dan kemudian sajikan dalam piring steril petri.

Qa

Adalah penting bahwa darah ditempatkan pada suhu yang ditunjukkan, karena itu adalah ideal untuk melisar sel darah merah dan pada saat yang sama mempertahankan faktor V, yang dapat termensif.

Mereka tidak boleh gelembung di permukaan agar. Dari setiap batch 100 pelat satu atau dua pelat harus diinkubasi di kompor pada suhu 37 ° C selama 24 jam untuk memeriksa sterilitasnya.

Untuk hasil yang lebih baik, agar cokelat harus digunakan segera setelah persiapannya.

Kontrol strain bakteri harus diambil di laboratorium untuk mengevaluasi efektivitas lingkungan yang baru disiapkan untuk pertumbuhan mikroorganisme yang menuntut utama yang penting klinis.

Referensi

1. Garcia, hlm., Dinding, f., Fernández del Barrio, M. Mikrobiologi klinis praktis. Universitas Cadiz. Layanan Publikasi UCA.
2. Agar cokelat. Diterima dari.Wikipedia.org.