Memegang apa itu, fondasi, persiapan, penggunaan
- 2012
- 556
- Ray Thiel
Dia AGAR ENDO atau endo sedang adalah kultur diferensial yang solid dan dengan tingkat selektivitas tertentu. Formula asli dibuat oleh Endo pada tahun 1904 untuk membedakan bakteri fermentasi dari laktosa non -fermentasi. Awal Salmonella typhi, Tapi kemudian tujuan medium beralih ke pencarian coliform.
Awal dari agar endo tetap ada, tetapi formulasinya telah mengalami perubahan yang tak terhitung banyaknya selama bertahun -tahun. Saat ini, media ini terdiri dari peptik jaringan hewani, laktosa, pupuk hidrogen, natrium sulfit, fuchsin dasar dan agar dan agar dan agar dan agar.
Penggunaan utama media telah dikaitkan dengan isolasi dan diferensiasi basil gram negatif milik keluarga Enterobacteriaceae dan keluarga terdekat lainnya.
Untuk waktu yang lama digunakan dalam mendeteksi coliform dalam sampel air, susu dan makanan, tetapi hari ini penggunaan media ini telah digantikan oleh orang lain dari fungsi yang sama. Namun, beberapa laboratorium mikrobiologi menggunakan agar ini untuk isolasi dari sampel klinis.
Dasar
Agar endo mengandung pepton yang berfungsi sebagai sumber asam amino, nitrogen, karbon dan energi, yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroorganisme yang sedikit menuntut.
Di sisi lain, karakter agar yang sedikit selektif disediakan oleh agregat natrium sulfit dan fuchsin dasar; Kedua komponen sebagian atau sepenuhnya menghambat perkembangan sebagian besar bakteri gram positif.
Karakter diferensial diberikan dengan adanya karbohidrat yang dapat difermentasi, yang dalam hal ini adalah laktosa dan fuchsin dasar, yang juga berfungsi sebagai indikator pH.
Dapat melayani Anda: taktismeBakteri negatif gram yang tumbuh dalam agar ini dan mampu memfermentasi laktosa akan membentuk koloni merah muda yang kuat; menjadi patognomonik Escherichia coli Pembentukan koloni merah gelap dengan kilau logam kehijauan. Ini karena produksi asam tinggi dari fermentasi karbohidrat.
Perlu dicatat bahwa media yang ditemukan di sekitar koloni juga mengubah warna merah muda yang kuat. Sedangkan gram negatif basil negatif laktosa bentuk laktosa pucat mirip dengan medium atau tidak berwarna.
Hidrogen dopotassium fosfat menyeimbangkan pH medium dan agar adalah komponen yang memberikan konsistensi padat.
Persiapan
AGAR ENDO
Beratnya 41,5 gr dari media dehidrasi dan larut dalam 1 liter air suling. Panaskan aduk campuran sesering mungkin sampai ada total pembubaran sedang. Sterilisasi dalam autoklaf pada 121 ° C, tekanan 15 lb, selama 15 menit.
Saat lepas dari autoklaf, biarkan dingin hingga suhu perkiraan 45-50 ° C, kocok campuran untuk dihomogenisasi sebelum disajikan. Tuang 20 ml dalam piring steril petri.
Biarkan menguatkan piring, berinvestasi dan simpan dalam plak atau bungkus dengan kertas gelap sebelum disimpan di lemari es. Sangat penting untuk melindungi lingkungan yang disiapkan dari cahaya langsung. Praktik yang disarankan adalah mempersiapkan jumlah pasti yang dibutuhkan.
Jika disimpan di lemari es, pelat harus dibiarkan berkurang sebelum menggunakan.
PH medium harus antara 7,2 hingga 7,6 dan warna medium yang disiapkan adalah warna merah muda pucat.
Agen m-endo
Ada versi lain dari endo agar (m-endo) yang mengikuti formula McCarthy, Delaney dan Grasso, yang berisi lebih banyak senyawa dan bervariasi dalam bentuk persiapan.
Itu dapat melayani Anda: zygote: klasifikasi, pelatihan, pengembangan dan segmentasiVarian ini mengandung: laktosa, triptose, enzimatik kasein yang dicerna, enzim jaringan hewani, natrium klorida, kalium fosfat dibásic, natrium sulfit, ekstrak ragi, kalium monobasik fosfat, fuchsin dasar, tata letak natrium, sodium laurat sulfat dan agarin laurat sulfat dan agarin laurat sulfat laurat dan agarsin laurat, laurat sulfat dan agar laurat laurat,.
Dalam hal ini, 51 gr dari media dehidrasi menimbang dan ditangguhkan dalam 1 liter air suling yang mengandung 20 mL etanol.
Panaskan sedikit sambil mengaduk untuk melarutkan medium sepenuhnya. Seharusnya tidak terlalu panas dan sterilisasi dalam autoklaf. Setelah campuran homogen, sajikan dalam piring steril petri dan biarkan menguatkan.
Menggunakan
Di beberapa negara masih digunakan untuk menghitung total dan coliform tinja dalam sampel air dan makanan, terutama keberadaan Escherichia coli Sebagai indikator utama kontaminasi tinja.
Agar M-Endo direkomendasikan oleh American Public Health Association (APHA) untuk pemantauan dan pengendalian program desinfeksi dan pengolahan air limbah, serta dalam evaluasi kualitas air minum.
Metode yang paling banyak digunakan adalah filtrasi membran, pengayaan sampel sebelumnya dengan kaldu lauryl sulfat selama 2 hingga 4 jam.
Ini juga dapat digunakan sebagai pengganti agar EMB dalam analisis mikrobiologis makanan dan air dengan teknik angka yang paling mungkin (NMP), khususnya dalam fase konfirmasi lengkap untuk menguatkan keberadaan keberadaan DAN. coli dari kaldu EC yang suram.
Qa
Untuk mengevaluasi kualitas lot akhir persiapan, kontrol yang diketahui atau disertifikasi ditaburkan.
Di antara strain yang dapat digunakan untuk tujuan ini adalah: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 11775, Sewer Enterobacter ATCC 13047, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Flexneri ATCC 12022, Proteus mirabilis ATCC 14153 dan Enterococcus faecalis ATCC 11700.
Itu dapat melayani Anda: flora dan fauna di wilayah Andean: spesies perwakilanStrain ditaburkan karena kelelahan dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.
Hasil yang diharapkan adalah:
- Untuk Escherichia coli: Koloni merah yang kuat, dengan kilau logam.
- Untuk DAN. Cloacae Dan K. pneumoniae Koloni harus menjadi mukoid merah muda.
- Dalam kasus S. Typhimurium, s. Flexneri dan p. Mirabilis Koloni biasanya pucat pucat atau tidak berwarna.
- Akhirnya, DAN. Faecalis Diharapkan sebagian terhambat, oleh karena itu pertumbuhannya harus buruk dengan koloni merah muda yang sangat kecil.
Batasan
-Media endo memiliki kekuatan selektif, oleh karena itu, ia dapat menumbuhkan beberapa mikroorganisme positif gram seperti staphylococcus, enterococcus dan bahkan ragi.
-Basil lain yang bukan milik keluarga Enterobacteriaceae dapat berkembang di media ini, seperti Pseudomonas sp Dan Aeromonas sp. Karakteristik strain ini adalah koloni tidak teratur yang tidak berwarna.
-Media yang disiapkan ini sangat sensitif terhadap cahaya, oleh karena itu, paparan yang berkepanjangan terhadap penurunan sistem indikator ini, merusak lingkungan ini.
-Komponen medium dianggap karsinogenik, jadi kontak langsung harus dihindari.
-Media Dehidrasi sangat higroskopis dan harus dipelihara dalam wadah aslinya pada suhu kamar, ditutup dengan baik dan di lingkungan yang kering.
Referensi
- Laboratorium BD. AGAR ENDO. Tersedia di: BD.com
- Laboratorium Neogen. Saya agar. Tersedia di: Foodsafety.Neogen.com
- « Kaldu tetrasional apa itu, fondasi, persiapan, penggunaan
- Karakteristik Anabaena, Habitat, Reproduksi, Nutrisi »