Hektoen Foundation, Persiapan dan Penggunaan

Dia Haktoen Agar o Agar hektoen enterik adalah media kultur yang solid, selektif dan diferensial. Itu dibuat di Hektoen Institute oleh King dan Metzger untuk isolasi bakteri enteropatogenik genre Shigella dan Salmonella.

Media ini terdiri dari protein pepton, ekstrak ragi, garam empedu, laktosa, sukrosa, salisin, natrium tiosulfat, natrium klorida, besi sitrat, amonium sitrat, biru bromool, asam fuchsin dan agar dan agar -agar dan agar -agar dan agar -agar dan agar asam dan agar asam dan agar -agar dan agar asam dan agar -agar dan agar asam dan agar -agar, asam dan agar -agar, asam dan agar -agar, asam fuchsin dan agar -agar, asam fuchsin dan agar -agar, asam. Formulasi ini memungkinkan untuk membedakan genre shigella dan salmonella dari sisa bakteri yang mampu tumbuh di media ini.

KE. Hektoen virgen b ague b. Haktoen Agar ditaburkan. Sumber: Flickr.com/pengunggah aslinya adalah Philippinjl di Wikipedia Prancis. [CC BY-SA 2.0 fr (https: // createveCommons.Org/lisensi/by-sa/2.0/fr/akta.di dalam)]

Meskipun ada media lain dengan fungsi yang sama dengan Hektoen Agar, ini memiliki keuntungan yang lebih besar dibandingkan dengan media lain, terutama ketika mereka ingin memulihkan spesies Shigella.

Spesies kedua genera menghasilkan masalah gastrointestinal yang parah pada manusia karena konsumsi makanan yang terkontaminasi; Oleh karena itu transmisi adalah tinja - lisan. Itulah sebabnya penggunaan agar hektoen terutama ditunjukkan dalam analisis mikrobiologis tinja dan sampel makanan.

[TOC]

Dasar

Hektoen Agar mengandung pepton dan ekstrak ragi sebagai sumber nutrisi, memberikan elemen penting untuk pengembangan mikroba.

Namun, itu juga memiliki garam empedu yang bertindak menghambat pertumbuhan beberapa bakteri, terutama gram positif dan beberapa gram negatif. Karena alasan inilah ia dianggap sebagai media selektif.

Di sisi lain, agar Hektoen adalah media diferensial. Properti ini diberikan oleh adanya karbohidrat yang dapat difermentasi seperti laktosa, menggambar dan salisin, di sebelah sistem indikator pH, diwakili oleh bromotitimol biru dan asam fuchsin.

Dapat melayani Anda: Sismonetia

Semua bakteri yang mampu tumbuh dalam media ini yang bukan milik genus Salmonella dan Shigella akan mengembangkan koloni salmon atau oranye kecuali untuk genus Proteus. Hal ini disebabkan oleh fermentasi satu atau lebih karbohidrat yang hadir, yang mengasamkan media, yang membuat indikator pH berputar.

Di sisi lain, genus Shigella dan Salmonella tidak dapat memfermentasi salah satu karbohidrat yang ada, hanya menggunakan pepton sebagai sumber energi, yang membuat alkali media dan karenanya koloni mereka berwarna biru hijau biru.

Juga dalam media ini, bakteri yang mampu membentuk hidrogen sulfida (gas tidak berwarna) dapat dibedakan dalam media ini. Natrium tiosulfat bertindak sebagai sumber sulfida sedangkan besi sitrat adalah agen pengungkap. Kedua senyawa memungkinkan pembentukan endapan hitam dari besi sulfida yang menunjukkan reaksi.

Endapan hitam di tengah koloni dengan lingkaran cahaya transparan memberikan penampilan mata ikan. Fitur ini menunjukkan keberadaan genre Salmonella.

Akhirnya, natrium klorida mempertahankan keseimbangan osmotik dan agar memberikan konsistensi yang kuat terhadap lingkungan.

Persiapan

Beratnya 76 gr dari media dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Perhatikan campuran dan kemudian beristirahat selama 10 hingga 15 menit. Itu bisa dipanaskan dan didih. Media ini tidak disterilkan dalam autoclave.

Ketika media mencapai suhu perkiraan 45 ° C volume 20 mL dalam pelat steril petri secara langsung dituangkan.

Dapat melayani Anda: dinamika populasi

Agar dipadatkan. Pada saat itu mereka sudah siap digunakan. Disarankan untuk segera menggunakannya. Jika tidak mungkin mereka disimpan di lemari es sampai penggunaannya.

Pelat harus dihilangkan terlebih dahulu dari lemari es sebelum menaburnya untuk mengambil suhu sekitar.

PH medium harus 7,5 ± 0,2. Warna medium dehidrasi berwarna ungu dan warna yang disiapkan berwarna hijau coklat.

Menggunakan

Penggunaan agar Hektoen direkomendasikan untuk pencarian bakteri genus Shigella dan Salmonella dalam sampel makanan dan makanan.

Kemungkinan mengisolasi bakteri ini sangat meningkat jika sampel dalam kaldu khusus sebelumnya diperkaya.

Inokulum harus kuat dan penanaman dilakukan dengan Strression. Pelat diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 hingga 48 jam dalam aerobiosis.

Inkubasi selama 48 jam direkomendasikan karena karakteristik koloni lebih jelas untuk interpretasi dan diferensiasi saat ini.

Qa

Untuk melakukan kontrol kualitas untuk media ini, strain bakteri bersertifikat digunakan, seperti: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Shigella Flexneri ATCC 12022 dan Shigella Sonnei ATCC 25931.

Hasil yang diharapkan adalah sebagai berikut: Salmonella typhimurium dan  Salmonella Enteritidis Mereka harus mengembangkan koloni hijau - kebiruan dengan atau tanpa pusat hitam. Sementara spesies Shigella akan tumbuh sebagai koloni hijau - kebiruan.

Anda juga dapat menyertakan strain Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 dan Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Dapat melayani Anda: kaldu lactosado

Dalam kasus ini karakteristik yang diamati adalah sebagai berikut: DAN. coli Dan K. pneumoniae Mereka akan berkembang di koloni medium ini warna salmon hingga oranye, dengan endapan dengan warna yang sama di sekitar. Sedangkan Proteus akan mengembangkan koloni biru-hijau dengan atau tanpa pusat hitam.

Ketika S. Aureus Dan  DAN. Faecalis Mereka harus dihambat, terkadang DAN. Faecalis berhasil tumbuh sebagai koloni kuning dan sangat kecil.

Di sisi lain, karena media ini tidak disterilkan dalam autoklaf, penting untuk mengevaluasi sterilitas media. Oleh karena itu, dari setiap lot yang disiapkan mereka harus diinkubasi dari satu menjadi dua pelat tanpa menginokulasi 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.

Jelas diharapkan tidak ada pertumbuhan di piring.

Batasan

-Spesies Proteus dapat berkembang dalam media ini dan karakteristik koloni mereka dapat dikacaukan dengan spesies Salmonella atau Shigella. Untuk alasan ini setiap koloni yang mencurigakan harus dikonfirmasi dengan tes biokimia.

-Perlu untuk menyertai penggunaan media ini dengan usia yang kurang selektif lainnya, karena jika mikroorganisme yang dicari dalam konsentrasi rendah, ia tidak dapat berkembang dalam media ini.

-Jangan terlalu panas selama persiapannya, karena panas yang berlebihan mengubah komposisi lingkungan.

-Koloni luar biasa dari fermentasi laktosa Salmonella dapat muncul yang bisa tidak diketahui.

Referensi

1. Kontributor Wikipedia. HEKTOEN Enterric Agar. Wikipedia, ensiklopedia gratis. 13 Maret 2019, 23:38 UTC. TERSEDIA DI: .Wikipedia.Org/ diakses 16 Maret 2019.
2. Laboratorium BD. BD HEKTOEN Enterric Gang (dia gank). 2013. Tersedia di: BD.com
3. Laboratorium Britania. Hektoen Entérico Agar. 2015. Tersedia di: Britanialab.com
4. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Haktoen Agar. Tersedia di: F-Soria.adalah
5. Manual DIFCO & BBL, HEKTOEN Enterric Agar. Edisi ke -2. Tersedia di: BD.com/Eropa