Peptonada Foundation, Persiapan dan Penggunaan

Dia Air Peptonada Ini adalah sarana pengayaan cairan, bukan selektif, terutama digunakan sebagai pengencer sampel makanan atau bahan lainnya. Ini berarti dari sudut pandang kimia sangat sederhana, mengandung pepton daging, natrium klorida dan air.

Ini memiliki beberapa nilai gizi, memungkinkan memperkaya sampel. Jika ada bakteri babak belur, media ini memiliki daya untuk memperbaiki kelayakan. Ini sangat berguna dalam pemulihan bakteri milik keluarga Enterobacteriaceae.

Air Peptonada dalam toples. Sumber: MSC. Marielsa Gil

Dalam kasus pemulihan Salmonellas, penggunaan varian air Peptonada buffered direkomendasikan; Ini berfungsi sebagai sarana pra-pengayaan sampel, dalam hal ini mengandung unsur-unsur lain seperti disótic fosfat dan dipotassium fosfat.

Biasanya air peptonada menyiapkan pH netral, namun ada varian lain di mana pH perlu menjadi 8,5 ± 0,2 (alkali), karena bakteri yang dimaksudkan untuk diisolasi adalah alkalofil Vibrio cholerae.

Di sisi lain, media ini dapat digunakan sebagai media dasar untuk tes fermentasi karbohidrat.

[TOC]

Dasar

Peptonas memberikan nutrisi yang diperlukan untuk perkembangan bakteri, terutama nitrogen dan asam amino rantai pendek, sedangkan natrium klorida mempertahankan keseimbangan osmotik.

Selain itu, media memungkinkan untuk membubarkan, menghomogenisasi dan memperbaiki sel bakteri yang telah rusak dengan diserahkan ke proses industri.

Karena pengencer sangat ideal, secara efektif mengganti larutan fisiologis (SSF) atau larutan redaman fosfat (PBS).

Pertumbuhan bakteri menjadi jelas dengan pengamatan kekeruhan yang sama.

Persiapan

Persiapan buatan sendiri (non -komersial)

Beratnya 1 gr pepton dan 8,5 gr natrium klorida, larut dalam 1 liter air suling. PH harus disesuaikan dengan 7.0. Untuk ini Anda dapat menggunakan natrium klorida 1 n.

Dapat melayani Anda: tanaman sementara

Persiapan Menggunakan Media Komersial

Berat 15 gr dari media dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Homogenisasi campuran. Jika perlu, campuran direbus selama 1 menit untuk membantu larutan total. Sajikan dalam guci 100 mL atau tabung 10 mL seperlunya. Autoclavar pada 121 ° C selama 15 menit.

Keren dan gunakan di lemari es. PH akhir medium adalah 7,2 ± 0,2.

Warna medium dehidrasi ringan dan disiapkan krem ​​jernih kuning.

Persiapan untuk tes fermentasi

Untuk persiapan sebelumnya - setelah sterilisasi - karbohidrat harus ditambahkan ke konsentrasi 1%akhir, ditambah indikator andrade (asam fuchsin) atau fenol merah (0.018 g/l). Tabung harus ditempatkan lonceng Durham untuk pengamatan pembentukan gas.

Varian Air Peptonada Lainnya

-Air Peptonada Buffered

Ini mengandung casein enzimatik terhidrolisis, natrium klorida, fosfat dihidrogenik kalium dan hidrogen natrium dodecahidrat natrium fosfat. PH akhir adalah 7,0 ± 0,2.

Untuk mempersiapkan, beratnya 20 gr dari medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air suling. Tinggalkan selama sekitar 5 menit. Panaskan 1 menit sampai benar -benar larut.

Tuangkan guci yang memadai sesuai kebutuhan. Sterilisasi menggunakan autoclave pada 121 ° C selama 15 menit.

-Air Alkali Peptonada

Berat 25 gr dari media dehidrasi dan larut dalam 1 liter air. Lanjutkan seperti yang dijelaskan di atas. PH berkisar dari 8.3 hingga 8.7.

Menggunakan

Inokulum dilakukan dengan menempatkan sampel secara langsung.

Itu digunakan untuk mencairkan sampel, terutama ketika diduga ada bakteri yang rusak. Secara umum, pengenceran adalah 1:10 dan 1: 100.

Dapat melayani Anda: mengapa jamur tidak menghasilkan makanan sendiri?

Diinkubasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada 35-37 ° C.

Sampel tinja

Untuk sampel tinja untuk mencari salmonella, penggunaan air buffered atau buffer direkomendasikan sebagai sarana pra-enrique.

Untuk melakukan ini, lanjutkan sebagai berikut:

Jika tinja dibentuk untuk mengambil 1 gr dari sampel. Jika cairan, ambil 1 ml tinja dan tunda dalam tabung dengan 10 ml air peptonada buffered. Dalam kasus penyeka dubur, unduh materi yang terkandung dalam swab dalam tabung dengan air buffer peptonada.

Dalam semua kasus, campur dan homogenisasi sampel dengan sangat baik.

Inkubasi pada suhu 37 ° C selama 18 hingga 24 jam. Selanjutnya sub-budaya dalam kaldu pengayaan sebagai kaldu selenito cystine atau kaldu tetrasionat pada suhu 37 ° C selama 18-24 jam lebih. Akhirnya tumbuh di media selektif untuk Salmonella, seperti agar SS, agar Xld, Hektoen Agar, antara lain.

Sampel makanan

Air Peptonada digunakan sebagai sarana pengayaan atau sebagai pengencer sederhana, tetapi jika spesies Salmonella dicari itu digunakan sebagai sarana pra-enrique, seperti yang sudah dijelaskan.

Dalam makanan, lanjutkan sebagai berikut:

Untuk makanan padat menyesali 25 gr dari sampel dan untuk makanan cair, ukur 25 mL yang sama. Tempatkan bagian ini dalam toples yang berisi 225 ml air peptonada. Campurkan dan homogenisasi sampel.

Jika dicurigai bahwa beban mikroba tinggi, pengenceran serial atau desimal dapat dilakukan untuk memfasilitasi jumlah koloni yang membentuk unit (UFC).

Jumlah pengenceran akan tergantung pada jenis sampel dan pengalaman analitik.

Jika sebaliknya dicurigai bahwa beban mikroba sangat rendah, tidak perlu melakukan pengenceran. Selanjutnya, subyektif di media selektif.

Dapat melayani Anda: katalase: karakteristik, struktur, fungsi, patologi

Dalam kasus makanan dari laut, seperti makanan laut, ikan, antara lain untuk mencari Vibrio cholerae Atau spesies Vibrio lainnya, air peptonada disesuaikan dengan pH 8,5 (air alkali peptonada) harus digunakan (alkali peptonada).

Qa

Dari masing -masing lot yang disiapkan, seseorang harus menginkubasi dua tabung tanpa diinokulasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C. Waktu sudah berakhir, kekeruhan atau perubahan warna tidak boleh diamati.

Kontrol yang diketahui juga dapat digunakan untuk mengevaluasi efektivitasnya:

Untuk ini Anda dapat menggunakan strain bakteri berikut: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella Enteritidis ATCC 13076.

Dalam semua kasus, perkembangan mikroba yang memuaskan diharapkan, yang diamati oleh kekeruhan lingkungan.

Batasan

-Media Dehidrasi sangat higroskopis, jadi harus dijauhkan dari kelembaban.

-Media tidak boleh digunakan jika jenis kerusakan apa pun yang diamati.

-Media kultur dehidrasi harus dijaga antara 10 - 35 ° C

-Media yang disiapkan harus disimpan didinginkan (2-8 ° C).

Referensi

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B dan Velázquez atau. Teknik untuk Analisis Mikrobiologis Makanan. 2009, edisi ke -2. Fakultas Kimia, Unam. Meksiko. Versi untuk Manual dan Dokumen Administrator (AMYD) dari Fakultas Kimia, UNAM 1. Tersedia di: http: // depa.Fquim.Unam.MX
2. Laboratorium Britania. Air Peptonada Buffered. 2015. Tersedia di: Britanialab.com
3. Laboratorium Neogen. Air Peptonada. Tersedia di: Foodsafety.Neogen.com
4. Laboratorium Britania. Air Peptonada. 2015. Tersedia di: Britanialab.com
5. Laboratorium Merck. Peptonada Buffered Water. Tersedia di: Merckmillipore.com
6. Laboratorium Conda Pronadisa. Air Alkali Peptonada. Tersedia di: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.