Badan Bismuth Sulfite, Persiapan dan Penggunaan

Dia Agar Bismuth Sulphite Ini adalah sarana kultur yang solid, selektif dan diferensial, yang diformulasikan secara khusus untuk isolasi Salmonella enterica subgrupo enterica typhi seretypo, Di antara spesies Salmonella lainnya. Lingkungan dikenal sebagai BSA yang setuju dalam agar Bismuth Sulfite Inggris.

Formula agar sulfit bismuth asli diciptakan pada tahun 1927 oleh Wilson dan Blair (medium besi glukosa bismuth sulphite); Ini mengandung natrium sulfit, glukosa, larutan bismut, amonium sitrat, ferrous sulfat dan agar-agar.

48 -Pertumbuhan inkubasi Salmonella SP dalam agar bismuth sulfit. Sumber: Pixnio.Com Penulis: DR. W. R. Erving, uscdcp

Saat ini ada modifikasi dari media asli, terdiri dari ekstrak daging, pepton daging dan kasein, indikator bismut sulfit, glukosa, disodium fosfat, ferro sulfat, hijau cerah dan agar-agar-agar.

There are many means for the isolation of Salmonella species, but when it comes to recovering the Typhi serotype, the bismuth sulphite agar presents a remarkable advantage over them, since in the majority a very low or zero recovery of this microorganism is obtained.

Namun, perlu untuk menggunakan lebih dari satu jenis media dalam hal mengisolasi enteropatogenik, karena agar bismuth sulfit kurang efektif untuk spesies Salmonella lainnya dan untuk genus Shigella, yang dihambat atau berkembang sangat buruk dalam agar ini.

Perlu dicatat bahwa dari semua spesies Salmonella, serotipe Typhi adalah salah satu enteropatogen terpenting dalam diri manusia, ini satu -satunya reservoirnya. Serovarietas ini menghasilkan demam tifoid, gastroenteritis, bakteriemia dan septikemia.

Karena alasan ini relevan untuk memasukkan agar ini ketika sampel air, tinja atau makanan dianalisis di mana kehadiran Anda diduga.

[TOC]

Dasar

Seperti kebanyakan media budidaya, agar -agar bismuth sulfit mengandung zat nutrisi untuk meningkatkan perkembangan bakteri, seperti pepton dan ekstrak daging. Demikian juga, glukosa berfungsi sebagai sumber energi dan karbon.

Dapat melayani Anda: elemen biogenetik

Sekarang, tidak semua bakteri akan tumbuh dalam media ini, karena agar bismuth sulphite adalah media selektif. Ini mengandung senyawa yang menghambat pertumbuhan mikroorganisme positif gram dan bakteri gram negatif tertentu. Senyawa ini adalah: indikator bismuth sulphite dan hijau cerah.

Di sisi lain, disodium fosfat mempertahankan osmolaritas dan pH medium.

Selain itu, agar bismuth sulphite adalah media diferensial berkat keberadaan ferrous sulfat, yang menunjukkan pembentukan h₂S.  H₂S yang dibentuk oleh bakteri bereaksi dengan ferrous sulfat dan membentuk endapan yang tidak dapat dipandang jelas.

Akhirnya, agar -agar memberikan konsistensi yang kuat terhadap lingkungan.

Persiapan

Beratnya 52,3 gr dari media dehidrasi dan larut dalam satu liter air. Panaskan untuk merebus campuran selama 1 menit dengan agitasi yang sering, sampai totalnya pembubarannya. Jangan terlalu panas. Media ini tidak disterilkan dalam autoklaf, karena panas yang ekstrem merusak media kultur.

Biarkan dingin pada suhu 45 ° C dan kocok sebelum disajikan di atas piring steril petri. Disarankan untuk membuat piring dengan ketebalan yang bagus. Untuk ini, 25 ml harus dituangkan ke dalam setiap piring. Biarkan menguatkan. Seperti cara yang tidak disterilkan, adalah normal untuk digunakan segera untuk disarankan.

Namun, sebuah studi oleh D'Aust pada tahun 1977, menunjukkan bahwa ada pemulihan yang lebih baik Salmonella typhimurium Dan Salmonella Enteritidis Seiring usia medium sulfit bismuth, kinerja serovari tidak terpengaruh Typhi Dan Parathyphi b.

D'Aous merekomendasikan untuk menggunakan pelat untuk hari ke -4 pendinginan, meskipun diperingatkan bahwa seiring bertambahnya usia, selektivitas berkurang, mengembangkan lebih mudah dari galur Proteus vulgaris.

Itulah sebabnya, untuk sampel yang sangat tercemar, seperti tinja, lebih baik menggunakan media yang baru disiapkan. Jika tidak digunakan untuk hari ke -4 persiapannya. Penulis lain merekomendasikan menggunakan pelat sehari setelah persiapan mereka, disimpan dalam pendinginan.

Dapat melayani Anda: urasil: struktur, fungsi, sifat, sintesis

Pelat yang didinginkan harus diminum sebelum menggunakan. PH medium harus 7,5 ± 0,2. Warna media yang belum dibayar adalah krem ​​dan disiapkan adalah opalescente kelabu kehijauan.

Aplikasi

Di antara sampel yang dapat ditaburkan di media ini adalah sampel tinja, perairan konsumsi atau makanan dan makanan.

Untuk meningkatkan isolat, direkomendasikan untuk melakukan pengobatan pra-pengayaan dengan kaldu laktosa dan setelah pengayaan dengan kaldu tetrasional atau kaldu selenito sistin, sebelum menabur pada agar sulfit bismuth sulphite.

Pelat diinkubasi pada suhu 35 ± 0,2 selama 24 hingga 48 jam, dalam aerobiosis.

Karakteristik Koloni dalam Agar Bismuth Sulphite

Koloni Salmonella typhi Mereka biasanya terlihat dalam agar ini dalam 24 jam dengan pusat hitam dan dikelilingi oleh lingkaran hijau cerah. Sementara, dalam 48 jam Black berubah sepenuhnya karena pembentukan hidrogen sulfida.

Salmonella Parathyphi a menyajikan koloni dengan karakteristik variabel. Setelah 18 jam inkubasi, koloni hitam, hijau atau transparan dapat diamati, dengan penampilan mukoid. Sementara, pada 48 jam mereka diamati sepenuhnya hitam dan kadang -kadang dengan kecerahan logam yang nyata.

S. Parathyphi a Itu cenderung melanggar media di sekitar koloni.

Salmonella sp Hitam atau Grayercolonias Grounds, dengan atau tanpa logam terang, penebalan menjadi permukaan atau tidak.

Strain coliform, biasanya, benar -benar terhambat, tetapi jika mereka tumbuh, mereka berkembang sebagai koloni hijau atau coklat yang buram dan kecerahan logam. Jangan mewarnai media di sekitar koloni.

Keterbatasan

-Inokulum yang sangat lemah dapat menyebabkan koloni Salmonella typhi Hijau muda, tidak diperhatikan dan melaporkan budaya sebagai negatif.

Dapat melayani Anda: cabang fisiologi

- Agar Bismuth Sulphite dapat menghambat pemulihan beberapa spesies Salmonella seperti S. Sendai, s. Berta, s. Gallinarum, s. abortus-equi.

-Medium ini menghambat sebagian besar spesies genus Shigella.

- S. Typhi dan s. Arizonae Mereka dapat memberikan koloni yang sangat mirip.

-Coliform yang diproduksi oleh h₂S seperti Proteus dan Citrobacter menghasilkan koloni yang mirip dengan Salmonella, jadi perlu untuk melakukan tes identifikasi biokimia.

-Estria yang baik harus dilakukan untuk mendapatkan koloni yang terisolasi; Ini adalah satu -satunya cara untuk mengamati karakteristik khas koloni genus Salmonella.

Qa

Untuk kontrol sterilitas, sebuah plak diinkubasi tanpa diinokulasi pada suhu 37 ° C, diharapkan tidak ada pertumbuhan atau perubahan warna.

Untuk kontrol kualitas Anda dapat menabur strain yang dikenal seperti:

Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhi ATCC 19430, Shigella Flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Diharapkan itu Escherichia coli Dan Shigella Flexneri masing -masing dihambat masing -masing pengembangan koloni kehijauan dan coklat coklat. Sementara kedua salmonglar harus memiliki perkembangan yang sangat baik dengan koloni hitam dengan kecerahan logam, dan akhirnya Enterococcus faecalis Harus benar -benar terhambat.

Referensi

1. Wilson, w., & E. M. Mcv. Blair. Penggunaan medium besi sulphite bismuth glukosa untuk isolasi B. Tifosus Dan B. Proteus. Jurnal Kebersihan, 1927; 26(4), 374-391. Diterima dari .JSTOR.org
2. D'Aust JY. Pengaruh Kondisi Penyimpanan Kinerja Agar Bismuth Sulfite. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122-124. Tersedia di: NCBI.Nlm.Nih.Pemerintah
3. Laboratorium IVD. Agar Bismuth-Sulfite Menurut Wilson-Blair. 2009. Tersedia di: Bismuthsulfitagar_span_jan_2009%20 (2).Pdf
4. Laboratorium Himedia. Agar Bismuth Sulphite. 2017. Tersedia di: Himediabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.
6.  Morales R, dari La Cruz D, Leyva G dan Ybarra M. Kualitas bakteriologis susu kambing mentah yang diproduksi di Miravalles, puebla. Rev mex dari ing chem 2012; 11 (1): 45-54