Vogel-Johnson Agar Apa adanya, fondasi, persiapan, penggunaan

Dia Agar Vogel-Johnson Ini adalah sarana kultur yang solid, selektif dan diferensial, yang diformulasikan secara khusus untuk isolasi Staphylococcus aureus. Media ini diciptakan oleh Vogel dan Johnson pada tahun 1960 dari modifikasi agar telurito glycina diformulasikan pada tahun 1955 oleh Zebovitz, Evans dan Niven.

Modifikasi terdiri dari peningkatan konsentrasi manitol yang ada di lingkungan dan dalam penggabungan indikator pH. Formula saat ini terdiri dari tripteína, ekstrak ragi, manitol, dipotassium fosfat, lithium klorida, glisin, fenol merah, agar, 1% larutan telurit kalium telurit kalium.

Perlu dicatat bahwa ada media lain yang, seperti agar Vogel-Johnson selektif untuk isolasi S. Aureus, seperti Agar Mannitol Salty dan Baird Parker Agar. Dalam hal ini, dapat dikatakan bahwa fondasi Vogel - Johnson setuju adalah campuran antara agar mannitol asin dan agar Baird Parker.

Pada pertama koloni S. Aureus Mereka dibedakan dengan fermentol. Di sisi lain, di detik S. Aureus Ini ditandai dengan mengurangi teluro menjadi teluro dan membentuk koloni abu -abu menjadi hitam. Kedua properti diamati dalam agar Vogel-Johnson.

Media ini, seperti rekan -rekannya, berguna untuk mendeteksi Staphylococcus aureus Dalam sampel makanan, kontrol kesehatan produk industri dan dalam sampel klinis.

Dasar

Kontribusi Nutrisi

The Vogel - Johnson Media berisi ekstrak triptein dan ragi; Kedua zat menyediakan asam amino rantai panjang yang berfungsi sebagai sumber karbon dan nitrogen yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteri. Bakteri yang mampu tumbuh dalam media ini akan mengambil nutrisi zat ini.

Itu bisa melayani Anda: fauna dan flora laut Peru

Kekuatan selektif

Vogel - Johnson Agar mampu menghambat pertumbuhan bakteri negatif gram dan bahkan beberapa gram positif, mendukung perkembangan staphylococci koagulase positif. Zat inhibitor adalah kalium tellurite, lithium klorida dan glisin.

Kekuatan diferensial

Zat yang membuat media diferensial ini adalah Mannitol dan Kalium Tellurite. Manitol adalah karbohidrat, dan ketika asam fermentasi diproduksi yang membuat media dari merah ke kuning, yang terjadi berkat keberadaan indikator pH pH merah.

Sementara, telurit tidak berwarna saat direduksi menjadi teluro bebas logam, mengambil warna abu -abu gelap.

Dia Staphylococcus aureus fermentasi manitol dan mengurangi teluro menjadi teluro. Itulah sebabnya koloni khas S. Aureus Dalam media ini mereka berwarna abu -abu atau hitam dikelilingi oleh media kuning.

Bakteri yang tumbuh di media ini dan tidak mengurangi telurit atau memfermentasi manitol, akan membentuk koloni transparan yang dikelilingi oleh media merah, bahkan lebih intens daripada warna aslinya, karena alkalinisasi media dengan menggunakan peptones.

Di sisi lain, bakteri yang mengurangi telurit tetapi tidak difermentasi, manitol akan tumbuh sebagai koloni abu -abu atau hitam yang dikelilingi oleh media merah yang intens.

Jika media disiapkan tanpa penambahan Tellurite kalium, koloni S. Aureus Mereka akan berkembang sebagai koloni kuning, dikelilingi oleh media kuning, seperti yang terjadi dalam agar manitol asin.

Agen keseimbangan osmotik dan solidifier

Dipotassium fosfat mempertahankan keseimbangan osmotik medium dan menyesuaikan pH dengan netralitas 7.2. Sedangkan agar memberikan konsistensi yang kuat pada media kultur.

Itu bisa melayani Anda: flora dan fauna dari Mexico City

Persiapan

Solusi Telurit Kalium P/V 1%

Solusi ini tidak termasuk dalam lingkungan dehidrasi, karena tidak dapat disterilkan dalam autoklaf. Karena alasan ini disiapkan terpisah dan ditambahkan ke media yang sudah disterilkan.

Beberapa rumah komersial menjual larutan telurit kalium 1% siap digunakan. Jika Anda ingin mempersiapkan di laboratorium, lanjutkan sebagai berikut:

Beratnya 1.0 GR Kalium Tellurite dan Ukur 100 ml Air Distilasi. Larutkan kalium telurit di bagian air dan kemudian selesaikan jumlah air sampai mencapai 100 mL. Mensterilkan solusi dengan metode filtrasi.

Pangkalan Agar Vogel-Johnson

Berat 60 gr dari media dehidrasi, dan larut dalam 1 liter air suling. Campuran dipanaskan hingga mendidih untuk membantu larutan lengkap. Selama proses pembubaran, medium ini sering diaduk.

Sterilisasi dalam Autoclave 15 pon tekanan dan 121 ° C selama 15 menit. Hapus dari autoklaf dan diamkan sampai media mencapai suhu perkiraan 45 hingga 50 ° C. Tambahkan 20 mL larutan telurit kalium yang sebelumnya disiapkan pada 1%.

Campur dan tuang di atas piring steril petri. Biarkan memadat dan memesan di piring terbalik.

PH akhir dari media yang disiapkan harus pada 7,2 ± 0,2.

Sebelum menabur sampel, Anda harus menunggu pelat mengambil suhu lingkungan.

Warna media yang disiapkan berwarna merah.

Menggunakan

Meskipun dapat digunakan untuk isolasi S. Aureus Dalam semua jenis sampel, sebagian besar digunakan untuk analisis mikrobiologis produk farmasi, kosmetik dan makanan.

Itu dapat melayani Anda: sglt (protein transpor natrium-glukosa)

Disarankan agar inokulum padat. Penaburan dapat dilakukan dengan melesat dengan pegangan platinum atau dengan permukaan dengan spatula Drigalski.

Pelat diinkubasi pada 35-37 ° C selama 24 hingga 48 jam dalam aerobiosis.

Qa

Untuk melakukan kontrol kualitas ke lingkungan Vogel-Johnson, Anda dapat menggunakan kontrol strain berikut:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Hasil yang diharapkan adalah sebagai berikut: untuk galur S. Aureus Pertumbuhan yang memuaskan dengan koloni hitam dikelilingi oleh media kuning. Untuk S. Epidermidis Pertumbuhan reguler dengan koloni tembus pandang atau hitam dikelilingi oleh media merah.

Juga untuk DAN. coli Diharapkan akan ada penghambatan total, dan untuk Proteus mirabilis penghambatan parsial atau total; Jika tumbuh itu akan melakukannya hampir tidak dan koloni akan menjadi hitam dikelilingi oleh warna setengah merah.

Referensi

1. Laboratorium BD. VJ (Vogel dan Johnson Agar). Tersedia di: BD.com
2. Laboratorium Britania. Agar Vogel-Johnson. Tersedia di: Britanialab.com