Sim foundation, persiapan dan penggunaan

Dia Media sim Ini adalah agar semi -solid dan diferensial, dirancang khusus untuk membantu identifikasi beberapa bakteri, terutama dari keluarga Enterobacteriaceae. Ini terdiri dari triptein, pepton, besi sulfat, amonium sulfat, natrium tiosulfat dan agar.

Media ini memungkinkan pelaksanaan tiga tes penting: produksi hidrogen sulfida (h₂S), pembentukan indol dan motilitas, dari sana datang akronim sim. Karena utilitasnya yang luar biasa, ia tidak dapat hilang di laboratorium bakteriologi.

KE. Iklan Sim Tengah B. Sim h2s (-), indol (-) dan motilitas (+) dan sim h2s (+), indol (-), motilitas (+) tes tes. Sumber: a. Foto diambil oleh penulis MSC. Marielsa Gil b. Mfloayza [cc by-sa 3.0 (https: // createveCommons.Org/lisensi/by-sa/3.0)]

Tidak seperti media lain, ini harus semi -solid untuk mendeteksi kapasitas gerakan yang dimiliki beberapa bakteri. Dalam hal ini, tes ini bekerja dengan sangat baik untuk Enterobacteria, tetapi tidak pada basil negatif non -fermentaris, di mana metode lain lebih disukai untuk digunakan, seperti penurunan yang tertunda.

Media SIM memungkinkan untuk membedakan sifat spesifik tertentu yang menjadi ciri beberapa bakteri dalam kaitannya dengan yang lain. Misalnya Escherichia coli dibedakan dengan menjadi h₂S (-), indol (+) dan motilitas (+), sementara Proteus mirabilis itu h₂S (+), indol (-), motilitas (+).

[TOC]

Dasar

Ini adalah budaya berarti yang dianggap diferensial, karena penggunaannya berhasil membedakan antara mikroorganisme yang mampu menghasilkan hidrogen sulfida dari mereka yang tidak; Ini juga menyoroti mereka yang membentuk Indol dari triptofan dari yang tidak terbentuk, dan akhirnya membedakan bakteri motil dari yang tidak bergerak.

Sumber daya

Seperti cara budaya apa pun, ia memiliki unsur -unsur yang menyediakan nutrisi yang diperlukan sehingga mikroorganisme yang tidak menuntut dapat berkembang. Elemen -elemen ini diwakili oleh Peptones dan Triptein.

Pengembangan mikroorganisme di lingkungan sangat penting untuk mengamati ada atau tidak adanya karakteristik yang berarti mengevaluasi.

Produksi hidrogen sulfida

Huruf S dari akronim SIM mengacu pada produksi hidrogen sulfida (h₂S). Bakteri yang mampu membentuk hidrogen sulfida akan menggunakan natrium sulfat.

Dapat melayani Anda: kompetisi intra -spesifik: karakteristik, jenis dan contoh

Setelah H terbentuk₂S -Gas tidak berwarna-, ini bereaksi dengan garam besi yang ada di tengah, membentuk besi sulfida, terlihat jelas (endapan hitam). Bakteri yang tidak membentuk h₂S, tinggalkan media warna asli (krem).

Kehadiran endapan hitam dapat menghambat interpretasi motilitas. Namun, diketahui bahwa sebagian besar enterobacteria menghasilkan HT₂S adalah motilitas positif, seperti Salmonella, Proteus dan Citrobacter. Selain itu, endapan hitam yang menutupi hampir seluruh media, menunjukkan motilitas positif.

Formasi Indol

Huruf kedua dari akronim SIM adalah "I", yang mewakili pembentukan Indol.

Dalam hal ini, Tripteine, selain menjadi sumber nutrisi, memenuhi fungsi mendasar lainnya. Pepton ini kaya akan asam amino yang disebut tryptophan, oleh karena itu, dapat menunjukkan bakteri yang menghasilkan triptofanase.

Enzim ini bertanggung jawab atas Clivar untuk asam amino triptofan, dengan pembentukan Indol (zat tidak berwarna), asam piruvat dan amonium yang tidak berwarna).

Itulah sebabnya, untuk menunjukkan reaksi ini perlu. Salah satu dari keduanya bereaksi dengan Indol, membentuk cincin berbentuk fuksia merah di permukaan agar. Jika cincin warna fuchsia muncul, tes indol ditafsirkan sebagai positif.

Bakteri yang tidak memiliki enzim ini, tidak akan membentuk cincin dan ditafsirkan sebagai uji indole negatif.

Penting untuk dicatat bahwa bukti indol harus menjadi yang terakhir untuk ditafsirkan, karena begitu reagen ditambahkan, media menghambat visualisasi motilitas.

Motilitas

Akhirnya huruf "m" dari kata sim berarti motilitas. Untuk mengevaluasi motilitas, media ini semi-solid secara strategis, karena karakteristik ini sangat penting untuk mengamati apakah ada gerakan bakteri atau tidak. Bakteri yang memiliki flagela adalah yang memberikan tes positif ini.

Dapat melayani Anda: limfosit T: struktur, fungsi, jenis, pematangan

Tes positif akan dibuktikan ketika kekeruhan diamati, baik pada inokulum awal, dan di sekitar ini. Sementara, bakteri non -mobil hanya berkembang pada perjalanan inokulum awal.

Persiapan

Media sim

Beratnya 30 gr dari media dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Campuran dibiarkan beristirahat selama 5 menit dan kemudian dipanaskan sampai mendidih, sering diaduk sampai pembubaran total.

Distribusikan campuran dalam tabung reaksi dengan tutup kapas dan autoklavasi pada 121 ° C selama 15 menit. Lepaskan rak tabung autoklaf dan biarkan menguat dalam posisi vertikal, sehingga mediumnya dalam bentuk taco.

Untuk konservasinya disimpan di lemari es sampai digunakan. Media yang disiapkan harus memiliki pH akhir 7,3 ± 0,2.

Saat menginokulasi media, ini harus pada suhu kamar. Warna mediumnya adalah krem.

Reagen Kovac

Ukur 150 ml amil atau isoamil atau butil alkohol. (Gunakan salah satu dari tiga yang disebutkan).

Larutkan 10 gr dari p-dimethylaminobenzaldehyde. Kemudian, perlahan tambahkan 50 mL asam klorida terkonsentrasi.

Reagen siap digunakan tidak berwarna atau jernih kuning. Itu harus disimpan dalam botol kuning dan disimpan di lemari es. Jangan gunakan jika Anda mengambil warna coklat gelap; Yang menunjukkan bahwa itu rusak. Reagen ini lebih disukai ketika datang ke Enterobacteria.

Reagen Erlich

Berat 2 gr dari p-dimethylaminobenzaldehyde dan larut dalam 190 mL alkohol etil absolut dan perlahan-lahan aduk dengan 40 mL asam hidroklorat pekat terkonsentrasi. Simpan reagen Kovac dengan cara yang sama. Reagen Ehrlich lebih banyak digunakan untuk bakteri non -fermentasi dan anaerobik.

Aplikasi

Media SIM sangat digunakan di laboratorium bakteriologi. Ini memiliki keuntungan bahwa tiga karakteristik penting dapat diamati dalam identifikasi enterobacteria.

Dapat melayani Anda: fermentasi asetat: karakteristik, aplikasi, contoh

Ditabur

Cara yang tepat untuk menabur media ini adalah menggunakan jarum, yang dengannya sebagian koloni murni untuk dipelajari dan dimasukkan di tengah medium secara vertikal. Satu lunge harus dilakukan. Tusukan tidak boleh mencapai bagian bawah tabung, yang benar adalah hanya menutupi dua pihak ketiga.

Tidak disarankan untuk mengulangi inokulum, karena ini dapat membawa interpretasi palsu dari motilitas positif. Media yang diinokulasi diinkubasi dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C selama 24 jam.

Setelah waktu selesai, diamati apakah ada produksi H atau tidak₂S dan baca motilitas. Akhirnya, Indol terungkap, menambahkan 3 hingga 4 tetes reagen Ehrlich atau Kovac, dicampur dengan lembut dan ditafsirkan.

Sumber: Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.

Qa

Sebagai kontrol sterilitas, satu atau dua tabung tanpa diinokulasi dalam 37 ° C per 24 jam diinkubasi. Diharapkan bahwa setelah ini tidak ada pertumbuhan atau perubahan warna.

Sebagai kontrol kualitas, Anda dapat menggunakan strain yang diketahui bersertifikat, seperti: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

Hasil yang diharapkan adalah: Escherichia coli H₂S negatif, indol dan motilitas positif, Enterobacter aerogenes hanya motilitas positif, Salmonella typhimurium H₂S dan motilitas positif, dengan indole negatif. Proteus vulgaris Semua positif, selama Klebsiella pneumoniae Dan Shigella Sonnei Semua negatif.

Batasan

-Beberapa strain Morganella Morganii, Di antara strain lainnya dapat menghasilkan pigmen kecoklatan di media ini karena produksi melanin, ini tidak boleh disamakan dengan endapan sulfida besi. Pada profesional yang tidak berpengalaman, situasi ini dapat menghasilkan positif palsu dalam interpretasi uji H₂S.

-Bakteri aerobik yang ketat hanya akan tumbuh di permukaan tabung, yang menghambat interpretasi motilitas.

Referensi

1. Laboratorium BD. BBL SIM Medum. 2008. Tersedia di: BD.com
2. Laboratorium Neogen. Sim Medum. Tersedia di: Foodsafety
3. Difco Francisco Soria Melguizo. Sim Medum. 2009. Tersedia di: http: // f-soria.adalah
4. Laboratorium Brizuela-Lab.  Sim rata -rata. Tersedia di: .Brizuela-lab.com
5. Laboratorium Britania. Sim rata -rata. 2015. Tersedia di: Studi.Itu/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.