Media Budaya, Fungsi, Jenis, Persiapan

Itu Media Budaya Mereka adalah persiapan gizi khusus untuk pemulihan, isolasi dan pemeliharaan mikroorganisme bakteri dan jamur. Media ini bisa solid, cair atau semi -solid.

Louis Pasteur adalah orang pertama yang menunjukkan bahwa dalam kaldu yang dibuat dengan potongan -potongan daging rebus, disajikan sehingga bakteri direproduksi dalam jumlah besar, ke titik mengoceh kaldu. Dalam hal ini, kaldu daging pasteur dianggap sebagai media kultur cair pertama yang digunakan.

Media kultur yang tidak siap (padatan dan cairan). Sumber: Flickr

Kemudian Robert Koch, berkat bantuan kolaboratornya Julius Richard Petri dan Walter Hesse, membuat kemajuan besar. Yang pertama merancang pelat Petri, yang masih digunakan sampai sekarang; Dan yang kedua terpikir olehnya untuk menggantikan gelatin agar agar-air untuk mempersiapkan media kultur yang solid, yang sangat relevan, karena jeli terdegradasi oleh beberapa mikroorganisme.

Saat ini ada banyak jenis media budaya untuk tujuan yang berbeda, oleh karena itu, ini diklasifikasikan sesuai dengan fungsinya: di antara yang paling penting, sarana budidaya gizi, selektif, diferensial, transportasi, pengayaan, penghitungan penghitungan, koloni, pemeliharaan dan untuk bukti kerentanan.

Beberapa media kultur istimewa untuk mengamati reaksi kimia, sangat berguna untuk identifikasi mikroorganisme yang terlibat. Di antara mereka mereka dapat disebutkan: Medium Kigler, Mio, Lia, Citrate, antara lain.

[TOC]

Sejarah

Media budaya pertama disiapkan oleh Louis Pasteur ketika dia mencoba.

Dia menyiapkan kaldu dengan potongan daging dan mengamati bahwa setelah beberapa hari setelah terpapar ke udara, dia menjadi keruh dan dalam kaldu ada sejumlah besar mikroorganisme yang cukup besar. Pada saat yang sama, kaldu lain dengan potongan daging yang sebelumnya direbus dan tertutup rapat tetap tembus cahaya ketika hari -hari berlalu pada hari -hari.

Ini menarik perhatian banyak peneliti dan menyadari bahwa mikroorganisme ini bertanggung jawab untuk membusuk daging dan selain menghasilkan beberapa penyakit.

Untuk alasan ini, penting untuk menciptakan cara untuk mereproduksi mikroorganisme ini di laboratorium untuk mempelajarinya secara lebih teliti.

Dalam hal ini, Robert Koch memberikan kontribusi yang sangat berharga dalam peningkatan teknik laboratorium tertentu, terutama yang terkait dengan isolasi bakteri, saat ia memperkenalkan konsep media kultur padat.

Pada awalnya ia menggunakan irisan kentang sebagai media padat tetapi kemudian menambahkan gelatin ke dalam kaldu daging dengan hasil yang lebih baik. Namun, ada kalanya jeli meleleh dan menjadi tanaman cair. Hari ini diketahui bahwa ini terjadi karena beberapa bakteri mampu menghidrolisis gelatin.

Saat itulah gagasan menggunakan agar-pertambangan, sebuah kompleks yang digunakan istrinya untuk mengentalkan permennya yang terpikir oleh salah satu kolaboratornya.

Media budaya dasar ini secara bertahap canggih, sampai mencapai media budaya yang dikenal saat ini.

Komposisi

Setiap media memiliki komposisi yang berbeda, tetapi sangat penting bahwa ia mengandung nutrisi spesifik untuk pengembangan yang baik dari jenis mikroorganisme yang dicari.

Ini juga dapat mengandung bahan kimia spesifik yang membantu mengungkapkan jalur metabolisme yang memiliki strain tertentu, atau yang membuktikan keberadaan enzim tertentu.

Elemen penting lainnya adalah penggunaan zat penyerap kejut. Ini membantu menjaga keseimbangan osmotik media, serta pH.

Mereka juga dapat mengandung karbohidrat dan indikator pH untuk menunjukkan fermentasi gula tambahan. Perubahan warna medium akan diamati jika ada pengasaman yang dihasilkan oleh fermentasi.

Beberapa media budaya mengandung zat inhibitor. Bergantung pada zat yang digunakan, pertumbuhan mikroorganisme akan dibatasi dan yang lain akan disukai.

Jenis Media Budaya

Media budidaya diklasifikasikan menurut berbagai kriteria. Ini adalah: menurut konsistensi mereka, komposisi dan fungsinya.

- Menurut konsistensi Anda

Cairan

Mereka tidak mengandung agar -ago. Pertumbuhan bakteri atau jamur dibuktikan dengan kekeruhan kaldu, yang awalnya tembus cahaya.

Padatan

Mereka mengandung antara 1,5 hingga 2% agar -agar. Campuran yang dipadatkan memiliki permukaan yang menolak perpindahan halus dari pegangan platinum, tanpa rusak.

Semi -solid

Mereka mengandung sekitar 0,5% agar -agar, oleh karena itu, ini adalah keadaan perantara antara cairan dan padatan. Ideal di media yang berfungsi untuk melihat motilitas. Mereka juga direkomendasikan untuk konservasi strain, karena mereka menjaga kelembaban untuk waktu yang lama.

Dapat melayani Anda: Saltacionisme: Karakteristik, Bukti, dan Contoh

Biphasics

Mereka adalah sarana yang disiapkan sedemikian rupa sehingga ada fase padat dan pada ini media cair. Banyak digunakan untuk kultur darah.

- Menurut komposisinya

Media budaya alami

Mereka adalah zat yang diambil langsung dari alam untuk menumbuhkan bakteri, memberi mereka lingkungan yang paling dekat dengan bagaimana mereka berkembang di ekosistem secara normal. Contoh, susu, jus, darah encer, serum, dll.

Media Budaya Sintetis

Mereka adalah yang paling banyak digunakan saat ini, mereka adalah dehidrasi yang kami peroleh di rumah komersial dan yang diketahui komposisi kimianya, karena mereka telah dirancang secara strategis sesuai dengan jenis mikroorganisme yang ingin diisolasi.

Media Budaya Semi -Stintesis

Ini adalah kombinasi dari media sintetis yang ditambahkan elemen alami untuk memperkaya media.

Media kultur seluler

Mereka adalah sarana khusus untuk budidaya virus, seperti mikroorganisme ini tidak dapat bertahan hidup di luar sel, mereka harus mengandung jaringan atau sel hidup, dari hewan atau tanaman.

Contoh: Tanaman ginjal monyet seluler atau telur embrionik.

- Menurut kegunaannya

Nutrisi, selektif, diferensial, transportasi, pengayaan, identifikasi, kuantifikasi koloni, pemeliharaan dan tes kerentanan. Akan dijelaskan nanti.

Fungsi

Terlepas dari jenis media budaya, setiap orang memiliki kesamaan dan mereka memfasilitasi atau mempromosikan reproduksi mikroorganisme tertentu. Perbedaannya terletak pada komposisi masing -masing, yang merupakan faktor penentu untuk utilitas akhir yang akan mereka miliki.

Masing -masing media budaya yang ada dirancang secara strategis untuk fungsi spesifik yang dibuatnya, yaitu, semua memiliki fondasi yang mengatur pedoman untuk fungsi spesifik mereka.

Perlu dicatat bahwa media kultur setelah ditaburkan harus menjalani suhu dan kondisi oksigen yang sesuai dengan jenis bakteri atau jamur yang ingin Anda isolasi.

Misalnya, jika Anda ingin mengisolasi bakteri anaerob mesofilik, agar darah dan inkubasi dalam kondisi anaerobiosis (tanpa oksigen) pada suhu 37 ° C selama 48 jam selama 48 jam selama 48 jam.

Sekarang, jika jamur diperlukan untuk mengisolasi, Sabouraud agar dengan antibiotik digunakan. Ini diinkubasi dalam aerobiosis, pada suhu kamar selama beberapa hari, karena yang terakhir adalah pertumbuhan yang lambat.

Media budaya bergizi sederhana

Seperti namanya, media kultur ini mengandung zat nutrisi, seperti vitamin, asam amino, nitrogen dan sumber karbon, di antaranya dapat disebutkan: ekstrak daging atau ekstrak ragi, pati jagung, pankreas dicerna, peptones, glukosa, antara antara.

Mereka juga mengandung komponen lain yang memberikan keseimbangan osmotik bagi lingkungan, karena sebagian besar tanaman membutuhkan pH mendekati 7,0. Unsur -unsur ini dapat berupa: natrium klorida, disodium fosfat, antara lain.

Pengencer adalah air suling dan media padat memiliki agar-add.

Tujuan dari budaya ini adalah untuk memulihkan mikrobiota bakteri atau jamur yang ada dalam sampel tertentu. Itu tidak membedakan antara mikroorganisme, karena mampu menumbuhkan sejumlah besar bakteri, baik gram positif maupun gram negatif, serta jamur ragi dan miselial jamur.

Mereka direkomendasikan untuk menabur sampel yang berasal dari situs yang biasanya steril. Namun, mereka tidak berfungsi untuk menuntut mikroorganisme.

Mereka juga berguna untuk pemeliharaan strain, selama mereka tidak mengandung glukosa.

Media budaya yang memperkaya

Jika darah atau darah yang dipanaskan ke media nutrisi sederhana ditambahkan, mereka menjadi media yang diperkaya (masing -masing agar dan agar cokelat).

Cara ini sangat berguna untuk menabur sampel yang biasanya steril, untuk menyelamatkan strain yang lemah dan mengisolasi mikroorganisme yang menuntut dari sudut pandang nutrisi.

Media Budaya Selektif

Media kultur selektif, selain mengandung nutrisi penting untuk pertumbuhan mikroorganisme yang menarik, juga ditambahkan zat penghambat, seperti antibiotik, antijamur, pewarna, garam empedu, antara lain.

Zat inhibitor dimaksudkan untuk mengurangi variasi strain yang dapat tumbuh, mendukung pertumbuhan kelompok khusus yang ingin menyelamatkan.

Contoh: Kaldu EC (khusus untuk coliform total dan tinja) atau Sabouraud agar dengan antibiotik (khusus untuk jamur).

Media budaya diferensial

Media diferensial mengandung elemen nutrisi yang diperlukan untuk pertumbuhan kelompok mikroorganisme tertentu dan juga mengandung zat -zat yang dengan adanya mikroorganisme tertentu akan dimetabolisme atau terdegradasi.

Yaitu, mereka akan menghasilkan reaksi kimia yang dengan satu atau lain cara akan dibuktikan dalam media kultur.

Itu dapat melayani Anda: zona fotik: karakteristik, lampu flora, fauna

Beberapa reaksi basa atau mengasamkan media dan berkat adanya indikator pH, perubahan ini dapat dibuktikan melalui belokan berwarna di tengah dan koloni.

Oleh karena itu, di antara sekelompok besar bakteri yang dapat tumbuh dalam medium itu, mereka yang memetabolisme atau menurunkan zat dan yang tidak melakukannya, hanya mengamati warna koloni dan medium.

Sebagai contoh, agar darah memungkinkan untuk membedakan bakteri yang menghasilkan hemolisis beta (halo transparan) dari yang menghasilkan hemolisis alfa (halo kehijauan) dan dari yang tidak menghasilkan hemolisis.

Media selektif dan diferensial

Contoh dari ini adalah apa yang terjadi dalam agar MacConkey. Ini selektif karena hanya memungkinkan pertumbuhan basil negatif gram; Dan itu berbeda, karena dapat membedakan bakteri fermentasi laktosa (koloni warna fuchsia) dari non -fermentasi (warna pucat atau warna pink tidak berwarna).

Transportasi Media Budaya

Seperti namanya, itu berarti digunakan untuk mengangkut sampel yang telah diambil di tempat yang lebih atau kurang jauh ke laboratorium yang akan memproses sampel. Alat transportasi mempertahankan sampel dalam kondisi terbaik untuk hasil yang dapat diandalkan.

Media kultur ini memiliki karakteristik yang sangat khusus, karena mereka tidak dapat melebihi nutrisi, karena populasi bakteri yang hadir tetap layak, tetapi tanpa meningkat jumlahnya.

Mereka biasanya adalah media semi -solid, memungkinkan sampel terhidrasi. Namun, tidak boleh tersebar untuk mengirim sampel sesegera mungkin ke laboratorium. Contoh alat transportasi: Medio Stuart, Cary Blair dan Amies.

Budaya setengah dan pengayaan

Media kultur ini likuid. Mereka digunakan untuk menyelamatkan patogen spesifik yang pada waktu tertentu dapat ada dalam sampel kuantitas minimum.

Juga berguna untuk menyelamatkan strain patogen yang mungkin lemah karena beberapa pengobatan sebelumnya diterima. Misalnya: air peptonada, kaldu tioglikolat dan kaldu selenito.

Sarana ini memiliki zat penghambat yang menghindari pertumbuhan mikrobiota yang menyertainya, dan nutrisi spesifik yang mendukung pengembangan mikroorganisme yang menarik.

Media budidaya untuk tujuan identifikasi 

Media ini memiliki zat yang dapat dimetabolisme secara kimia oleh bakteri tertentu, menghasilkan reaksi kimia yang menunjukkan adanya enzim spesifik atau jalur metabolisme.

Oleh karena itu, mereka digunakan sebagai tes biokimia yang membantu pengakuan genre dan spesies dari kelompok strain tertentu. Contoh: Kigler medium bukti jika mikroorganisme mampu memfermentasi glukosa dan laktosa, jika menghasilkan hidrogen dan gas sulfida.

Media ini mengandung zat yang mengungkapkan yang memungkinkan mengamati reaksi, seperti indikator pH, dan ion besi.

Tes sederhana ini dapat membedakan dua kelompok besar mikroorganisme bakteri, seperti bakteri yang termasuk dalam keluarga bakteri Enterobacteriaceae yang disebut non -fermentasi.

Berarti menghitung koloni

Ini adalah cara sederhana, tidak selektif yang berfungsi untuk kuantifikasi populasi mikroba, seperti akun standar. Jenis mikroorganisme yang akan tumbuh dalam media ini akan tergantung pada kondisi suhu dan oksigen yang ditetapkan.

Media budidaya untuk bukti kerentanan

Media standar untuk tujuan ini adalah agar Müeller Hinton, ini berarti sangat ideal untuk mengevaluasi perilaku antibiotik yang berbeda terhadap mikroorganisme patogen yang terisolasi.

Ini sangat berguna pada bakteri kecil yang menuntut, sedangkan pada bakteri yang menuntut itu hanya dapat digunakan jika ini dilengkapi dengan darah.

Perawatan Sarana untuk Pemeliharaan

Cara -cara ini dimaksudkan untuk mereproduksi mikroorganisme dan juga mempertahankan kelangsungan hidup bakteri atau jamur dan juga bahwa fungsi fisiologisnya dipertahankan.

Karakteristik penting adalah bahwa jenis media ini tidak boleh mengandung glukosa, karena meskipun merupakan elemen yang memberikan pertumbuhan yang cepat, fermentasi menghasilkan asam yang mengurangi kehidupan mikroorganisme.

Beberapa laboratorium perlu menjaga mikroorganisme tertentu dapat digunakan selanjutnya dalam studi penelitian, kontrol internal atau untuk tujuan pengajaran.

Persiapan

Saat ini ada banyak merek dagang yang mendistribusikan media budaya yang berbeda. Media datang dalam bentuk yang diliofilisasi atau dehidrasi, terkandung dalam stoples cahaya hermetis dan terlindungi.

Setiap media membawa label yang menentukan nama media, komponennya, nomor lot dan berapa berat untuk mempersiapkan satu liter media kultur.

Dapat melayani Anda: Evolusi Prebiotik: Di mana itu terjadi dan apa yang diperlukan

Sebagai pengencer, air suling digunakan. Jumlah berat larut dalam satu liter air suling sampai campuran dihomogenisasi. Sebagian besar media dibawa ke autoclave, suhu 15 pon, 121 ° C, selama 15 menit waktu.

Media cair sudah didistribusikan dalam tabung kerjanya masing -masing, sedangkan media padat autoklavasi di labu Erlenmeyer.

Yang terakhir dibiarkan berdiri sampai mencapai suhu 55 ° C dan disajikan di piring Petri di dalam lonceng aliran laminar atau di dekat Bunsen yang lebih ringan. Mereka diizinkan untuk mengeras dan terbalik dalam kulkas.

Ada juga media kultur padat yang didistribusikan dalam tabung, memungkinkan diri mereka untuk memperkuat baik dalam taco (lurus) atau puncak seruling (miring).

Sebelum menggunakan media kultur yang disiapkan, baik padat atau cair, itu harus berkurang sebelum menabur sampel.

Pentingnya

Media kultur tidak diragukan lagi merupakan alat kerja yang sangat berharga bagi ahli mikrobiologi, karena mereka memungkinkan pemulihan agen menular bahwa pada waktu tertentu mungkin mempengaruhi individu atau mencemari makanan, lingkungan atau permukaan.

Dalam hal ini, dapat dikatakan bahwa mikrobiologi memiliki berbagai bidang, di antaranya adalah mikrobiologi klinis, industri, lingkungan, makanan, antara lain dan dalam semua cara budaya digunakan.

Tentu saja, jenis media yang digunakan dalam setiap kasus dapat bervariasi sesuai dengan kebutuhan dan jenis sampel yang diproses. Kelompok mikroorganisme yang dicari juga memengaruhi.

Isolasi mikroorganisme patogenik atau menyebabkan polusi sangat diperlukan untuk dapat menempatkan pengobatan yang efektif atau mengadopsi prosedur yang membantu menghilangkan polutan yang dimaksud.

Dalam kasus mikrobiologi klinis, itu tidak hanya penting.

Studi ini yang juga menggunakan media kultur akan memungkinkan untuk mengatakan antimikroba mana yang sensitif dan mana yang resisten atau secara singkat, yang dapat digunakan sebagai pengobatan dan yang tidak.

Oleh karena itu, media budaya tidak dapat hilang di laboratorium mikrobiologi, apapun daerahnya.

Akhirnya, dapat dikatakan bahwa media kultur telah memungkinkan kami untuk menyelidiki berbagai aspek, baik bakteri maupun jamur.

Kontrol kualitas media budidaya

Persiapan dan penggunaan media budaya tidak boleh dilakukan dengan enteng. Di setiap laboratorium harus ada apartemen yang menerapkan protokol kontrol kualitas untuk media, setiap kali lot baru disiapkan, dan dengan demikian menjamin bahwa mereka disiapkan dengan baik, steril dan fungsional.

Untuk mengevaluasi sterilitasnya, satu atau dua cara dari masing -masing lot diambil secara acak dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama beberapa hari (seharusnya tidak ada pertumbuhan). Untuk memeriksa fungsinya strain referensi ATCC digunakan (Koleksi Budaya Tipe Amerika) Dibudidayakan dan layak.

Pembuangan media budidaya

Setelah menggunakan media budaya, mereka harus dibuang sedemikian rupa sehingga tidak mencemari lingkungan.

Untuk melakukan ini, bahan disterilkan dalam autoklaf sebelum dibuang. Selanjutnya, bahan gelas dilepas. Yang terakhir menjadi dicuci, dikeringkan, disterilkan dan disimpan untuk digunakan nanti. Dalam hal menggunakan pelat sekali pakai, ini disterilkan dan kemudian dibuang dengan tas khusus.

Referensi

1. Mikrobiologi Borrego dalam Perangko VIII. Robert Koch: The Triumph of Ketekunan (i). SEM 2018, 117 (1): 1-18 Universitas Malaga. Tersedia di: Days.UAB.Kucing/
2. Volcy c. Kejadian dan evolusi postulat Koch dan hubungannya dengan fitopatologi. Ulasan Kolombe. 2008; 26 (1): 107-15. Tersedia di: Scielo.org.bersama/
3. Burguet Lago Nancy, Castillo Abraham Lourdes. Kontrol kualitas media kultur yang digunakan dalam pemantauan lingkungan dari area produksi rahasia. Epidemiol Hig Rev Kuba 2013; 51 (2): 155-160. Tersedia di: Scielo.
4. Bonilla M, Pajares S, Vigueras J, Sigala J, Le Borgne S. Manual Material Didactic Praktik Mikrobiologi Dasar. Universitas Otonomi Metropolitan. Divisi Ilmu Pengetahuan Alam dan Teknik. Unit Cuajimalpa. 2016. Tersedia di: CUA.Uam.MX/
5. Carbajal a. Media Kultur Seluler: Ulasan. Labome dunia laboratorium. Pusat Medis Universitas Pittsburgh, Amerika Serikat. 2013 tersedia di: ES/
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.KE. Argentina.